過濾細胞培養基的濾器是有機

⑴ 細胞培養過濾培養基和PBS時所用的0.22的濾膜是水膜還是有機膜或者是混合膜

0.22um除菌濾膜有多種不同的材質，常用的有醋酸纖維素、聚醚碸、PVDF、聚四氟乙烯、尼龍等。若過濾水溶液的濾膜為疏水材質，濾膜表面一般有一層親水配體。過濾細胞培養基常用的濾膜材質為醋酸纖維素和聚醚碸。希望對你有幫助。GOOD LUCK :)

⑵ 培養基過濾

WC型微孔濾膜使用說明書

本廠用二醋酸——三醋酸纖維素為基材，以流涎法製成微孔濾膜（簡稱MC濾膜），是現在國內新型的一個品種，它克服了目前常用的硝酸—酸酸混合纖維素微孔濾膜（簡稱混合濾膜）的質脆、易斷裂、有靜電吸引、易燃，遇75%以上酒精易膨脹與溶解及在偏鹼性溶液中易產生有毒的硝酸根和亞硝酸根等的不足之處。本廠MC濾膜在國內上百家葯廠、醫院、科研所等廣泛用於大輸液、針劑及各種溶液精濾，使用效果極佳，澄明度合格率普遍提高。目前該產品暢銷全國，深受用戶歡迎。同時微孔濾膜不但用於制葯業，而且在生物製品、醫學微生物學、化工、電子工業、冶金工業、臨床化驗、釀造、鍾表、航空等工業方面超純水的制備、空氣凈化、醫葯用油、潤滑、燃料用油及科研實驗化驗室濾除細菌和微粒方面等將有越來越廣泛的推廣和應用。
一、 要用途
（1） 醫葯工業：用於水針劑，大輸液及結晶前溶液的微粒和細菌過濾，抗菌素、球蛋白，疫苗血清及組織培養等過濾。
（2） 電子工業：用於半導體器件和集成電路車間的空氣凈化，制備洗滌用的高純水質，對溶劑、顯影劑、光刻膠等進行凈化處理。
（3） 日化工業：用於日用化妝品中含乙醇和油脂類溶液的微粒過濾。
（4） 公共衛生：用於飲水過濾,河塘水質細菌過濾檢查、工作地區粉塵微粒過濾檢驗。
（5） 食品工業：飲料果汁、酒類、油類等的滅菌和懸浮雜質的過濾。
（6） 亦可用於無菌檢查——濾膜過濾法及其它科學研究中的分析測定等。
二、 MC型濾膜性能介紹
（1） 孔徑均勻：用汞壓法測定額定孔徑分布均勻，並用放大電鏡掃描圖象分析，額定孔徑基本一致。
（2） 孔隙率高：每平厘米濾膜中可包含一千萬至一億個額定微孔，以孔隙率測定法測得孔隙率在80%以上。
（3） 濾膜透水率高、濾速快：用透水率測定法測得0.8UM微孔濾膜透水率可達215亳升/平方厘米。分，1.2UM透水率可達311亳升/平方厘米。分。
（4） 強度高有韌性，因MC型濾膜生產過程中的三醋酸纖維素分子乙醯化完全、張力強度高，爆破強度法測定厚度0.10~0.15毫米膜，爆破強度≥3公斤/平方厘米，膜有韌性，即使對折數次也不易斷裂，所以使用壽命長。
（5） 濾膜的各向同性：MC型濾膜為各向同性，不分正反面，對額定孔徑以上的固體微粒能起到絕對截留作用。
（6） 熱穩定性：在120度熱壓滅茵30分鍾，熱穩定性良好。
（7） 化學穩定性：可過濾PH2~11各種葯液，還可過濾儀表油、5%醋酸、6N硫酸、6N氫氧化鉀、無水乙醇、丙三醇、甲醇、正丙醇、導丙醇、偏笨三酸三辛酯、聚乙二醇、各種酒類、飲料、醋等。
（8） MC型濾膜還具有無毒、無媒質遷移等優點。
三、 可供規格
孔徑（微米）：0.22 0.3 0.45 0.65 0.8 1.0 1.2 3~5
直徑（毫米）：Ф25 Ф35 Ф50 Ф100 Ф150 Ф200 Ф300 Ф400 （如需特殊規格可定製）
各種孔徑適用范圍
（1）濾除微粒：應選用0.65um 0.8um 1.2um的濾膜.
（2）濾除細菌：應選用0.45um 0.3um 0.22um的濾膜.
四、 使用方法
（1） 將濾膜於70度左右的蒸餾水中浸泡4小時以上，使用前再用適量新鮮蒸餾水沖洗一二次，然後裝入已洗過的濾器中備用。
（2） 過濾方法：可採用加壓法、真空法或位差液壓法、加壓法的濾速隨著壓力提高而加快，一般不超過3~4公斤/平方厘米，採用抽氣過濾時應防止外界空氣的細菌、微粒污染。利用位差過濾，一般位差應考慮在3~5米以上（約相當於0.5個大氣壓），否則影響濾速。
五、 注意事項
（1） MC型濾膜適宜於PH2~11，對強酸強咸或某些有機溶劑不宜使用。
（2） 本品一般耐溫120度，熱壓30分鍾，耐2~4公斤/平方厘米。
（3） 微孔濾膜只能作為最後過濾階段，濾液必須經過沙濾棒、濾紙、濾球等粗過濾材料，可避免濾膜堵塞。
（4） 操作MC型濾膜時不可觸及尖硬物品，以免引起穿孔現象。在裝濾膜前要嚴格檢查微孔濾膜是否有漏孔，不合格不得使用。

