❶ 关于DNA的粗提取和鉴定的问题
1、实验中两次使用蒸馏水。
第一次，取血细胞液时加蒸馏水，目的是让血细胞吸水涨破
第二次是在析出含DNA的粘稠物后，目的是稀释NACL溶液，使DNA逐渐析出
2、加3次NACL，
第一次，在溶解核内DNA时，加入NACL后充分搅拌，加速染色质中DNA与蛋白质的分离，使DNA充分游离并融入NACL中
第二次在DNA粘稠物在溶解时，家NACL是使DNA再溶解
第三次是在DNA的鉴定中，目的是溶解DNA
3、过滤3次
第一次在提取血细胞核物质时进行过滤，取得的滤液中含有染色质，而滤出的是细胞膜、核膜和细胞器等的破碎结构
第二次在滤去含有DNA粘稠物只能够，滤液中含有仍然溶解在NACL中的细胞中的一些成分，如蛋白质等
第三次在过滤含DNA的2mol/L的NACL溶液时，过滤后的滤液中含有DNA
(这可是纯手打的，绝对正确，有不明白的再问我）QQ7428936
❷ DNA的粗提取中，血细胞胀破后的滤液中，DND应该是染色质的状态，它有没有溶解
1、实验中两次使用蒸馏水.
第一次,取血细胞液时加蒸馏水,目的是让血细胞吸水涨破
第二次是在析出含DNA的粘稠物后,目的是稀释NACL溶液,使DNA逐渐析出
2、加3次NACL,
第一次,在溶解核内DNA时,加入NACL后充分搅拌,加速染色质中DNA与蛋白质的分离,使DNA充分游离并融入NACL中
第二次在DNA粘稠物在溶解时,家NACL是使DNA再溶解
第三次是在DNA的鉴定中,目的是溶解DNA
3、过滤3次
❸ 高中生物实验：DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定知识
1.DNA的粗提取与鉴定实验原理
(1)粗提取原理：在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0.14mol/L时，DNA的溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA溶解度又增大。
(2)纯化原理：DNA不溶于酒精，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。
(3)鉴定DNA原理：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
2.实验材料的选择及处理
(1)不选择猪血等哺乳动物的血液，因为哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
(2)需要在鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。
(3)需除去鸡血中的血浆，因为血浆中无DNA。
特别提醒：不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。
3.生物实验过程
步骤：提取细胞核物质→溶解核内DNA→析出DNA粘稠物→滤取含DNA的粘稠物→DN A粘稠物的再溶解→过滤含有DNA的氯化钠溶液→提取含杂质较少的DNA→DNA的鉴定。
操作要点：(1)2次加蒸馏水：第一次是在是为了使血细胞吸水膨胀破裂，加水后必须充分搅拌使血细胞充分破裂;第二次加蒸馏水是为了稀释氯化钠溶液。
(2)3次加氯化钠溶液：第一次加氯化钠后，必须充分晃动烧杯，使二者混合均匀，加速染色质中DNA与蛋白质分离，使DNA充分游离并溶解在氯化钠溶液中;第二次加氯化钠溶液也是为了DNA的再溶解，这时溶液中的蛋白质含量已很少;第三次加氯化钠溶液还是为溶解DNA。
(3)6次搅拌：除最后一次搅拌外前5次搅拌均朝一个方向:，并且在析出DNA、DNA再溶解和提取中，各步搅拌都要轻缓玻璃棒，不要直插烧杯底部防止DNA分子断裂。
(4)3次过滤：第一次过滤，留滤液;第二次过滤，留粘稠物;第三次过滤，留滤液。注意这3次过滤都用纱布，获得沉淀物或粘稠物的通常为多层，获得滤液的纱布层数适当减少。
特别提醒：若以植物为实验材料，步骤上大致相同，在材料的处理上有几点不同：一是增加研磨步骤，目的是破坏细胞壁;二是加入洗涤剂，目的是溶解细胞膜及核膜;三是加食盐，可加速细胞膜及核膜的破裂。
4.DNA的粗提取与鉴定实验注意事项
(1)用冷酒精浓缩和沉淀DNA时所用的95%酒精，必须经过充分预冷后才能使用，冷酒精与含 DNA的氯化钠溶液体积比是2：1 。如果用冷酒精处理后，悬浮于溶液中的丝状物较少，可将混合液放于冰箱中再冷却几分钟，然后再用玻璃棒卷起丝状物。
(2)鸡血细胞破碎以后释放的DNA，容易被玻璃容器吸附，由于细胞内DNA的含量本来就比较少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就会更少。因此，实验过程中最好使用塑料的烧杯和试管，这样可以减少提取过程中DNA的损失。
❹ DNA的粗提取和鉴定为什么要四次过滤第四次过滤有什么用
第一次过滤：过滤提取鸡血细胞核中的DNA(在滤液中),滤掉的是破碎的细胞结构（沉淀物）；
第二次过滤：过滤用2mol/L的NaCl充分溶解的DNA(在滤液中),滤去的是溶解度低的蛋白质等杂质（在沉淀物中）；
第三次过滤：过滤用0.14mol/L的NaCl析出的DNA（在沉淀物中）,滤去的是溶液中的杂质(在滤液中)；
第四次过滤：过滤再次用2mol/L的NaCl充分溶解的DNA(在滤液中),滤去的是溶解度低的蛋白质等杂质（在沉淀物中）；
第四次过滤进一步除杂并溶解DNA,为下一步用冷却的95%酒精析出DNA做准备.
