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陽離子交換劑緩沖對

發布時間:2023-04-27 14:30:44

離子交換層析的具體操作

對於離子交換纖維素要用流水洗去少量碎的不易沉澱的顆粒,以保證有較好的均勻度,對於已溶脹好的產品則不必經這一步驟。溶脹的交換劑使用前要用稀酸或稀鹼處理,使之成為帶H+或OH-的交換劑型。陰離子交換劑常用「鹼-酸-鹼」處理,使最終轉為-OH-型或鹽型交換劑;對於陽離子交換劑則用「酸-鹼-酸」處理,使最終轉為-H-型交換劑。
洗滌好的纖維素使用前必須平衡至所需的pH和離子強度。已平衡的交換劑在裝柱前還要減壓除氣泡。為了避免顆粒大小不等的交換劑在自然沉降時分層,要適當加壓裝柱,同時使柱床壓緊,減少死體積,有利於解析度的提高。
柱子裝好後再用起始緩沖液淋洗,直至達到充分平衡方可使用。 加樣:
層析所用的樣品應與起始緩沖液有相同的pH和離子強度,所選定的pH值應落在交換劑與被結合物有相反電荷的范圍,同時要注意離子強度應低,可用透析、凝膠過濾或稀釋法達此目的。樣品中的不溶物應在透析後或凝膠過濾前,以離心法除去。為了達到滿意的分離效果,上樣量要適當,不要超過柱的負荷能力。柱的負荷能力可用交換容量來推算,通常上樣量為交換劑交換總量的1%-5%。 已結合樣品的離子交換前,可通過改變溶液的pH或改變離子強度的方法將結合物洗脫,也可同時改變pH與離子強度。為了使復雜的組份分離完全,往往需要逐步改變pH或離子強度,其中最簡單的方法是階段洗脫法,即分次將不同pH與離子強度的溶液加入,使不同成分逐步洗脫。由於這種洗脫pH與離子強度的變化大,使許多洗脫體積相近的成分同時洗脫,純度較差,不適宜精細的分離。最好的洗脫方法是連續梯度洗脫,洗脫裝置見圖16-6.兩個容器放於同一水平上,第一個容器盛有一定pH的緩沖液,第二個容器含有高鹽濃度或不同pH的緩沖液,兩容器連通,第一個容器與柱相連,當溶液由第一容器流入柱時,第二容器中的溶液就會自動來補充,經攪拌與第一容器的溶液相混合,這樣流入柱中的緩沖液的洗脫能力即成梯度變化。第一容器中任何時間的濃度都可用下式進行計算:
C=C2-(C2-C1)(1-V)A2/A1
式中A1、A2分別代表兩容器的截面積:C1、C2分別表示容器中溶液的濃度;V為流出體積對總體積之比。當A1=A2時為線性梯度,當A1>A2時為凹形梯度,A1>A2時為凸形梯度。
洗脫時應滿足以下要求:
①洗脫液體積應足夠大,一般要幾十倍於床體積,從而使分離的各峰不至於太擁擠。
②梯度的上限要足夠高,使緊密吸附的物質能被洗脫下來。
③梯度不要上升太快,要恰好使移動的區帶在快到柱末端時達到解吸狀態。目的物的過早解吸,會引起區帶擴散;而目的物的過晚解吸會使峰形過寬。
洗脫餾份的分析按一定體積(5-10ml/管)收集的洗脫液可逐管進行測定,得到層析圖譜。依實驗目的的不同,可採用適宜的檢測方法(生物活性測定、免疫學測定等)確定圖譜中目的物的位置,並回收目的物。
離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生。如離子交換纖維素可用2mol/:NaCl淋洗柱,若有強吸附物則可用0.1mol/LNaOH洗柱;若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生,也可用乙醇洗滌,其順序為:0.5mol/LNaOH-水-乙醇-水-20%NaOH-水。保存離子交換劑時要加防腐劑。對陰離子交換劑宜用0.002%氯已定(洗必泰),陽離子交換劑可用乙基硫柳汞(0.005%)。有些產品建議用0.02%疊氮鈉。