混合纖維素酯微孔濾膜使用說明書

混合纖維素製成的薄膜濾材，經有關單位多次廣泛使用，質量符合標准，其產品表面平滑、質地輕薄、孔隙率高、且微孔結構均勻，因此且有流速快，不易吸附的特點。

一． 用途
本品用於制葯業、生物製品、礦泉飲料、釀造、電子等工業方面的水質、醫葯用油、潤滑用油、燃料用油及科研實驗化驗室等濾除細菌和微粒，一般0。65微米以上可除微粒，0。45以下可濾除細菌。

二． 規格
混合纖維素酯微孔濾膜各種規格如下：
公稱孔徑（直徑微米）0.2 0.3 0.45 0.65 0.8 1.0 1.2
膜片直徑（毫米）25 35 50 60 100 150 200 300 400
（如需特殊規格另行定製）

三． 使用方法
1． 將濾膜平放於清潔盛器內，用70度左右的蒸餾水浸泡，使全部潤濕，數小時後（約4小時以上）傾去水，再用上法浸泡過夜，使用前再用適量溫蒸餾水清洗一次。
2． 將洗清的濾膜（濕）裝入適宜的濾器中，防止周圍漏液，自進液口放進濾液，並在:排氣口排出空氣，即可進行過濾。

四． 注意事項
1． 水膜片適宜於PH2-9的葯液，對強酸鹼或有機溶劑包括酒精等不宜使用。
2． 本品一般能耐溫120度，耐壓3~4公斤/平方厘米。
3． 微孔濾膜只能作為最後階段過濾，濾液必須先經過沙棒或其它濾材預過濾，以免濾膜堵塞。
上述使用方法，僅適用於水劑葯液或其它水溶劑的過濾。

⑶ 細胞培養濾器一次可濾多少培養基

單純培養基的話，大概300ml吧，我感覺，我們是加血清的培養基然後才濾的，所以不一樣，加20%血清的基本上120ml就得換

⑷ 細胞培養基用過濾器是304材質還是316材質

304和316都可以，大多企業的純化水管道都是304材質，國外進口過濾器一般為316材質。

⑸ 求助關於用氧化敏感探針DCFH-DA檢測細胞內ROS

DCFH-DA 的使用步驟：
DCFH-DA使用僅提供指導和參考，具體實驗方案應針對您的特定應用進行修改：
1. BCECF開封前，適當的做離心，以保證粉末落入樣品管低,確保染料足量；
2.加入適量無水DMSO（DMSO檢驗用有機濾器進行過濾使用） 或者其他有機溶劑配製成 1～10mM儲存液進行使用，剩餘的制備液分裝存儲，避免重復凍融影響試劑活性；
3. 正式開始實驗前，採用生理鹽緩沖液（常用的緩沖液有：PBS緩沖液，HBSSS緩沖液 和HEPESS緩沖液）稀釋至工作濃度1～10μM之間，不同實驗需根據需求調整至合適的工作濃度；
4. 從培養基中取出細胞，向細胞中加入染料工作溶液，然後在室溫或 37℃條件孵育細胞 5-60 分鍾時長；
5. 吸走染色用的工作液，然後用預熱的緩沖液 或 細胞培養液進行清洗一遍。之後再加入預熱的緩沖液或者細胞培養液，在適宜恆溫條件下孵育。對於二乙酸酯的衍生物，需要短暫復原時間讓細胞內酯酶將其水解，從而讓染料對氧化應激產生反應。最佳的復原時間范圍很廣，由於某些細胞類型通常顯示極其低水平的酯酶活性；
6.將細胞置於刺激物錢，需要先測定載入細胞的背景熒光強度；
7. 評估陰性對照：