有说三次过滤的,就是有的资料不考虑上边说的第一次过滤,不矛盾.
❺ 有关实验“DNA的提取及检测”的问题
实验准备工作：
1 所用离心管、枪头要洗净、烘干（最好灭菌）。
2 试剂配制：
1 M Tris-HCl (pH 8.0): 称取Tris-Base 121g, 加入约 ml 水在磁力搅拌器上搅拌，使其充分溶解后加入浓盐酸调整pH至8.0后加水定溶至1000 ml. 灭菌后于室温保存。
0.5 M EDTA (pH 8.0): 称取EDTA-Na2盐 187 g 加入约 800 ml水，在磁力搅拌器上边搅拌边加入固体NaOH，当EDTA和NaOH均完全溶解，溶液变清时其pH值刚好达到8.0左右，再用pH试纸略加调整即可, 灭菌后于室温保存。
5.0 M NaCl: 称取NaCl 300 g, 加入蒸馏水约800 ml 于磁力搅拌器上充分搅拌，约5分钟后停止搅拌，静止2~3分钟，倒出上清液，再加入100 ml蒸馏水重复前面的步骤，直到NaCl充分溶解后定溶至1000 ml., 灭菌后于室温保存。
酚：氯仿：异戍醇（25：24：1）的配制：可参考《分子克隆》亦可按如下方法配制取重蒸酚100 ml ，蒸馏水50 ml，8-羟基喹咛0.05g 加入500 ml玻璃烧杯于磁力搅拌器上边加热边搅拌，待酚达到水饱和后加入18 g Tris-Base，等Tris-Base 完全溶解后加入100 ml氯仿：异戌醇（24：1），搅拌10~20分钟，静止约10分钟，除去上层水相后，装入棕色瓶，最后加入20 ml 0.1M的Tris-HCl保护液于4℃保存。
DNA Buffer的配制：
1 M Tris-HCl (pH 8.0)
100 ml
0.5 M EDTA (pH 8.0):
100 ml
5.0 M NaCl:
300 ml
H2O
500 ml
灭菌后于室温下保存3个月左右，用时按1.5%往Buffer中加入CTAB，在电炉上烧开；在通风橱里加入1%的巯基乙醇( 现配现用)。
DNA的提取：
1 取2~5 g叶片或愈伤组织，加入适量液氮研碎，转入预冷的50ml离心管，加入20 ml DNA提取缓冲液充分摇匀，于65℃水浴60~90 min，中途轻轻摇匀两次。
2 加入15 ml 氯仿：异戍醇（24：1）轻轻摇匀10分钟，于BECKMAN离心机中4000 rpm离心15分钟。
3 取上清液于另一50 ml离心管加入10 ml 氯仿：异戍醇（24：1）重复步骤2。
4 吸上清液于一干净的50 ml 离心管，加入15 ml 冷冻的异丙醇，轻轻摇匀后于-20℃冷冻半小时，4000 rpm离心10分钟。弃上清液，加入5 ml 76%的乙醇（含10 mM
NH4Ac）浸泡5 h（或过夜），中途换乙醇2-3次。
5 弃乙醇风干沉淀约半小时，加入3.0 ml TE缓冲液（10 mM Tris-HCl pH 8.0；1 mM EDTA , pH 8.0），20 µl RNase A（10 mg/ml），37℃温浴过夜。
6 溶液转入一10 ml离心管，加入3.0 ml苯酚：氯仿：异戊醇（25：24：1）充分颠倒混匀，4000 rpm离心15 min，吸上清液于另一10 ml的离心管中，（可重复一次）。
7 加入1 ml 5.0 M的NaCl和3.0 ml水饱和乙醚，充分混匀，4000 rpm离心5 min。
8 弃乙醚，用20 µl枪头挡住离心管管口内侧，用力下压枪头，使枪头与管壁间形成一狭缝，让下清液从缝中流入另一10 ml离心管。
9 加入5 ml冷冻的异丙醇，轻轻摇匀后于-20℃冷冻半小时，4000 rpm离心10分钟。弃上清液，加入3 ml 70%的乙醇浸泡4~6 h（或过夜），中途换乙醇2-3次。风干乙醇，加入500 µl TE溶解，或浸在乙醇中长期保存。
