❶ 關於DNA的粗提取和鑒定的問題
1、實驗中兩次使用蒸餾水。
第一次，取血細胞液時加蒸餾水，目的是讓血細胞吸水漲破
第二次是在析出含DNA的粘稠物後，目的是稀釋NACL溶液，使DNA逐漸析出
2、加3次NACL，
第一次，在溶解核內DNA時，加入NACL後充分攪拌，加速染色質中DNA與蛋白質的分離，使DNA充分游離並融入NACL中
第二次在DNA粘稠物在溶解時，家NACL是使DNA再溶解
第三次是在DNA的鑒定中，目的是溶解DNA
3、過濾3次
第一次在提取血細胞核物質時進行過濾，取得的濾液中含有染色質，而濾出的是細胞膜、核膜和細胞器等的破碎結構
第二次在濾去含有DNA粘稠物只能夠，濾液中含有仍然溶解在NACL中的細胞中的一些成分，如蛋白質等
第三次在過濾含DNA的2mol/L的NACL溶液時，過濾後的濾液中含有DNA
(這可是純手打的，絕對正確，有不明白的再問我）QQ7428936
❷ DNA的粗提取中，血細胞脹破後的濾液中，DND應該是染色質的狀態，它有沒有溶解
1、實驗中兩次使用蒸餾水.
第一次,取血細胞液時加蒸餾水,目的是讓血細胞吸水漲破
第二次是在析出含DNA的粘稠物後,目的是稀釋NACL溶液,使DNA逐漸析出
2、加3次NACL,
第一次,在溶解核內DNA時,加入NACL後充分攪拌,加速染色質中DNA與蛋白質的分離,使DNA充分游離並融入NACL中
第二次在DNA粘稠物在溶解時,家NACL是使DNA再溶解
第三次是在DNA的鑒定中,目的是溶解DNA
3、過濾3次
❸ 高中生物實驗：DNA的粗提取與鑒定
DNA的粗提取與鑒定知識
1.DNA的粗提取與鑒定實驗原理
(1)粗提取原理：在NaCl溶液濃度低於0.14mol/L時，DNA的溶解度隨NaCl溶液濃度的增加而降低;在0.14mol/L時，DNA的溶解度最小;當NaCl溶液濃度繼續增加時，DNA溶解度又增大。
(2)純化原理：DNA不溶於酒精，但細胞中的某些蛋白質溶於酒精。
(3)鑒定DNA原理：在沸水浴條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。
2.實驗材料的選擇及處理
(1)不選擇豬血等哺乳動物的血液，因為哺乳動物成熟的紅細胞無細胞核。
(2)需要在雞血中加入抗凝劑——檸檬酸鈉溶液，防止血液凝固。
(3)需除去雞血中的血漿，因為血漿中無DNA。
特別提醒：不同生物的組織中DNA含量不同在選取材料時，應本著DNA含量高、材料易得、便於提取的原則。
3.生物實驗過程
步驟：提取細胞核物質→溶解核內DNA→析出DNA粘稠物→濾取含DNA的粘稠物→DN A粘稠物的再溶解→過濾含有DNA的氯化鈉溶液→提取含雜質較少的DNA→DNA的鑒定。
操作要點：(1)2次加蒸餾水：第一次是在是為了使血細胞吸水膨脹破裂，加水後必須充分攪拌使血細胞充分破裂;第二次加蒸餾水是為了稀釋氯化鈉溶液。
(2)3次加氯化鈉溶液：第一次加氯化鈉後，必須充分晃動燒杯，使二者混合均勻，加速染色質中DNA與蛋白質分離，使DNA充分游離並溶解在氯化鈉溶液中;第二次加氯化鈉溶液也是為了DNA的再溶解，這時溶液中的蛋白質含量已很少;第三次加氯化鈉溶液還是為溶解DNA。
(3)6次攪拌：除最後一次攪拌外前5次攪拌均朝一個方向:，並且在析出DNA、DNA再溶解和提取中，各步攪拌都要輕緩玻璃棒，不要直插燒杯底部防止DNA分子斷裂。
(4)3次過濾：第一次過濾，留濾液;第二次過濾，留粘稠物;第三次過濾，留濾液。注意這3次過濾都用紗布，獲得沉澱物或粘稠物的通常為多層，獲得濾液的紗布層數適當減少。
特別提醒：若以植物為實驗材料，步驟上大致相同，在材料的處理上有幾點不同：一是增加研磨步驟，目的是破壞細胞壁;二是加入洗滌劑，目的是溶解細胞膜及核膜;三是加食鹽，可加速細胞膜及核膜的破裂。
4.DNA的粗提取與鑒定實驗注意事項