• 綠色發射光譜內檢查未染色細胞的自熒光情況；

• 對於流式分析，查明染料載入和處理後細胞的前向角散射和側向角散射是不變。細胞尺寸的變化可能與起泡或萎縮有關，由於處理或有毒反應引起的。

• 對包含和不包含刺激物的染料和緩沖液/培養基的無細胞混合物進行熒光檢測。在不含細胞外酯酶和其他氧化酶的情況下，隨著時間熒光的逐漸增加可能與瞬間水解、空氣氧化、和/或光誘導氧化有關。

• 檢查培養在生長培養液或簡單緩沖液內的未處理載入細胞（對照）的熒光。在健康細胞內，細胞內酶和/或天然抗氧化劑會清除這些氧自由基。經過染料載入復原時間後，健康細胞應該表現出低水平的熒光信號，且在整個實驗期間相對穩定。然而，逐漸增加（由於自氧化）或降低（由於細胞內染料喪失或光淬滅）也有可能觀察到。在不含任何刺激物或誘導劑的體系內，健康和未處理細胞突然發現強熒光，表明細胞發生死亡或一些其他的氧化事件。

• 8. 建立陽性對照，可採用下面方法刺激氧化活性：

• 腫瘤促進劑（PMA，工作濃度100pM～10μM）

• H2O2 或者 TBHP（終濃度~100μM）（可以調節濃度：根據細胞對其的靈敏度以及反應性提高或降低濃度）。

• 9. 需要確保其他化合物或者刺激試劑不造成起染料熒光淬滅。同時檢查化合物的吸收光譜，確認化合物的吸收峰不會與氧化後的染料最大激發或者是發射光譜出現重讀。

⑹ 丙酮和乙醇抽濾用有機還是水系隔膜

那種濾膜都可以應用，不限，但是要用親水系的；
1. 尼龍膜(Nylon)
特點： 耐溫性能良好，可耐121℃飽和蒸汽熱壓消毒30min，最高工作溫度60℃，化學穩定良好，能耐受稀酸、稀鹼、醇類、酯類、油類、碳氫化合物、鹵代烴及有機氧化物等多種有機和無機化合物。
用途：電子、微電子、半導體工業水過濾、組織培養基過濾。 葯液過濾、飲料過濾、高純化學製品過濾。 水溶液和有機流動相的過濾的過濾。
2.聚偏氟乙烯膜（PVDF）
特點：膜機械強度高、抗張強度高，具有良好的耐熱性和化學穩定性，蛋白吸附率低；具有較強的負靜電性及疏水性；具有疏水和親水兩種形式。但不能耐受丙酮，DMSO，THF，DMF，二氯甲烷，氯仿等。
用途：疏水性聚偏氟乙烯膜主要應用於氣體及蒸汽過濾、高溫液體的過濾;
親水性聚偏氟乙烯膜主要應用於組織培養基、添加劑等除菌過濾溶劑和化學原料的凈化過濾，試劑的無菌處理，高溫液體的過濾等。
3.混合纖維素酯
特點：孔徑比較均勻，孔隙率高，無介質脫落，質地薄，阻力小，濾速快，吸附極小，使用價格成本低，但不耐有機溶液和強酸、強鹼溶液。
用途：醫葯工業需熱壓滅菌的水針劑，大輸液濾除微粒。
對熱敏性葯物(胰島素ATP、輔酶A等生化制劑)的除菌，用0.45微米的濾膜(或0.2)
溶液中微粒及油類不溶物的分析測定，及水質污染指數測定。
應用於體細胞雜交和線粒互補預測雜種優勢研究等科研部門。
4.聚丙烯
特點： 無任何粘接劑，化學性能穩定，柔韌，不易破損，耐高溫，能經受高壓滅菌。無毒無味，耐酸鹼。
用途： 適用於製作各種粗、精濾器，折疊式濾芯。
適用於飲料、醫葯等行業的板框壓濾機濾膜。
適用於反滲透膜，超濾膜的支撐及預處理。
聚丙烯膜無毒性，可在醫葯、化工、食品、飲料等領域廣泛應用；具疏水性，對氣體過濾尤佳。
5.聚醚碸(PES)
特點：醚碸材質的微孔濾膜，屬於親水性濾膜，具有高流率、低溶出物、良好的強度的特點，不吸附蛋白和提取物，對樣品五污染。
用途：低蛋白質吸附及高葯物相容性，專為生化、檢驗、制葯以及除菌過濾裝置而設計。
6.聚四氟乙烯（PTFE）
特點：最廣泛的化學兼容性，能耐受DMSO，THF，DMF，二氯甲烷，氯仿等強溶劑。
應用：所有有機溶液的過濾，特別是其它濾膜不能耐受的強溶劑的過濾。
回答於 2009-11-29

