液相柱硅胶与树脂的区别

① 液相色谱法有几种类型

1、液固吸附色谱

高效液相色谱中的一种，是基于物质吸附作用的不同而实现分离。其固定相是一些具有吸附活性的物质如硅胶、氧化铝、分子筛、聚酰胺等。

2、液液分配色谱法

基于被测物质在固定相和流动相之间的相对溶解度的差异，通过溶质在两相之间进行分配以实现分离。根据固定相与流动相的极性不同，分为正相色谱和反相色谱。

前者是用硅胶或极性键合相为固定相，非极性溶剂为流动相；后者是硅胶为基质的烷基键合相为固定相，极性溶剂为流动相，适用于非极性化合物的分离。

3、离子交换色谱法

基于离子交换树脂上可电离的离子与流动相中具有相同电荷的溶质离子进行可逆交换，依据这些离子对离子交换基具有不同的亲和力而实现分离。薄壳型离子交换树脂柱效高，主要用来分离简单的混合物；多孔性树脂进样容量大，主要用来分离复杂混合物。

4、凝胶渗透色谱法

又称为尺寸排阻色谱法。以溶剂为流动相，多孔填料（如多孔硅胶、多孔玻璃）或多孔交联高分子凝胶为分离介质的液相色谱法。当混合物溶液入凝胶色谱柱后，流经多孔凝胶时，体积比多孔凝胶孔隙大的分子不能渗透到凝胶孔隙里去而从凝胶颗粒间隙中流过，较早地被冲洗出柱外；

而小分子可渗透到凝胶孔隙里面去，较晚地被冲洗出来，混合物经过凝胶色谱柱后就按其分子大小顺序先后由柱中流出达到分离的目的。

5、离子色谱法

采用柱色谱技术的一种高效液相色谱法，样品展开方式采用洗脱法。根据不同的分离方式，离子色谱可以分为高效离子色谱 、离子排斥色谱和流动相离子色谱3类。高效离子色谱法使用低容量的离子交换树脂，分离机理主要是离子交换。

离子排斥色谱法用高容量的树脂，分离机理主要是利用离子排斥原理。流动相离子色谱用不含离子交换基团的多孔树脂，分离机理主要是基于吸附和离子对的形成。

6、离子对色谱法

离子对色谱法是将一种（或数种）与样品离子电荷（A+）相反的离子（B-，称为对离子或反离子，加入到色谱系统的流动相（或固定相）中，使其与样品离子结合生成弱极性的离子对（呈中性缔合物）。此离子对不易在水中离解而迅速进入有机相中，从而控制溶质离子的保留行为。

液相色谱法的优点和应用

1、优点

离子色谱法具有快速、灵敏、选择性好和同时测定多组分的优点。尤其对于阴离子的测定，离子色谱的出现是分析化学中的一项突破性的新进展。

2、应用

离子色谱法主要用于测定各种离子含量，广泛应用于水、纸浆和漂白液、食品分析、生物体液、钢铁和环境分析等各个领域。

② 液相的柱压不稳定，总是上下波动且幅度很大，可以怎么解决

当液相柱压不稳定时可以进行以下操作：

1、检查是否脱气，压力不稳定很可能是管路中有气泡。

2、更换密封垫，泵密封垫损坏，会把空气带进泵内。

3、打开泵的排气阀，按purge健排气，或者以大流速（2ml/m）排气，流动相真空脱气或者超声脱气。

4、换下双泵,冲洗阀的过滤芯，将流动相混合均匀后,超声20min后,真接单泵分析就可。

5、检查是否是柱子久用引起的柱压不稳，用异丙醇：甲醇＝10:90冲，流速要调低。

(2)液相柱硅胶与树脂的区别扩展阅读

在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等。

1.样品是极性的且弱酸性的，就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱。

2. 如果样品极性太强，或酸性太强，可以选择CN，NH2，或硅胶柱，HILIC（亲水色谱），也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。

（缺点是离子对试剂平衡时间长，对流动相pH要求比较精密，否则很难重复实验，另外离子对试剂很难洗下来，基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验）。

3. 若样品是碱性的，可选择高纯硅胶柱（高纯硅胶缺少金属杂质，且硅胶端基封尾）或一些经过修饰的C18柱（如极性嵌入技术或碱去活技术等）。

他们都会减少碱性化合物的拖尾，一般会选择中性或偏碱的条件下做，因为这样可增加碱性样品的保留。

4.如果碱性化合物的极性太强，或碱性太强，可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测（优点是方法开发简单，缺点是目前实 现这一技术的色谱柱品牌比较少，价格也高）。

或者选用HILIC色谱柱（硅胶柱在反相条件下使用，这也是很经典的检测碱性样品的方法）选择强离子交换柱也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。