Ⅱ 離子交換的水處理步驟是什麼

離子交換反應是可逆反應,這種反應是在固態的樹脂和水溶液接觸的界面間發生的。在水溶液中,連接在離子交換樹脂骨架上的功能基能離解出可交換的離子B+,該離子在較大范圍內可以自由移動並能擴散到溶液中。同時,溶液中的同類型離子A+也能擴散到整個樹脂結構內部,這兩種離子之間的濃度差推動著它們之間進行交換。其濃度差越大,交換速度就越快。離子交換樹脂對不同的離子表現出了不同的交換親和吸附性能,這種選擇性與樹脂本身所帶有的功能基、骨架結構、交聯度有關,也與溶液中離子的濃度、價數有關。一般情況下,離子價數越高,與樹脂功能基的靜電吸引力越大,親和力越大;對同價離子而言,原子序數增加,樹脂對其選擇性也增加。由於陽離子交換劑可以與水中的陽離子進行交換,陽離子交換劑可以與水中的陰離子進行交換,因此,選用合適的交換劑便可去除水中所有的雜質離子,製得純凈的水。制備純水用的陽離子交換樹脂呈酸性,交換基因主要有磺酸基、羧基或酚基等,它們以H+與被處理水中的金屬離子交換。陰離子交換樹脂呈鹼性,其交換基團主要有季胺基【-N(CH3)3OH】、伯胺基(-NH2)等鹼性基因,它們在水中能以OH_與水中的陰離子進行交換反應。採用聯合處理裝置,使被處理水相繼通過H+型陽離子交換劑和OH_型陰離子交換劑,與之進行交換,便可得到純水。

Ⅲ 離子交換層析的原理是什麼 已解決

離子交換層析法是從復雜的混合物中,分離性質相似大分子的方法之一,依據的原理是物內質的酸鹼性容,極性,所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質,對管柱上的離子交換劑有不同的親和力,改變沖洗液的離子強度和pH值,物質就能依次從層析柱中分離出來。

層析開始前,功能基團與反離子穩定結合,就與反離子發生可逆交換,與層析劑結合被固定下來。因為鹽離子可以與底物競爭功能基團,鹽濃度越高樣品與層析劑結合越不緊密,易被洗脫下來。不同物質與層析劑結合程度不同,洗脫下來的時間不同,因此得以分開。

(3)陽離子交換劑緩沖對擴展閱讀

離子交換劑的選擇首重保持欲分離物質的生物活性,以及在不同pH值環境中,此物質所帶的電荷和電性強弱,陰陽離子交換劑的選擇若被分離物質帶正電荷,這些鹼性蛋白質,它們在酸性溶液中較穩定,親和力強,故採用陽離子交換劑。

在鹼性溶液中較穩定,則使用陰離子交換劑,如果欲分離的物質是兩性離子,一般考慮在它穩定的pH范圍帶有何種電荷,作為交換劑的選擇。離子交換劑的再生與保存離子交換劑可在柱上再生,若有脂溶性物質則可用非離子型去污劑洗柱後再生,也可用乙醇洗滌。

Ⅳ DEAE 層析原理是什麼

給你找了以前的文章,你可以看一下。如下。。
層析技術是以離子交換纖維素或以離子交換葡聚糖凝膠為固定相,以蛋白質等樣品為移動相,分離和提純蛋白質、核酸、酶、激素、多糖等的一項技術。
在纖維素與葡聚糖分子上結合有一定的離子基團,當結合陽離子基團時,可換出陰離子,則稱為陰離子交換劑。如二乙氨乙基(Dicthylaminoethyl,DEAE)纖維素。在纖維素上結合了DEAE,含有帶正電荷的陽離子纖維素—O—C6 H14N+H,它的反離子為陰離子(如Cl-等),可與帶負電荷的蛋白質陰離子進行交換。當結合陰離子基團時,可置換陽離子,稱為陽離子交換劑,如羧甲基(Carboxymethy, CM)纖維素。纖維素分子上帶有負電荷的陰離子(纖維素-O-CH2-COO一),其反離子為陽離子(如Na+等),可與帶正電荷蛋白質陽離子進行交換。
溶液的pH值與蛋白質等電點相同時,靜電荷為0,當溶液pH值大於蛋白質等電點時,則羧基游離,蛋白質帶負電荷。反之,溶液的pH值小於蛋白質等電點時,則氨基電離,蛋白質帶正電荷。溶液的pH值距蛋白質等電點越遠,蛋白質的電荷越多。反之則越少。血清蛋白質均帶負電荷,但各種蛋白質帶負電荷的程度有所差異,以白蛋白為最多,依次為 球蛋白, 球蛋白和 球蛋白。
在適當的鹽濃度下,溶液的pH值高於等電點時,蛋白質被陰離子交換劑所吸附;當溶液的pH值低於等電點時,蛋白質被陽離子交換劑所吸附。由於各種蛋白質所帶的電荷不同。它們與交換劑的結合程度也不同,只要溶液pH值發生改變,就會直接影響到蛋白質與交換劑的吸附,從而可能把不同的蛋白質逐個分離開來。
交換劑對膠體離子(如蛋白質)和無機鹽離子(如NaCl)都具有交換吸附的能力,當兩者同時存在於一個層析過程中,則產生競爭性的交換吸附。當Cl一的濃度大時,蛋白質不容易被吸附,吸附後也易於被洗脫,當Cl一濃度小時,蛋白質易被吸附,吸附後也不容易被洗脫。因此,在離子交換層析中,一般採用兩種方法達到分離蛋白質的目的。一種是增加洗脫液的離子強度,一種是改變洗脫液的pH值。pH值增高時,抑制蛋白質陽離子化,隨之對陽離子交換劑的吸附力減弱。pH值降低時,抑制蛋白質陰離子化,隨之降低了蛋白質對陰離子交換劑的吸附。當使用陰離子交換劑時,增加鹽離子,則降低pH值。當使用陽離子交換劑時,增加鹽離子濃度,則升高溶液pH值。