⑺ 細胞培養液過濾器有哪些規格的

有40um 70um 和100um的 實驗室用的40um百千生物的 挺好的

⑻ 植物體細胞培養基操作

樓主好！！ 實驗八 培養基的制備與滅菌 一、目的要求1. 掌握微生物實驗室常用玻璃器皿的清洗及包紮方法。2. 掌握培養基的配置方法。3. 掌握乾熱滅菌和高壓蒸汽滅菌的操作方法。二、基本原理 正確掌握培養基的配製方法是從事微生物學實驗工作的重要基礎。由於微生物種類及代謝類型的多樣性．因而用於培養微生物的培養基的種類也很多，它們的配方及配製方法雖各有差異。但一般培養基的配製程序卻大致相同．例如器皿的准備，培養基的配製與分裝，棉塞的製作，培養基的滅菌，斜面與平板的製作以及培養基的無菌檢查等基本環節大致相同。三、實驗材料1. 葯品：待配各種培養基的組成成分、瓊脂、1mol/L的NaOH和HCl溶液。2. 儀器及玻璃器皿：天平、高壓蒸汽滅菌鍋、移液管、試管、燒杯、量筒、三角瓶、培養皿、玻璃漏斗等。3. 其他物品：葯匙、稱量紙、pH試紙、記號筆、棉花等。四、操作步驟（一）玻璃器皿的洗滌和包裝1．玻璃器皿的洗滌玻璃器皿在使用前必須洗刷干凈。將三角瓶、試管、培養皿、量筒等浸入含有洗滌劑的水中．用毛刷刷洗，然後用自來水及蒸餾水沖凈。移液管先用含有洗滌劑的水浸泡，再用自來水及蒸餾水沖洗。洗刷干凈的玻璃器皿置於烘箱中烘乾後備用。2．滅菌前玻璃器皿的包裝（1） 培養皿的包紮：培養皿由一蓋一底組成一套，可用報紙將幾套培養皿包成一包，或者將幾套培養皿直接置於特製的鐵皮圓筒內，加蓋滅菌。包裝後的培養皿須經滅菌之後才能使用。（2）
圖8-1 移液管的包紮移液管的包紮：在移液管的上端塞入一小段棉花(勿用脫脂棉)，它的作用是避免外界及口中雜菌進入管內，並防止菌液等吸入口中。塞入此小段棉花應距管口約0.5cm左右，棉花自身長度約1~1.5cm。塞棉花時．可用一外圍拉直的曲別針、將少許棉花塞入管口內。棉花要塞得松緊適宜，吹時以能通氣而又不使棉花滑下為准。先將報紙裁成寬約5cm左右的長紙條，然後將已塞好棉花的移液管尖端放在長條報紙的一端，約成45℃角，折疊紙條包住尖端，用左手握住移液管身，有手將移液管壓緊．在桌面上向前搓轉，以螺旋式包紮起來。上端剩餘紙條，折疊打結，准備滅菌。（二）液體及固體培養基的配製過程1．液體培養基配製1) 稱量：一般可用0.01g天平稱量配製培養基所需的各種葯品，先按培養基配方計算出各成分的用量．然後進行准確稱量。2) 溶解：將稱好的葯品置於一燒杯中，先加入少量水(根據實驗需要可用自來水或蒸餾水)，用玻璃棒攪動，加熱溶解。3) 定容：待全部葯品溶解後，倒入一量筒中，加水至所需體積。如某種葯品用量太少時，可預先配成較濃溶液，然後按比例吸取一定體積溶液，加入至培養基中。4) 調pH：一般用pH試紙測定培養基的pH。用剪刀剪出一小段pH試紙，然後用鑷子夾取此段pH試紙，在培養基中蘸一下，觀看其pH范圍，如培養基偏酸或偏鹼時，可用1mol/L NaoH或1mol/L HCl溶液進行調節。調節pH時，應逐滴加入NaOH或HCI溶液，防止局部過酸或過鹼，破壞培養基中成分。邊加邊攪拌，並不時用pH試紙測試，直至達到所需pH為止。5) 過濾：用濾紙或多層紗布過濾培養基。一般無特殊要求時，此步可省去。2．固體培養基的配製 配製固體培養基時，應將已配好的液體培養基加熱煮沸，再將稱好的瓊脂(1.5~2％)加入，並用玻棒不斷攪拌，以免糊底燒焦。繼續加熱至瓊脂全部融化，最後補足因蒸發而失去水分。（三）培養基的分裝 根據不同需要，可將已配好培養基分裝入試管或三角瓶內，分裝時注意不要使培養基沾污管口或瓶口，造成污染。如操作不小心，培養基沾污管口或瓶口時，可用鑷子夾一小塊脫脂棉，擦去管口或瓶口的培養基，並將脫脂棉棄去。1．試管的分裝取一個玻璃漏斗，裝在鐵架上，漏斗下連一根橡皮管，橡皮管下端再與另一玻璃管相接，橡皮管的中部加一彈簧夾。