③ 我想买Merck默克液相色谱柱，但不清楚默克液相色谱柱具体有哪些类型产品，求解答，谢谢

1 液-固吸附色谱
固定相：固定吸附剂为，如硅胶、氧化铝等，较常使用的是5~10μm的硅胶吸附剂;
流动相：各种不同极性的一元或多元溶剂。
分离原理：组分在固定相吸附剂上的吸附与解吸；
适用于分离相对分子质量中等的油溶性试样，对具有官能团的化合物和异构体有较高选择性；
缺点：非线形等温吸附常引起峰的拖尾；

2 液-液分配色谱
固定相与流动相均为液体（互不相溶）
分离原理：组分在固定相和流动相上的分配
流动相：对于亲水性固定液，采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定液的极性（正相 normal phase），反之，流动相的极性大于固定液的极性（反相 reverse phase）。正相与反相的出峰顺序相反；
固定相：早期涂渍固定液，固定液流失，较少采用
化学键合固定相：（将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶（担体）表面的游离羟基上。C-18柱（反相柱）

3 离子交换色谱
固定相：阴离子离子交换树脂与阳离子离子交换树脂
流动相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液；阳离子离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液
分离原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应；组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。亲和力大，保留时间长；
阳离子交换：R­-SO3H+M+ = R-SO3M+ H+
阴离子交换：R-NR4OH + X - =R-NR4X+ OH-
应用：离子及可离解的化合物，氨基酸，核酸等。

4 离子色谱
离子色谱是在20世纪70年代中期发展起来的一种技术，其与离子交换色谱的区别是其采用了特制的、具有较低交换容量的离子交换树脂作为柱填料，并采用淋洗液抑制技术和电导检测器，是测定混合阴离子的有效方法。
固定相：交换容量非常低的特制离子交换树脂
分离原理：离子交换原理

5 离子对色谱
分离原理：将一种（或多种）与溶质离子电荷相反的离子（对离子或反离子）加到流动相中使其与溶质离子结合形成疏水性离子对化合物，使其能够在两相之间进行分配
阴离子分离：常采用烷基铵类，如氢氧化四丁基铵或氢氧化十六烷基三甲胺作为对离子
阳离子分离：常采用烷基磺酸类，如己烷磺酸钠作为对离子
反相离子对色谱：非极性的疏水固定相（C-18柱），含有对离子Y+的甲醇-水或乙腈-水作为流动相，试样离子X-进入流动相后，生成疏水性离子对Y+X-后：在两相间分配

6 排阻色谱
固定相：凝胶（具有一定大小孔隙分布）
分离原理：按分子大小分离。小分子可以扩散到凝胶孔隙，由其中通过，出峰最慢。中等分子只能通过部分凝胶孔隙，中苏通过；而大分子被排斥在外，出峰最快；溶剂分子小，故在最后出峰。
全部在死体积前出峰；
可对相对分子质量在100-105范围内的化合物按质量分离。

7 亲和色谱
分离原理：利用生物大分子和固定相表面存在的某种特异性亲和力，进行选择性分离。
先在载体表面键合上一种具有一般反应性能的所谓间隔臂（环氧、联胺等），再连接上配基（酶、抗原等），这种固载化的配基将只能和具有亲和力特性吸附的生物大分子作用而被保留，改变淋洗液后洗脱。
具体信息请参考：http://www.labgou.com/ke/?p=247

④ 一篇看懂液相色谱柱的分类、选择及维护！

液相色谱柱的分类主要基于色谱固定相基质，选择需依据分析物性质，维护包括平衡、再生及日常保养。

一、液相色谱柱的分类

• 硅胶基质：

  • 反相色谱柱：使用硅胶为基础，表面键合弱极性官能团，流动相通常为水、缓冲液与有机溶剂混合物。
  • 正相色谱：硅胶作为固定相，流动相极性相对较低，分离依据样品极性大小。
  • 离子交换色谱柱：使用磺化交联强阴/阳离子键合硅胶，适用于离子型化合物的分离。

• 聚合物基质：如聚苯乙烯二乙烯基苯或聚甲基丙酸酯等，适用于PH值范围宽及大分子物质的分离。

• 其他无机填料：如石墨化碳、氧化铝等，具有特殊性质，适用于特定分析需求。

二、色谱柱的选择

• 主要依据分析物的性质，如分子量大小、极性、溶解度等。硅胶基质填料适用于小分子量物质，聚合物填料适用于大分子物质。

三、色谱柱的维护

• 平衡：使用甲醇或乙腈冲洗色谱柱，确保分析样品流动相与冲洗溶剂互溶，以保持色谱柱的性能稳定。

• 再生：长期使用后柱效下降，可进行再生处理，如使用特定溶剂冲洗以恢复柱效。

• 日常保养：使用预柱保护分析柱，避免流动相组成及极性的剧烈变化；使用前对流动相进行脱气和过滤处理，以减少杂质对色谱柱的污染。