液相柱硅膠與樹脂的區別

① 液相色譜法有幾種類型

1、液固吸附色譜

高效液相色譜中的一種，是基於物質吸附作用的不同而實現分離。其固定相是一些具有吸附活性的物質如硅膠、氧化鋁、分子篩、聚醯胺等。

2、液液分配色譜法

基於被測物質在固定相和流動相之間的相對溶解度的差異，通過溶質在兩相之間進行分配以實現分離。根據固定相與流動相的極性不同，分為正相色譜和反相色譜。

前者是用硅膠或極性鍵合相為固定相，非極性溶劑為流動相；後者是硅膠為基質的烷基鍵合相為固定相，極性溶劑為流動相，適用於非極性化合物的分離。

3、離子交換色譜法

基於離子交換樹脂上可電離的離子與流動相中具有相同電荷的溶質離子進行可逆交換，依據這些離子對離子交換基具有不同的親和力而實現分離。薄殼型離子交換樹脂柱效高，主要用來分離簡單的混合物；多孔性樹脂進樣容量大，主要用來分離復雜混合物。

4、凝膠滲透色譜法

又稱為尺寸排阻色譜法。以溶劑為流動相，多孔填料（如多孔硅膠、多孔玻璃）或多孔交聯高分子凝膠為分離介質的液相色譜法。當混合物溶液入凝膠色譜柱後，流經多孔凝膠時，體積比多孔凝膠孔隙大的分子不能滲透到凝膠孔隙里去而從凝膠顆粒間隙中流過，較早地被沖洗出柱外；

而小分子可滲透到凝膠孔隙裡面去，較晚地被沖洗出來，混合物經過凝膠色譜柱後就按其分子大小順序先後由柱中流出達到分離的目的。

5、離子色譜法

採用柱色譜技術的一種高效液相色譜法，樣品展開方式採用洗脫法。根據不同的分離方式，離子色譜可以分為高效離子色譜 、離子排斥色譜和流動相離子色譜3類。高效離子色譜法使用低容量的離子交換樹脂，分離機理主要是離子交換。

離子排斥色譜法用高容量的樹脂，分離機理主要是利用離子排斥原理。流動相離子色譜用不含離子交換基團的多孔樹脂，分離機理主要是基於吸附和離子對的形成。

6、離子對色譜法

離子對色譜法是將一種（或數種）與樣品離子電荷（A+）相反的離子（B-，稱為對離子或反離子，加入到色譜系統的流動相（或固定相）中，使其與樣品離子結合生成弱極性的離子對（呈中性締合物）。此離子對不易在水中離解而迅速進入有機相中，從而控制溶質離子的保留行為。

液相色譜法的優點和應用

1、優點

離子色譜法具有快速、靈敏、選擇性好和同時測定多組分的優點。尤其對於陰離子的測定，離子色譜的出現是分析化學中的一項突破性的新進展。

2、應用

離子色譜法主要用於測定各種離子含量，廣泛應用於水、紙漿和漂白液、食品分析、生物體液、鋼鐵和環境分析等各個領域。

② 液相的柱壓不穩定，總是上下波動且幅度很大，可以怎麼解決

當液相柱壓不穩定時可以進行以下操作：

1、檢查是否脫氣，壓力不穩定很可能是管路中有氣泡。

2、更換密封墊，泵密封墊損壞，會把空氣帶進泵內。

3、打開泵的排氣閥，按purge健排氣，或者以大流速（2ml/m）排氣，流動相真空脫氣或者超聲脫氣。

4、換下雙泵,沖洗閥的過濾芯，將流動相混合均勻後,超聲20min後,真接單泵分析就可。

5、檢查是否是柱子久用引起的柱壓不穩，用異丙醇：甲醇＝10:90沖，流速要調低。

(2)液相柱硅膠與樹脂的區別擴展閱讀

在選擇色譜柱之前，先多了解自己的樣品和雜質，他們的類型結構、極性、酸鹼性、分子量大小等等。

1.樣品是極性的且弱酸性的，就可以選擇C18在100%酸性水溶液條件下檢測，即要選擇承受100%純水且對極性化合物保留很好的色譜柱。

2. 如果樣品極性太強，或酸性太強，可以選擇CN，NH2，或硅膠柱，HILIC（親水色譜），也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。

（缺點是離子對試劑平衡時間長，對流動相pH要求比較精密，否則很難重復實驗，另外離子對試劑很難洗下來，基本上用了離子對的色譜柱就不能再用於其它實驗）。

3. 若樣品是鹼性的，可選擇高純硅膠柱（高純硅膠缺少金屬雜質，且硅膠端基封尾）或一些經過修飾的C18柱（如極性嵌入技術或鹼去活技術等）。

他們都會減少鹼性化合物的拖尾，一般會選擇中性或偏鹼的條件下做，因為這樣可增加鹼性樣品的保留。

4.如果鹼性化合物的極性太強，或鹼性太強，可以選擇寬pH的C18色譜柱在高pH值檢測（優點是方法開發簡單，缺點是目前實 現這一技術的色譜柱品牌比較少，價格也高）。