分裝時，用左手拿住空試管中部，並將漏斗下的玻璃管嘴插入試管內，以右手拇指及食指開放彈簧夾，中指及無名指夾佐玻璃管嘴，使培養基直接流入試管內。裝入試管培養基的量視試管大小及需要而定，若所用試管大小為15×150 mm時，液體培養基可分裝至試管高度1／4左有為宜；如分裝固體或半固體培養基時，在瓊脂完全融化後，應趁熱分裝於試管中。用於製作斜面的固體培養基的分裝量為管高1／5(約3—4mI)，半固體培養基分裝量為管高的1／3為宜。2．三角瓶的分裝圖8-2培養基的分裝 用於振盪培養微生物時，可在250 m1三角瓶中加入50 m1的液體培養基；若用於製作平板培養基用時，可在250 m1三角瓶中加入150ml培養基，然後再加入3g瓊脂粉(按2％計算)，滅菌時瓶中瓊脂粉同時被融化。（四）棉塞的製作及試管、三角瓶的包紮 為了培養好氣性微生物，需提供優良通氣條件，同時為防止雜菌污染，則必須對通入試管或三角瓶內空氣預先進行過濾除菌。通常方法是在試管及三角瓶口加上棉花塞等。1．試管棉塞的製作制棉塞時，應選用大小、厚薄適中的普通棉花一塊，鋪展於左手拇指和食指扣成的團孔上，用右手食指將棉花從中央壓入團孔中製成棉塞．然後直接壓入試管或三角瓶口。也可借用玻璃棒塞入，也可用折疊卷塞法製作棉塞。製作的棉塞應緊貼管壁，不留縫隙，以防外界微生物沿縫隙侵入，棉塞不宜過緊或過松，塞好後以手提棉塞，試管不下落為准。棉塞的2／3在試管內，1／3在試管外。目前也有採用硅膠塞代替棉塞直接蓋在試管口上。將裝好培養基並塞好棉塞或硅膠塞的試管捆成一捆，外麵包上一層牛皮紙。用記號筆註明培養基名稱及配製日期，滅菌待用。
圖8-3 棉塞的製作
圖8-4 正確與不正確的棉塞1.金屬塞 2正確 3、4不正確 2．三角瓶棉塞製作通常在棉塞外包上一層紗布，再塞在瓶口上。有時為了進行液體振盪培養加大通氣量，則可用8層紗布代替棉塞包在瓶口上，目前也有採用硅膠塞直接蓋在瓶口上。在裝好培養基並塞好棉塞或包紮八層紗布或蓋好硅膠塞的三角瓶口上，再包上一層牛皮紙並用線繩捆好，滅菌待用。（五）培養基的滅菌培養基經分裝包紮後，應立即按配製方法規定的滅菌條件進行進行高壓蒸汽滅菌。（六）斜面和平板的製作1．斜面的製作將已滅菌裝有瓊脂培養基的試管，趁熱置於木棒或玻棒上，使成適當斜度，凝固後即成斜面。斜面長度不超過試管長度l／2為宜。如製作半團體或固體深層培養基時，滅菌後則應垂直放置至凝固。2．平板的製作將裝在三角瓶或試管中已滅菌的瓊脂培養基融化後，待冷至50℃左右傾入無菌培養皿中。溫度過高時，皿蓋上的冷凝水太多；溫度低於50℃，培養基易於凝固而無法製作平板。平板的製作應在火旁進行，左手拿培養皿，右手拿三角瓶的底部或試管，左手同時用小指和手掌將棉塞打開，灼燒瓶口，用左手大拇指將培養皿蓋打開一縫，至瓶口正好伸入，傾入10~15mL培養基，迅速蓋好皿蓋，置於桌上，輕輕旋轉平皿，使培養基均勻分布於整個平皿中，冷凝後即成平板。（七）培養基的滅菌檢查滅菌後的培養基，一般需進行無菌檢查。最好取出1~2管(瓶)，置於37℃溫箱中培養1~2天，確定無菌後方可使用。（八）無菌水的制備在每個250mL的三角瓶內裝100mL的蒸餾水並塞上棉塞或硅膠塞。在每支試管內裝4.5mL蒸餾水，塞上棉塞或硅膠塞。再在棉塞上包上一張牛皮紙，高壓蒸汽滅菌。0.1MPa滅菌20~30min。五、實驗內容1. 根據要求清洗各種玻璃器皿，並進行包紮。2. 根據要求配製各種培養基。3. 用電熱鼓風乾燥箱對玻璃器皿進行乾熱滅菌。4. 用高壓蒸汽滅菌鍋對所配各培養基滅菌。六、實驗報告1. 簡述移液管和培養皿的包紮注意事項。2. 簡述配製培養基的基本步驟及注意事項。3. 為什麼微生物實驗室所用的移液管口或滴管口的上端均需塞入一小段棉花，再用報紙包起來，經高壓蒸汽滅菌後才能使用?4. 為什麼微生物實驗室所用的三角瓶口或試管口都要塞上棉塞（硅膠塞）才能使用？5. 配製培養基時為什麼要調節pH？6. 高壓蒸汽滅菌為什麼比乾熱滅菌要求溫度低、時間短？ 