DNA检测
1 取DNA原液15 µl稀释至3.0 ml，用UV-1601型紫外分光光度计测定230 nm、 260 nm及280 nm的吸光值。
高质量的DNA要求：A260/A230>2.0； 1.7<A260/A280<1.9
2 将DNA原液适当稀释后，用1 Χ TAE，0.8%琼脂糖凝胶2V/cm电泳1 h进行质量检测。
3 向一定量的DNA中加入限制性内切酶EcoR I至4-5U/μg DNA，37℃消化过夜，用0.5 Χ TBE，0.8%琼脂糖凝胶2.5V/cm电泳3 h进行检测。
CTAB法微量提取DNA
1. 药品的配制:
CTAB提取液：
(1)100mM Tris-HCl(PH 8.0),1.5M NaCl,50mM EDTA(PH 8.0)
(2)1% PVP,2% CTAB
(3)取少许(1)加到(2)中，搅拌成糊状,后加(1)至足量,65℃水浴充分溶解备用。使用前要在65℃温浴一会儿，然后加入1-4%巯基乙醇,混均匀。
苯酚：氯仿：异戊醇（25∶24∶1）： 重蒸酚65℃水浴溶解，在烧杯中加入80ml温热的蒸馏水，加入少许8-羟基喹啉，溶解后加入100ml重蒸酚，再加入100ml氯仿：异戊醇（24：1），加入20克Tris Base，磁力搅拌器上搅拌1.5 h左右至停止搅拌后很快分层，然后装入棕色瓶中，4℃冰箱中储存备用。
2. 材料的采取与保存：
在超净工作台上，取试管苗叶片，放入无菌的1.5 ml离心管中，置于冰盒中，然后把装有叶片的离心管一起装在纱布袋中，置液氮中冷冻10分钟，取出后置于—70℃冰箱中可长期保存，需要用时，取出置于冰盒中。
3．DNA的粗提
在装有叶片的离心管中加入石英砂少许（约0.07克），用事先灭过菌的—20℃冰箱中预冷的尖头玻棒将材料戳到底部，先压后研磨，研细后加入600 ul CTAB提取液，再继续研磨一会儿使其悬浮均匀，然后在65℃水浴锅中温浴60-90分钟，隔30分钟取出上下轻轻颠倒几次，水浴之后，加入700ul苯酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），，上下晃动10分钟以上，其间置于37℃水浴锅中温浴一会（冬季），使之充分混匀，然后10000-12000rpm离心5-10分钟，吸取上清液转至另一离心管中，加入60 ul 5M NaCl，再加入-20℃冰冻无水乙醇1ml，轻轻颠倒数次，混合均匀后冰冻30分钟沉淀DNA，然后8000-10000rpm离心5分钟，弃上清液，加入1 ml 70%酒精浸泡2小时或过夜，8000rpm离心5分钟,弃酒精之后在工作台上风干DNA，注意不要过干，否则会使以后溶解困难。
4. DNA的纯化：
向风干后的DNA中加入500 ul 1xTE，37℃水浴15-30分钟至DNA完全溶解，然后加入700ul苯酚：氯仿：异戊醇（25：24：1），上下颠倒离心管约10分钟，至充分混匀，其间置于37℃水浴锅中温浴一会（冬季）；10000-12000 rpm离心5分钟，吸取上层液至另一离心管中，加入700ul氯仿：异戊醇（24：1），颠倒10分钟（方法同上），10000 -12000rpm离心5分钟，吸取上层液至另一离心管中，加入60 ul 5M NaCl，再加入1ml冷冻的无水乙醇，轻轻颠倒，然后在-20℃冰箱中置30分钟沉淀DNA，8000-10000 rpm离心2-3分钟，使DNA分散状紧贴在管壁上，弃酒精，加70%酒精1ml浸泡,2小时后换一次,后浸泡过夜，8000rpm离心3分钟后弃酒精，风干，加50-100ul1xTE充分溶解，然后每管加5ul 5mg/ml Rnase,37℃水浴6小时或过夜。