或者選用HILIC色譜柱（硅膠柱在反相條件下使用，這也是很經典的檢測鹼性樣品的方法）選擇強離子交換柱也有使用C18+強陰離子對試劑或強陰離子交換色譜柱。

③ 我想買Merck默克液相色譜柱，但不清楚默克液相色譜柱具體有哪些類型產品，求解答，謝謝

1 液-固吸附色譜
固定相：固定吸附劑為，如硅膠、氧化鋁等，較常使用的是5~10μm的硅膠吸附劑;
流動相：各種不同極性的一元或多元溶劑。
分離原理：組分在固定相吸附劑上的吸附與解吸；
適用於分離相對分子質量中等的油溶性試樣，對具有官能團的化合物和異構體有較高選擇性；
缺點：非線形等溫吸附常引起峰的拖尾；

2 液-液分配色譜
固定相與流動相均為液體（互不相溶）
分離原理：組分在固定相和流動相上的分配
流動相：對於親水性固定液，採用疏水性流動相，即流動相的極性小於固定液的極性（正相 normal phase），反之，流動相的極性大於固定液的極性（反相 reverse phase）。正相與反相的出峰順序相反；
固定相：早期塗漬固定液，固定液流失，較少採用
化學鍵合固定相：（將各種不同基團通過化學反應鍵合到硅膠（擔體）表面的游離羥基上。C-18柱（反相柱）

3 離子交換色譜
固定相：陰離子離子交換樹脂與陽離子離子交換樹脂
流動相：陰離子離子交換樹脂作固定相，採用酸性水溶液；陽離子離子交換樹脂作固定相，採用鹼性水溶液
分離原理：組分在固定相上發生的反復離子交換反應；組分與離子交換劑之間親和力的大小與離子半徑、電荷、存在形式等有關。親和力大，保留時間長；
陽離子交換：R­-SO3H+M+ = R-SO3M+ H+
陰離子交換：R-NR4OH + X - =R-NR4X+ OH-
應用：離子及可離解的化合物，氨基酸，核酸等。

4 離子色譜
離子色譜是在20世紀70年代中期發展起來的一種技術，其與離子交換色譜的區別是其採用了特製的、具有較低交換容量的離子交換樹脂作為柱填料，並採用淋洗液抑制技術和電導檢測器，是測定混合陰離子的有效方法。
固定相：交換容量非常低的特製離子交換樹脂
分離原理：離子交換原理

5 離子對色譜
分離原理：將一種（或多種）與溶質離子電荷相反的離子（對離子或反離子）加到流動相中使其與溶質離子結合形成疏水性離子對化合物，使其能夠在兩相之間進行分配
陰離子分離：常採用烷基銨類，如氫氧化四丁基銨或氫氧化十六烷基三甲胺作為對離子
陽離子分離：常採用烷基磺酸類，如己烷磺酸鈉作為對離子
反相離子對色譜：非極性的疏水固定相（C-18柱），含有對離子Y+的甲醇-水或乙腈-水作為流動相，試樣離子X-進入流動相後，生成疏水性離子對Y+X-後：在兩相間分配

6 排阻色譜
固定相：凝膠（具有一定大小孔隙分布）
分離原理：按分子大小分離。小分子可以擴散到凝膠孔隙，由其中通過，出峰最慢。中等分子只能通過部分凝膠孔隙，中蘇通過；而大分子被排斥在外，出峰最快；溶劑分子小，故在最後出峰。
全部在死體積前出峰；
可對相對分子質量在100-105范圍內的化合物按質量分離。

7 親和色譜
分離原理：利用生物大分子和固定相表面存在的某種特異性親和力，進行選擇性分離。
先在載體表面鍵合上一種具有一般反應性能的所謂間隔臂（環氧、聯胺等），再連接上配基（酶、抗原等），這種固載化的配基將只能和具有親和力特性吸附的生物大分子作用而被保留，改變淋洗液後洗脫。
具體信息請參考：http://www.labgou.com/ke/?p=247

④ 一篇看懂液相色譜柱的分類、選擇及維護！

液相色譜柱的分類主要基於色譜固定相基質，選擇需依據分析物性質，維護包括平衡、再生及日常保養。

一、液相色譜柱的分類

• 硅膠基質：

  • 反相色譜柱：使用硅膠為基礎，表面鍵合弱極性官能團，流動相通常為水、緩沖液與有機溶劑混合物。
  • 正相色譜：硅膠作為固定相，流動相極性相對較低，分離依據樣品極性大小。
  • 離子交換色譜柱：使用磺化交聯強陰/陽離子鍵合硅膠，適用於離子型化合物的分離。

• 聚合物基質：如聚苯乙烯二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，適用於PH值范圍寬及大分子物質的分離。

• 其他無機填料：如石墨化碳、氧化鋁等，具有特殊性質，適用於特定分析需求。

二、色譜柱的選擇

• 主要依據分析物的性質，如分子量大小、極性、溶解度等。硅膠基質填料適用於小分子量物質，聚合物填料適用於大分子物質。

三、色譜柱的維護

• 平衡：使用甲醇或乙腈沖洗色譜柱，確保分析樣品流動相與沖洗溶劑互溶，以保持色譜柱的性能穩定。

• 再生：長期使用後柱效下降，可進行再生處理，如使用特定溶劑沖洗以恢復柱效。

• 日常保養：使用預柱保護分析柱，避免流動相組成及極性的劇烈變化；使用前對流動相進行脫氣和過濾處理，以減少雜質對色譜柱的污染。