附錄 滅菌技術一、目的要求了解消毒和滅菌的原理，並掌握各種滅菌方法的操作步驟。二、實驗材料1. 儀器或其他用具：上述包紮的培養皿、試管、移液管等，電熱鼓風乾燥箱，高壓蒸汽滅菌鍋，微孔濾膜過濾器，0.22μm濾膜，注射器，鑷子，玻璃塗棒。2. 培養基：上述配製的培養基及生理鹽水三、基本原理在微生物實驗中，需要進行純培養，不能有任何雜菌污染，因此必須對所用器材、培養基和工作場所進行滅菌和消毒。滅菌是指殺死一定環境中的所有微生物，包括微生物的營養體、芽孢和孢子。實驗室常用的滅菌方法包括直接灼燒、恆溫乾燥箱滅菌、高壓蒸汽滅菌、間歇滅菌、煮沸滅菌等方法。這些方法的基本原理是通過加熱使微生物體內蛋白質凝固變性，從而達到滅菌的目的。四、操作步驟（一）乾熱滅菌法乾熱滅菌是在電熱乾燥箱內利用高溫乾燥空氣（160℃~170℃）進行滅菌，它是利用高溫使微生物細胞內的蛋白質凝固變性而達到滅菌目的。此法適用於玻璃器皿如移液管、試管和培養皿的滅菌。培養基、橡膠製品、塑料製品不能採用乾熱滅菌。細胞內的蛋白質凝固性與其本身的含水量有關，在菌體受熱時，當環境和細胞內含水量越大，則蛋白質凝固就越快，反之含水量越小，凝固越慢。因此，與濕熱滅菌相比，乾熱滅菌所需溫度高（160℃~170℃），時間長（1~2h）。但乾熱滅菌溫度不能超過180℃，否則，包器皿的紙或棉塞就會燒焦，甚至引起燃燒。乾熱滅菌使用的是電熱乾燥箱（乾燥箱）。具體操作步驟如下：1. 裝入待滅菌物品：將包好的待滅菌物品放入電熱乾燥箱內，關好箱門。堆積時要留有空隙，物品不要擺放得太擠，以免妨礙空氣流通，滅菌物品不要接觸電熱乾燥箱內壁的鐵板、溫度探頭，以防包裝紙烤焦起火。2. 升溫：接通電源，打開開關，適當打開電熱乾燥箱頂部的排氣孔，旋動恆溫調節器，使溫度逐步上升。當溫度升至100℃時，關閉排氣孔。在升溫過程中，如果紅燈熄滅，綠燈亮，表示電熱乾燥箱內停止加溫，此時如果還未達到所需的160℃~170℃，則需要轉動溫度調節器使紅燈亮，如此反復調節，直至達到所需的溫度。3. 恆溫：當溫度升到160℃~170℃時，藉助恆溫調節器的自動控制，保持此溫度2h。乾熱滅菌過程中，嚴防恆溫調節的自動控制失靈而造成安全事故。4. 降溫：切斷電源，自然降溫。5. 開箱取物：待電熱乾燥箱內溫度降到60℃以下後，才能打開箱門，取出滅菌物品。同時，應將溫度調節旋鈕調到零點，並打開排氣孔。電熱乾燥箱內溫度未降到60℃以前，切勿自行打開箱門，以免驟然降溫導致玻璃器皿炸裂。（二）高壓蒸汽滅菌高壓蒸汽滅菌是將物品放在密閉的高壓蒸汽滅菌鍋內，在一定的壓力下保持15~30分鍾進行滅菌。此法適用於培養基、無菌水、工作服等物品的滅菌，也可用於玻璃器皿的滅菌。將待滅菌的物品放在一個密閉的加壓滅菌鍋內，通過加熱，使滅菌鍋夾套間的水沸騰而產生蒸汽。待水蒸汽急劇地將鍋內的冷空氣從排氣閥中排盡，然後關閉排氣閥，繼續加熱，此時由於蒸汽不能溢出，而增加了滅菌鍋內的壓力，從而使沸點增高，獲得高於100℃的溫度，導致菌體蛋白質凝固變性而達到滅菌的目的。在相同的溫度下，濕熱滅菌的效果好於乾熱滅菌。有三點原因：在濕熱滅菌中菌體吸收水分，蛋白質容易凝固變性，蛋白質隨著含水量的增加，所需凝固溫度降低；濕熱滅菌中蒸汽的穿透力比乾燥空氣大；蒸汽在被滅菌物體表面凝結，釋放出大量的汽化潛熱，能迅速提高滅菌物體表面的溫度，從而增加滅菌效力。實驗室常用的滅菌鍋有非自控手提式高壓蒸汽滅菌鍋和自控式滅菌鍋，其結構和工作原理是相同的。本實驗介紹的是非自控手提式高壓蒸汽滅菌鍋，自控式滅菌鍋的使用可參考廠家說明書。具體操作步驟如下：1. 加水：首先將內層鍋取出，再向外層鍋內加入適量的水，使水面沒過加熱蛇管，與三角擱架相平為宜。切勿忘記檢查水位，加水量過少，滅菌鍋會發生燒干引起炸裂事故。2. 裝料：放回內層鍋，並裝入待滅菌的物品。注意不要裝得太擠，以免妨礙蒸汽流通而影響滅菌效果。