(1)用冷酒精濃縮和沉澱DNA時所用的95%酒精，必須經過充分預冷後才能使用，冷酒精與含 DNA的氯化鈉溶液體積比是2：1 。如果用冷酒精處理後，懸浮於溶液中的絲狀物較少，可將混合液放於冰箱中再冷卻幾分鍾，然後再用玻璃棒捲起絲狀物。
(2)雞血細胞破碎以後釋放的DNA，容易被玻璃容器吸附，由於細胞內DNA的含量本來就比較少，再被玻璃容器吸附去一部分，提取到的DNA就會更少。因此，實驗過程中最好使用塑料的燒杯和試管，這樣可以減少提取過程中DNA的損失。
❹ DNA的粗提取和鑒定為什麼要四次過濾第四次過濾有什麼用
第一次過濾：過濾提取雞血細胞核中的DNA(在濾液中),濾掉的是破碎的細胞結構（沉澱物）；
第二次過濾：過濾用2mol/L的NaCl充分溶解的DNA(在濾液中),濾去的是溶解度低的蛋白質等雜質（在沉澱物中）；
第三次過濾：過濾用0.14mol/L的NaCl析出的DNA（在沉澱物中）,濾去的是溶液中的雜質(在濾液中)；
第四次過濾：過濾再次用2mol/L的NaCl充分溶解的DNA(在濾液中),濾去的是溶解度低的蛋白質等雜質（在沉澱物中）；
第四次過濾進一步除雜並溶解DNA,為下一步用冷卻的95%酒精析出DNA做准備.
有說三次過濾的,就是有的資料不考慮上邊說的第一次過濾,不矛盾.
❺ 有關實驗「DNA的提取及檢測」的問題
實驗准備工作：
1 所用離心管、槍頭要洗凈、烘乾（最好滅菌）。
2 試劑配製：
1 M Tris-HCl (pH 8.0): 稱取Tris-Base 121g, 加入約 ml 水在磁力攪拌器上攪拌，使其充分溶解後加入濃鹽酸調整pH至8.0後加水定溶至1000 ml. 滅菌後於室溫保存。
0.5 M EDTA (pH 8.0): 稱取EDTA-Na2鹽 187 g 加入約 800 ml水，在磁力攪拌器上邊攪拌邊加入固體NaOH，當EDTA和NaOH均完全溶解，溶液變清時其pH值剛好達到8.0左右，再用pH試紙略加調整即可, 滅菌後於室溫保存。
5.0 M NaCl: 稱取NaCl 300 g, 加入蒸餾水約800 ml 於磁力攪拌器上充分攪拌，約5分鍾後停止攪拌，靜止2~3分鍾，倒出上清液，再加入100 ml蒸餾水重復前面的步驟，直到NaCl充分溶解後定溶至1000 ml., 滅菌後於室溫保存。
酚：氯仿：異戍醇（25：24：1）的配製：可參考《分子克隆》亦可按如下方法配製取重蒸酚100 ml ，蒸餾水50 ml，8-羥基喹嚀0.05g 加入500 ml玻璃燒杯於磁力攪拌器上邊加熱邊攪拌，待酚達到水飽和後加入18 g Tris-Base，等Tris-Base 完全溶解後加入100 ml氯仿：異戌醇（24：1），攪拌10~20分鍾，靜止約10分鍾，除去上層水相後，裝入棕色瓶，最後加入20 ml 0.1M的Tris-HCl保護液於4℃保存。
DNA Buffer的配製：
1 M Tris-HCl (pH 8.0)
100 ml
0.5 M EDTA (pH 8.0):
100 ml
5.0 M NaCl:
300 ml
H2O
500 ml
滅菌後於室溫下保存3個月左右，用時按1.5%往Buffer中加入CTAB，在電爐上燒開；在通風櫥里加入1%的巰基乙醇( 現配現用)。
DNA的提取：
1 取2~5 g葉片或愈傷組織，加入適量液氮研碎，轉入預冷的50ml離心管，加入20 ml DNA提取緩沖液充分搖勻，於65℃水浴60~90 min，中途輕輕搖勻兩次。
2 加入15 ml 氯仿：異戍醇（24：1）輕輕搖勻10分鍾，於BECKMAN離心機中4000 rpm離心15分鍾。
3 取上清液於另一50 ml離心管加入10 ml 氯仿：異戍醇（24：1）重復步驟2。
4 吸上清液於一干凈的50 ml 離心管，加入15 ml 冷凍的異丙醇，輕輕搖勻後於-20℃冷凍半小時，4000 rpm離心10分鍾。棄上清液，加入5 ml 76%的乙醇（含10 mM
NH4Ac）浸泡5 h（或過夜），中途換乙醇2-3次。