5. DNA检测:
（1）0.8%琼脂糖凝胶电泳30-60分钟：
TAE 100ml，EB 30ul，样品3-5ul，电压90V，
观察A：DNA是否跑出，带型是否整齐划一；B：RNA是否除尽
（2）分光光度计检测D260/D280的比值：在1.8-2.0的范围内认为纯度较高上述方法提取的DNA比值在1.65-1.95之间。浓度=30000xOD260（DNA样品为5ul时）。
不知道你说的是动物的还是植物的，我当年做的是动物的。用的是鸡血，因为在学校，没有生物书，只能粗略的查一下了
1、实验中两次使用蒸馏水。
第一次，取血细胞液时加蒸馏水，目的是让血细胞吸水涨破
第二次是在析出含DNA的粘稠物后，目的是稀释NACL溶液，使DNA逐渐析出
2、加3次NACL，
第一次，在溶解核内DNA时，加入NACL后充分搅拌，加速染色质中DNA与蛋白质的分离，使DNA充分游离并融入NACL中
第二次在DNA粘稠物在溶解时，家NACL是使DNA再溶解
第三次是在DNA的鉴定中，目的是溶解DNA
3、过滤3次
第一次在提取血细胞核物质时进行过滤，取得的滤液中含有染色质，而滤出的是细胞膜、核膜和细胞器等的破碎结构
第二次在滤去含有DNA粘稠物只能够，滤液中含有仍然溶解在NACL中的细胞中的一些成分，如蛋白质等
第三次在过滤含DNA的2mol/L的NACL溶液时，过滤后的滤液中含有DNA
❻ 纱布上有杂质
在DNA粗提取与鉴定实验中，将第三次过滤获得的纱布上含有的DNA的黏稠物（含有较多杂质）分别处理如下：
放入2mol/L的NaCl溶液，搅拌后过滤，除去不溶于NaCl溶液的杂质；再加入冷却的、与滤液体积相等的95%酒精溶液，除去溶于酒精的杂质，再用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物．
故选：C．
❼ 在DNA的粗提取实验中，曾进行三次过滤，对三次过滤的叙述正确的是（）A．第一次过滤后，核物质存在于
A、在鸡血细胞中加入蒸馏水，使得血细胞吸水破裂，细胞核内物质释放出来，然后用纱布过滤取其滤液，A错误；
B、在2mol/L的NaCl溶液加蒸馏水并搅拌，由于DNA溶解度下降而析出白色丝状黏稠物，用多层纱布过滤取其黏稠物，B正确；
C、在烧杯中用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA，用两层纱布过滤含DNA的NaCl溶液，C错误；
D、第三次过滤后，DNA存在于滤液中，能除去高浓度盐中不能溶解的杂质，D正确．
故选：BD．
❽ dna的粗提与鉴定实验为什么加入2m的nacl后不过滤就加蒸馏水 博客
1、实验中两次使用蒸馏水。
第一次，取血细胞液时加蒸馏水，目的是让内血细胞吸水涨破
第二次是容在析出含DNA的粘稠物后，目的是稀释NACL溶液，使DNA逐渐析出
2、加3次NACL,
第一次，在溶解核内DNA时，加入NACL后充分搅拌，加速染色质中DNA与蛋白质的分离，使DNA充分游离并融入NACL中
第二次在DNA粘稠物在溶解时，家NACL是使DNA再溶解
第三次是在DNA的鉴定中，目的是溶解DNA
3、过滤3次
第一次在提取血细胞核物质时进行过滤，取得的滤液中含有染色质，而滤出的是细胞膜、核膜和细胞器等的破碎结构
第二次在滤去含有DNA粘稠物只能够，滤液中含有仍然溶解在NACL中的细胞中的一些成分，如蛋白质等
第三次在过滤含DNA的2mol/L的NACL溶液时，过滤后的滤液中含有DNA