Ⅳ 離子交換怎麼試驗

離子交換法是一種藉助於離子交換劑上的離子和廢水中的離子進行交換反應而除去廢水中有害離子的方法。離子交換是一種特殊吸附過程,通常是可逆性化學吸附;其特點是吸附水中離子化物質,並進行等電荷的離子交換。
離子交換劑分無機的離子交換劑如天然沸石,人工合成沸石,及有機的離子交換劑如磺化煤和各種離子交換樹脂。
在應用離子交換法進行水處理時,需要根據離子交換樹脂的性能設計離子交換設備,決定交換設備的運行周期和再生處理。通過本實驗希望達到下述目的:
1) 加深對離子交換基本理論的理解;學會離子交換樹脂的鑒別;
2) 學會離子交換設備操作方法;
3) 學會使用手持式鹽度計,掌握pH計、電導率儀的校正及測量方法。
二、實驗內容和原理
由於離子交換樹脂具有交換基因,其中的可游離交換離子能與水中的同性離子進行等當量交換。 用酸性陽離子交換樹脂除去水中陽離子,反應式如下:
nRH + M+n → RnM + nH+
M——陽離子 n——離子價數
R——交換樹脂
用鹼性陰離子交換樹脂除去水中的陰離子,反應式如下:
nROH + Y−n → RnY + nOH-
Y——陰離子
離子交換法是固體吸附的一種特殊形式,因此也可以用解吸法來解吸,進行樹脂再生。
本實驗採用自來水為進水,進行離子交換處理。因為自來水中含有較多量的陰、陽離
子,如Cl¯, NH4+,Ca,Mg,Fe,Al,K,Na等。在某些工農業生產、科研、醫療衛生等工作中所用的水,以及某些廢水深度處理過程中,都需要除去水中的這些離子。而採用離子交換樹脂來達到目的是可行的方法。

Ⅵ 為什麼分離酸性蛋白質要選擇pH較大的緩沖液,而分離鹼性蛋白質選擇pH較小的緩沖液

若使用緩沖液的pH值高於蛋白質的等電點時,蛋白質在該緩沖液中攜帶凈負電荷,可以使用陰離子交換劑進行分離.反之,用陽離子交換劑進行分離.陰離子交換劑應選用陽離子緩沖液,如Tris、乙二胺、烷基胺等.

Ⅶ 離子交換纖維素色譜法的交換種類

離子交換劑分為兩大類,即陽離子交換劑和陰離子交換劑。各類交換劑根據其解離性大小,還可分為強、弱兩種,即 強酸劑陽離子交換劑 弱酸劑強鹼型陰離子交換劑弱鹼型。
1.陽離子交換劑
陽離子交換劑中的可解離基因是磺酸(-SO3H)、磷酸(-PO3H2)、羧酸(COOH)和酚羥基(-OH)等酸性基。
某些交換劑在交換時反應如下:
強酸性:R-SO3-H++Na+ R-SO3- Na+H+
弱酸性:R-COOH+Na+ R-COONa+H+
國產樹脂中強酸1×7(上海樹脂#732)和國外產品Dowex 50、Zerolit 225等都於強酸型離子交換劑。
2.陰離子交換劑
陰離子交換劑中的可解離基因是伯胺、(-NH2)、仲胺(-NHCH3)、叔胺[N-(CH3)2]和季胺[-N(CH3)2]等鹼性基團。某些交換反應如下:強鹼性:R-N+(CH3)2 H·OH-+Cl R-N+(CH3)2 Cl+OH-弱鹼性:R-N+(CH3)2 H·OH-+Cl R-N+(CH3)2 HCl+OH-強鹼性#201號國產樹脂和國外Dowex1、Dowex2、ZerolitFF等都屬於強鹼型陰離子交換劑。
3.纖維素離子交換劑
陽離子交換劑有羥甲基纖維素(CM-纖維素),陰離子交換劑有氯代三乙胺纖維紗(DESE-纖維素)。
4.交聯葡聚糖離子交換劑
是將交換基因連接到交聯葡聚糖上製成的一類交換劑,因而既具有離子交換作用,又具有分子篩效應,是一類廣泛應用的色譜分離物質。常用的Sephadex離子交換劑也有陰離子和陽離子交換劑兩類。陰離子交換劑有DEAE-Sephadex A-25,A-50和QAE- Sephadex A25,A50; 陽離子交換劑有CM-Sephaetx C-50,C-50和Sephadex C-25,C-50。陰離子交換劑用英文字頭A,陽離子交換劑的英文字頭是C。英文字後面的數字表示Sephadex型號。3.瓊脂糖離子離交換劑:是將DESE-或CM-基團附著在Sepharose CL-6B上形成,DEAE-Sephades(陰離子)和CM-Sepharose(陽離子),具有硬度大,性質穩定,凝膠後的流速好,分離能力強等優點。

