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超濾管裡面可以加多少樣品

發布時間:2023-04-22 17:55:03

① 離心管和離心超濾

離心管就來是一個簡單的可自以承受高轉速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉澱。
離心超濾管會有一個類似於內管和外管的兩個部分,內管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內管中),就是超濾的原理。。。。常用於濃縮樣品。

② 30kd超濾管最大轉速多少

30kd超濾管最大轉速4000rpm。最大不能超過4000g,離心5-8分鍾,即可將4ml樣品濃縮至1ml以下至幾十微升。一般是用來分離血漿。血漿蛋白的分離將血清加入到30kd分子量的超濾管中,將超濾管嵌套進入嵌套管中,進行高速離心,轉速12000轉每分鍾,離心10分鍾。離心結束後,將嵌套管中的液體收集,得到初步的組織液。

③ 超濾管規格太小怎麼放進離心機

1、首先將超濾內管插入所提供的一個微量離心管中。
2、其次向超濾管內管中加入不超過500微升的樣本,並蓋上蓋子。
3、最後讓蓋子的連接帶朝著轉子的中央,用一個超濾管平衡即可。

④ 想問一下超濾離心管怎麼使用啊還有它能不能重復使用

可以的,先用超聲波洗干凈,再用高壓滅菌鍋滅菌後,備用即可

⑤ 求助:第一次使用超濾離心管應該怎麼處理

可能不同廠家的產品保存運輸條件不一樣。
如果有甘油等保護劑,那就一定要洗干凈再加樣品。版權
乾的超濾管也要先潤濕再用,否則可能不能完全利用膜面積。
最好,用樣品buffer潤洗下再加樣,最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好,使膜充分浸潤。

降低吸附的辦法有:
1,蛋白濃度不要過低
2,盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3,用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗(不影響蛋白活性的前提下)
4,加入保護蛋白,如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)

用完保存在20% EtOH中,4C保存,防止長菌,依不同樣品可以重復使用不同的次數。

⑥ 超濾離心樣品濃度

濃度為一毫升01mg。
超濾離心樣品濃度標椎為01mg/ml,請確保您的樣本的起始濃度大於這個濃度。
超濾離心濃縮管又稱超濾離心管、或離心過濾器,其可用於實驗室超濾應用,可實現較高的回收率、截留率和濃縮速度。

⑦ 取50ul國產Bradford溶液 ,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白.

先回答你的問題:

  1. Bradford溶液現在自己配也行(其實就是考馬斯亮藍溶液),不過買商品化的也很多,可以買Bradford蛋白定量試劑盒之類的東西。可以用這個試劑檢測溶液中蛋白的濃度。如果要自己配,可以參考:http://..com/link?url=7UwTia_b3FPpAaia

  2. 在用超濾管的時候,保留在上方的是所需蛋白樣品,超濾膜下方收集到的溶液就是流穿液。


這個意思應該是說,如果超濾完全保留蛋白,流穿液中理論是沒有蛋白的,所以加入bradford溶液(棕紅色)是不應該引起溶液變色的。但是如果有蛋白,會與Bradford溶液反應,變成藍色。但是也有問題,超濾膜只能保留一定分子量以上的蛋白,如果截留分子量比較大,例如30K或者更大,有一些小的蛋白還是會進到流穿液的,會產生變色反應,而且肉眼觀察變色,也沒有辦法給出具體蛋白的量,可能還是用儀器檢測一下比較好。

⑧ 超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管(MWCO10kD)。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選,視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,【取50ul國產Bradford溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mg/ml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測】,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的Buffer,直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作,用黃槍頭(200ul)取,輕輕順著邊緣插入槍頭,輕輕吹打、混勻蛋白液,注意不要碰到超濾膜,然後吸取濃縮液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取,否則難度太大,有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中,沒過超濾膜,防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉澱,可以先加入水,然後用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉澱懸起,然後倒掉,不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml
離心管,排出部分水,然後蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。

水處理超濾系統裡面都包括什麼

簡單介紹3種水處理超濾系統:

1、選擇膜+活性碳工藝

原水—格柵—調節池—膜處理—活性碳—消毒。


2、對優質雜排水、雜排水為中水水源的工藝

以物化處理為主 原水—格柵—調節池—混凝或氣浮—過濾—消毒;

以物化+膜法為著眼點 原水—格柵—調節池—混凝—膜處理—消毒。


3、對雜排水和混合污水作為中水水源的工藝

以生化處理為主 原水—格柵—調節池—生物處理—沉澱—過濾—消毒;

用兩段生化法工藝 原水—格柵—調節池—一段沉澱—二段沉澱—過濾—消毒。


工業超濾裝置有板框式、管式、螺旋卷式,其中螺旋卷式應用較多。

超濾膜材料有醋酸纖維素(CA)、聚礬(PSF)、聚醚礬(PES)、聚碳酸鹽樹脂、聚丙烯腈(PAN)和聚合電解質絡合物等。

超濾裝置運行過程中,主要的運行維護內容是清洗濾膜,清洗方法分為物理方法和化學方法。

物理方法一般採用溫水(40~50℃)沖洗。

化學方法是用化學清洗劑,如酸、鹼、表面活性劑溶液等清洗。

對於不同種類的膜要慎重選擇化學清洗劑,以防止化學清洗劑對膜的損害。經良好清洗的膜,透水率可恢復95 %~100%,超濾膜的使用壽命可達到一年以上。

廢水處理中,目前超濾主要用來去除污水中的澱粉、蛋白質、樹膠、油漆等有機物,以及黏土、微生物等,此外在廢水處理中還可用於污泥脫水,代替澄清池等,以及用於純化甘醇。

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