裝有培養基的容器放置時要防止液體溢出，三角瓶與試管口端均不要與桶壁接觸，以免冷凝水淋濕包紮的紙而透入棉塞。3. 加蓋：將蓋上與排氣孔相連的排氣軟管插入內層鍋的排氣槽內，擺正鍋蓋，對齊螺口，然後以對稱方式同時旋緊相對的兩個螺栓，使螺栓松緊一致，勿使漏氣，並打開排氣閥。4. 排氣：打開電源加熱滅菌鍋，將水煮沸，使鍋內的冷空氣和水蒸汽一起從排氣孔中排出。一般認為當排出的氣流很強並有噓聲時，表明鍋內的空氣已排盡，沸騰後約需5分鍾。5. 升壓：冷空氣完全排盡後，關閉排氣閥，繼續加熱，鍋內壓力開始上升。6. 保壓：當壓力表指針達到所需壓力時，控制電源，開始計時並維持壓力至所需的時間。如本實驗中採用0.1Mpa，121.5℃，20分鍾滅菌。滅菌的主要因素是溫度而不是壓力，因此鍋內的冷空氣必須完全排盡後，才能關閉排氣閥，維持所需壓力。7. 降壓：達到滅菌所需的時間後，切斷電源，讓滅菌鍋溫度自然下降，當壓力表的壓力降至「0」後，方可打開排氣閥，排盡餘下的蒸汽，旋松螺栓，打開鍋蓋，取出滅菌物品，倒掉鍋內剩水。壓力一定要降到「0」後，才能打開排氣閥，開蓋取物。否則就會因鍋內壓力突然下降，使容器內的培養基或試劑由於內外壓力不平衡而沖出容器口，造成瓶口被污染，甚至灼傷操作者。8. 無菌檢查：將已滅菌的培養基放入37℃恆溫培養箱培養24h，檢查無雜菌生長後，即可使用。 （三）過濾除菌有些物質，如抗生素、血清、維生素、糖溶液等採用加熱滅菌法時，容易受熱分解而被破壞，因而要採用過濾除菌法。過濾除菌是通過機械作用濾去液體或氣體中細菌的方法，該方法最大的優點是不破壞溶液中各種物質的化學成分。過濾除菌法除實驗室用於溶液、試劑的除菌外，在微生物工作中使用的凈化工作台也是根據過濾除菌的原理設計的，可根據不同的需要來選用不同的濾器和濾板材料。應用最廣泛的過濾器種類有：1. 微孔濾膜過濾器：是一種新型過濾器，它由上下二個分別具有出口和入口連接裝置的塑料盒組成，出口處可連接針頭，入口處可連接針筒，使用時將濾膜裝入兩塑料盒之間，旋緊盒蓋，當溶液從針筒注入濾器時，各種微生物被阻留在微孔濾膜上面，而液體和小分子物質通過濾膜，從而達到除菌的目的。其濾膜是由硝酸纖維素、醋酸纖維素等製成的薄膜，有孔徑大小不同的多種規格（如0.1μm、0.22μm、0.3μm、0.45μm等），實驗室中用於除菌的微孔濾膜孔徑一般為0.22μm。根據待除菌溶液量的多少，可選用不同大小的濾器。該濾器的優點是吸附性小，即溶液中的物質損耗少，過濾速度快，每張濾膜只使用1次，不用清洗。2. 蔡氏（Seitz）過濾器：是一種金屬製成的過濾漏斗，其過濾部分是一種用石棉纖維和其他填充物壓製成的片狀結構。溶液中的細菌通過石棉纖維的吸附和過濾而被去除，但對溶液中其他物質的吸附性也大，每張纖維板只能使用1次。3. 玻璃過濾器：是一種玻璃製成的過濾漏斗，其過濾部分是由細玻璃粉燒結成的板狀構造。玻璃濾器的規格很多，5號（孔徑2~5μm）和6號（孔徑<2μm）適用於過濾細菌，其優點是吸附量少，但每次使用後要洗凈再用。本實驗採用微孔濾膜過濾器進行過濾除菌，具體操作步驟如下：1. 組裝、滅菌：將0.22�0�8m孔徑的濾膜裝入清洗干凈的塑料濾器中，旋緊壓平，包裝滅菌後待用（0.1Mpa，121.5℃，滅菌20分鍾）。2. 連接：將滅菌濾器的入口在無菌條件下，以無菌操作方式連接於裝有待濾溶液的注射器上，將針頭與出口處連接並插入帶橡皮塞的無菌試管中。3. 壓濾：將注射器中的待濾溶液加壓緩緩擠入過濾到無菌試管中，濾畢，將針頭拔出。壓濾時用力要適當，不可太猛太快，以免細菌被擠壓通過濾膜。4. 無菌檢查：無菌操作吸取除菌濾液0.1mL於肉湯蛋白腖平板上，均勻塗布，置37℃恆溫培養箱培養24小時，檢查是否有雜菌生長。5. 清洗：棄去塑料濾器上的微孔濾膜，將塑料濾器清洗干凈，並換上一張新的微孔濾膜，組裝包紮，再經滅菌後使用。整個過程應嚴格按照無菌操作，以防污染，過濾時應避免各連接處出現滲透現象。 來自網路，本人整理，沒法上圖！