5 棄乙醇風干沉澱約半小時，加入3.0 ml TE緩沖液（10 mM Tris-HCl pH 8.0；1 mM EDTA , pH 8.0），20 µl RNase A（10 mg/ml），37℃溫浴過夜。
6 溶液轉入一10 ml離心管，加入3.0 ml苯酚：氯仿：異戊醇（25：24：1）充分顛倒混勻，4000 rpm離心15 min，吸上清液於另一10 ml的離心管中，（可重復一次）。
7 加入1 ml 5.0 M的NaCl和3.0 ml水飽和乙醚，充分混勻，4000 rpm離心5 min。
8 棄乙醚，用20 µl槍頭擋住離心管管口內側，用力下壓槍頭，使槍頭與管壁間形成一狹縫，讓下清液從縫中流入另一10 ml離心管。
9 加入5 ml冷凍的異丙醇，輕輕搖勻後於-20℃冷凍半小時，4000 rpm離心10分鍾。棄上清液，加入3 ml 70%的乙醇浸泡4~6 h（或過夜），中途換乙醇2-3次。風干乙醇，加入500 µl TE溶解，或浸在乙醇中長期保存。
DNA檢測
1 取DNA原液15 µl稀釋至3.0 ml，用UV-1601型紫外分光光度計測定230 nm、 260 nm及280 nm的吸光值。
高質量的DNA要求：A260/A230>2.0； 1.7<A260/A280<1.9
2 將DNA原液適當稀釋後，用1 Χ TAE，0.8%瓊脂糖凝膠2V/cm電泳1 h進行質量檢測。
3 向一定量的DNA中加入限制性內切酶EcoR I至4-5U/μg DNA，37℃消化過夜，用0.5 Χ TBE，0.8%瓊脂糖凝膠2.5V/cm電泳3 h進行檢測。
CTAB法微量提取DNA
1. 葯品的配製:
CTAB提取液：
(1)100mM Tris-HCl(PH 8.0),1.5M NaCl,50mM EDTA(PH 8.0)
(2)1% PVP,2% CTAB
(3)取少許(1)加到(2)中，攪拌成糊狀,後加(1)至足量,65℃水浴充分溶解備用。使用前要在65℃溫浴一會兒，然後加入1-4%巰基乙醇,混均勻。
苯酚：氯仿：異戊醇（25∶24∶1）： 重蒸酚65℃水浴溶解，在燒杯中加入80ml溫熱的蒸餾水，加入少許8-羥基喹啉，溶解後加入100ml重蒸酚，再加入100ml氯仿：異戊醇（24：1），加入20克Tris Base，磁力攪拌器上攪拌1.5 h左右至停止攪拌後很快分層，然後裝入棕色瓶中，4℃冰箱中儲存備用。
2. 材料的採取與保存：
在超凈工作台上，取試管苗葉片，放入無菌的1.5 ml離心管中，置於冰盒中，然後把裝有葉片的離心管一起裝在紗布袋中，置液氮中冷凍10分鍾，取出後置於—70℃冰箱中可長期保存，需要用時，取出置於冰盒中。
3．DNA的粗提
在裝有葉片的離心管中加入石英砂少許（約0.07克），用事先滅過菌的—20℃冰箱中預冷的尖頭玻棒將材料戳到底部，先壓後研磨，研細後加入600 ul CTAB提取液，再繼續研磨一會兒使其懸浮均勻，然後在65℃水浴鍋中溫浴60-90分鍾，隔30分鍾取出上下輕輕顛倒幾次，水浴之後，加入700ul苯酚：氯仿：異戊醇（25：24：1），，上下晃動10分鍾以上，其間置於37℃水浴鍋中溫浴一會（冬季），使之充分混勻，然後10000-12000rpm離心5-10分鍾，吸取上清液轉至另一離心管中，加入60 ul 5M NaCl，再加入-20℃冰凍無水乙醇1ml，輕輕顛倒數次，混合均勻後冰凍30分鍾沉澱DNA，然後8000-10000rpm離心5分鍾，棄上清液，加入1 ml 70%酒精浸泡2小時或過夜，8000rpm離心5分鍾,棄酒精之後在工作台上風干DNA，注意不要過干，否則會使以後溶解困難。
4. DNA的純化：
