❶ 如何用蛋白濃縮管
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。
新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
(1)超濾管離心的條件擴展閱讀:
超濾濃縮離心管,最新推出專利產品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。
備有四種材質的超濾膜:聚醚碸、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取並回收,又可將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使濃縮液達到近乎完全回收;
❷ 離心管和離心超濾管
離心管就來是一個簡單的可自以承受高轉速壓力的管子,比如離一些樣品,分離出上清沉澱。
離心超濾管會有一個類似於內管和外管的兩個部分,內管中是帶有一定分子量的膜,當高速離心時,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即內管中),就是超濾的原理。。。。常用於濃縮樣品。
❸ 超濾濃縮離心管使用前要怎麼處理
可能不來同廠家的產品保存運輸條源件不一樣。
如果有甘油等保護劑,那就一定要洗干凈再加樣品。
乾的超濾管也要先潤濕再用,否則可能不能完全利用膜面積。
最好,用樣品buffer潤洗下再加樣,最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好,使膜充分浸潤。
降低吸附的辦法有:
1,蛋白濃度不要過低
2,盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3,用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗(不影響蛋白活性的前提下)
4,加入保護蛋白,如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中,4C保存,防止長菌,依不同樣品可以重復使用不同的次數。
❹ 30kd超濾管最大轉速多少
30kd超濾管最大轉速4000rpm。最大不能超過4000g,離心5-8分鍾,即可將4ml樣品濃縮至1ml以下至幾十微升。一般是用來分離血漿。血漿蛋白的分離將血清加入到30kd分子量的超濾管中,將超濾管嵌套進入嵌套管中,進行高速離心,轉速12000轉每分鍾,離心10分鍾。離心結束後,將嵌套管中的液體收集,得到初步的組織液。
❺ 超濾離心管可以滅菌嗎
1、可以用70%的酒精消毒
2、如果是高溫高壓滅菌,要注意滅完菌後,管裡面的超濾膜是處於濕潤的狀態,所以需要立即使用,因為膜濕潤後就不能幹
❻ 超濾濃縮離心速度多少
5000r/min左右。超濾管的離心轉速根據不同體積,不同膜孔徑有些許差異,一般在5000r/min左右。
❼ 超濾管怎麼放蓋不會碎
超濾管的蓋不會碎。超濾離心管具有快速超濾功能,能夠達到較高的濃縮倍數,輕松實現從稀釋和復雜的混和樣本中濃縮回收目的產物。垂直設計的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助於快速的樣本處理,獲得較高樣本回收率(通常> 90%) ,並達到30倍的濃縮。
根據標稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時間為10-30分鍾。超濾膜的垂直設計也最大程度降低了溶質極化造成的濾膜結垢;死體積設計能有效防止過度離心使樣本幹掉而造成樣本損失。收集濾出液後,濃縮樣本(截留部分)可通過一個簡便的倒置(上下反轉)離心步驟而實現高效回收。超濾管未經消毒,僅供一次使用。
❽ 超濾離心管能分離蛋白和聚乙二醇嗎
超濾離心管可以用來分離蛋白和聚乙二醇的
聚乙二醇(PEG)是一種分子量內很小的試劑,而超濾管的容截留分子量一般是在3000道爾頓~10000道爾頓之間。絕大多數蛋白可以被截留在超濾管上層,而聚乙二醇可以穿透濾膜到達超濾管下層
所以超濾離心管可以用來分離蛋白和聚乙二醇的
❾ 超濾離心管放一般的離心機能用么
般的離心機有兩種轉子,一種是吊籃式的轉子,一種是角轉子.當然兩種都可以用來轉超濾管濃縮,不過角轉子效率會差很多,就是你離心時間長但濃縮體積還是不大.吊籃轉子效率比較高一些.