⑼ 一次性過濾器有水系和有機系，有何差別

1、水系：微孔濾膜應用於水溶液，但是不耐有機溶液。是親水性微孔濾膜。

2、有專機系：微孔濾膜屬比較疏水，但適用有機溶液。是疏水性微孔濾膜。有機系，用來過濾水溶液沒什麼問題，但是反過來水系的則可能會被有機溶劑溶解，不適用於有機體系的過濾。

水系和有機系的關系：所謂的水系和有機系，是根據濾膜的材質分的，分別適用於過濾水溶液（生命科學適用），和有機溶液（化學適用）。

(9)過濾細胞培養基的濾器是有機擴展閱讀：

過濾器濾膜主要用途：

濾除葯液、氣體、油類、飲料、酒類、電子儀表等的微粒的細菌，也可以作微粒、細菌的栓驗。

微孔過濾操作有無流動(Deadend)與錯流(Crossflow)兩種：

前者應用於稀(固體含量)料液和較小規模應用。濾膜製成濾芯，大多為一次性。錯流操作又稱切線流操作，對於懸浮粒子大小、濃度的變化不很敏感，適用於較大規模之應用，此類操作的濾膜組件需經常周期性清洗、再生。

⑽ 哪種類型的濾膜可以用來過濾細胞培養基

孔徑為0.22微米的濾膜 這種濾膜可以過濾掉細菌和病毒。 孔徑0.45微米的濾膜已經可以過濾掉細菌，但是不能過濾病毒。 為了防止噬菌體污染，一般還是用0.22微米的濾膜比較好。