Ⅷ 陽離子交換量名詞解釋

在一定的pH值條件下(一般pH為7),每千克干土所吸收的全部交換性陽離子(K+、Na+、Ca2+、Mg2+、NH4+、H+、Al3+等)總量。

常用單位:每千克厘摩爾數cmol(+)/kg土

國際單位:mmol/kg土

(8)陽離子交換劑緩沖對擴展閱讀:

土壤陽離子交換量(CEC)的大小,基本上代表了土壤可能保持的養分數量,即保肥性的高低。陽離子交換量的大小,可作為評價土壤保肥能力的指標。陽離子交換量是土壤緩沖性能的主要來源,是改良土壤和合理施肥的重要依據。

b、土壤質地越細,其陽離子交換量越高。

c、對於實際的土壤而言,土壤黏土礦物的SiO2/R2O3比率越高,其交換量就越大。

d、土壤溶液pH值,因為土壤膠體微粒表面的羥基(OH)的解離受介質pH值的影響,當介質pH值降低時,土壤膠體微粒表面所負電荷也減少,其陽離子交換量也降低;反之就增大。

Ⅸ 設計一種利用離子交換劑的方法分離蛋白質混合液的方案

選用纖維素離抄子交換劑。因為蛋白質襲不能擴散到樹脂的鏈狀結構中,而纖維素離子交換劑交換容量大。選用ph為5.0的磷酸鹽緩沖溶液和強酸型陽離子交換劑如SE-纖維素。裝柱氫氧化鈉處理,0.1mol/L起始緩沖液平衡,上樣,吸附目標蛋白,0.15mol/L緩沖液洗脫,之後再選用ph6.5,8.0的緩沖液梯度洗脫。
等電點=4.0的蛋白質在5.0緩沖液中帶負電,不能被吸附,直接分離。隨後6.0的蛋白質被洗脫出來。再用ph6.5,8.0的緩沖液梯度洗脫。

Ⅹ 陽離子交換樹脂的交換容量

陽離子交換樹脂有很多種型號,不同的樹脂都有不同的交換容量。

離子交換樹脂的交換容量有哪幾種?

1、總交換容量:表示每meq/g(干樹脂)或 meq/mL(濕樹脂)能夠進行交換的化學基團的總量,打個比方,比如總共有25毫升樹脂,交換容量為 1 meq/mL的樹脂,總交換容量就是25meq/mL。

2、工作交換容量:表示樹脂在一定的條件下,能夠進行交換的能力,主要與樹脂的種類、溫度、進水的流速、總交換容量等因素有關,根據樹脂的使用環境、條件的不同,樹脂的交換容量也會不同。

3、再生交換容量:再生交換容量指的是,樹脂在吸附飽和,進行再生之後,樹脂還能夠有多少交換容量,再生交換容量除了和樹脂本身的性能有關以外,主要就是和樹脂再生時使用的再生劑有關,再生交換容量一般是總交換容量的70-80%。


離子交換樹脂工作交換容量的測試方法:

1、陽樹脂工作交換容量計算公式:Qa=(A+S)V/ VR

Qa:陽樹脂的工作交換容量,單位為mol/m³

A:陽床平均進水鹼度,單位為mmol/l

S: 陽床平均出水酸度,單位為mmol/l

V: 周期制水總量, 單位為m³

VR:床內樹脂體積(逆流再生則不含壓脂層體積),單位為m³

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