向風干後的DNA中加入500 ul 1xTE，37℃水浴15-30分鍾至DNA完全溶解，然後加入700ul苯酚：氯仿：異戊醇（25：24：1），上下顛倒離心管約10分鍾，至充分混勻，其間置於37℃水浴鍋中溫浴一會（冬季）；10000-12000 rpm離心5分鍾，吸取上層液至另一離心管中，加入700ul氯仿：異戊醇（24：1），顛倒10分鍾（方法同上），10000 -12000rpm離心5分鍾，吸取上層液至另一離心管中，加入60 ul 5M NaCl，再加入1ml冷凍的無水乙醇，輕輕顛倒，然後在-20℃冰箱中置30分鍾沉澱DNA，8000-10000 rpm離心2-3分鍾，使DNA分散狀緊貼在管壁上，棄酒精，加70%酒精1ml浸泡,2小時後換一次,後浸泡過夜，8000rpm離心3分鍾後棄酒精，風干，加50-100ul1xTE充分溶解，然後每管加5ul 5mg/ml Rnase,37℃水浴6小時或過夜。
5. DNA檢測:
（1）0.8%瓊脂糖凝膠電泳30-60分鍾：
TAE 100ml，EB 30ul，樣品3-5ul，電壓90V，
觀察A：DNA是否跑出，帶型是否整齊劃一；B：RNA是否除盡
（2）分光光度計檢測D260/D280的比值：在1.8-2.0的范圍內認為純度較高上述方法提取的DNA比值在1.65-1.95之間。濃度=30000xOD260（DNA樣品為5ul時）。
不知道你說的是動物的還是植物的，我當年做的是動物的。用的是雞血，因為在學校，沒有生物書，只能粗略的查一下了
1、實驗中兩次使用蒸餾水。
第一次，取血細胞液時加蒸餾水，目的是讓血細胞吸水漲破
第二次是在析出含DNA的粘稠物後，目的是稀釋NACL溶液，使DNA逐漸析出
2、加3次NACL，
第一次，在溶解核內DNA時，加入NACL後充分攪拌，加速染色質中DNA與蛋白質的分離，使DNA充分游離並融入NACL中
第二次在DNA粘稠物在溶解時，家NACL是使DNA再溶解
第三次是在DNA的鑒定中，目的是溶解DNA
3、過濾3次
第一次在提取血細胞核物質時進行過濾，取得的濾液中含有染色質，而濾出的是細胞膜、核膜和細胞器等的破碎結構
第二次在濾去含有DNA粘稠物只能夠，濾液中含有仍然溶解在NACL中的細胞中的一些成分，如蛋白質等
第三次在過濾含DNA的2mol/L的NACL溶液時，過濾後的濾液中含有DNA
❻ 紗布上有雜質
在DNA粗提取與鑒定實驗中，將第三次過濾獲得的紗布上含有的DNA的黏稠物（含有較多雜質）分別處理如下：
放入2mol/L的NaCl溶液，攪拌後過濾，除去不溶於NaCl溶液的雜質；再加入冷卻的、與濾液體積相等的95%酒精溶液，除去溶於酒精的雜質，再用玻璃棒沿一個方向攪拌，捲起絲狀物．
故選：C．
❼ 在DNA的粗提取實驗中，曾進行三次過濾，對三次過濾的敘述正確的是（）A．第一次過濾後，核物質存在於
A、在雞血細胞中加入蒸餾水，使得血細胞吸水破裂，細胞核內物質釋放出來，然後用紗布過濾取其濾液，A錯誤；
B、在2mol/L的NaCl溶液加蒸餾水並攪拌，由於DNA溶解度下降而析出白色絲狀黏稠物，用多層紗布過濾取其黏稠物，B正確；
C、在燒杯中用2mol/L的NaCl溶液溶解DNA，用兩層紗布過濾含DNA的NaCl溶液，C錯誤；
D、第三次過濾後，DNA存在於濾液中，能除去高濃度鹽中不能溶解的雜質，D正確．
故選：BD．
❽ dna的粗提與鑒定實驗為什麼加入2m的nacl後不過濾就加蒸餾水 博客
1、實驗中兩次使用蒸餾水。
第一次，取血細胞液時加蒸餾水，目的是讓內血細胞吸水漲破
第二次是容在析出含DNA的粘稠物後，目的是稀釋NACL溶液，使DNA逐漸析出
2、加3次NACL,
第一次，在溶解核內DNA時，加入NACL後充分攪拌，加速染色質中DNA與蛋白質的分離，使DNA充分游離並融入NACL中
第二次在DNA粘稠物在溶解時，家NACL是使DNA再溶解
第三次是在DNA的鑒定中，目的是溶解DNA
3、過濾3次
第一次在提取血細胞核物質時進行過濾，取得的濾液中含有染色質，而濾出的是細胞膜、核膜和細胞器等的破碎結構
第二次在濾去含有DNA粘稠物只能夠，濾液中含有仍然溶解在NACL中的細胞中的一些成分，如蛋白質等
第三次在過濾含DNA的2mol/L的NACL溶液時，過濾後的濾液中含有DNA