離子交換法純化cho細胞

『壹』 赫賽汀注射液的性 狀

本葯每瓶含濃縮曲妥珠單抗粉末440 mg，為白色至淡黃色凍乾粉劑，配製成溶液後可供靜脈輸注。溶解後曲妥珠單抗的濃度為21 mg/mL。
【溶劑】
滅菌注射用水，含1.1%苯乙醇作為防腐劑，為無色液體。賦形劑 ：L-鹽酸組氨酸，L-組氨酸，α,α-雙羧海藻糖，聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯20。 臨床療效總結於下表。免疫原性 兩個主要試驗中，除2例病人外，其它病人均接受了抗體的檢測。只有1例病人體內檢測到曲妥珠單抗的抗體，但該病人未產生過敏症狀。
【葯理作用】
曲妥珠單抗是一種重組DNA衍生的人源化單克隆抗體，選擇性地作用於人表皮生長因子受體-2(HER2)的細胞外部位。此抗體屬IgGl型，含人的框架區，及能與HER-2結合的鼠抗-p185 HER2抗體的互補決定區。
人源化的抗HER2抗體是由懸養於無菌培養基中的哺乳動物細胞(中CHO)產生的，用親合色譜法和離子交換法純化，包括特殊的病毒滅活的去除程序。國倉鼠卵巢細胞
HER2原癌基因或C-erbB2編碼一個單一的受體樣跨膜蛋白，分子量185kDa，其結構上與表皮生長因子受體相關。在原發性乳腺癌患者中觀察到有25%-30%的患者HER2過度表達。HER2基因擴增的結果是這些腫瘤細胞表面HER2蛋白表達增加，導致HER2受體活化。
研究表明，HER2過度表達的腫瘤患者較無過度表達的無病生存期短。HER2的過度表達可通過以下方法診斷：對腫瘤組織塊以免疫組化為基礎的評價法，組織或血漿樣品的ELISA法或熒光原位雜交法（FISH）。
曲妥珠單抗在體外及動物實驗中均顯示可抑制HER2過度表達的腫瘤細胞的增殖。另外，曲妥珠單抗是抗體依賴的細胞介導的細胞毒反應（ADCC）的潛在介質。在體外研究中，曲妥珠單抗介導的ADCC被證明在HER2過度表達的癌細胞中比HER2非過度表達的癌細胞中更優先產生。

『貳』 赫賽汀的說明書

概述：
赫賽汀（注射用曲妥珠單抗）——治療HER2過度表達的轉移性乳腺癌

★重組DNA衍生的人源化單克隆抗體
★可單葯使用,不良反應輕，耐受性好,可在門診治療
★療效顯著，中位緩解時間長

【性狀】本葯每瓶含濃縮曲妥珠單抗粉末440 mg，為白色至淡黃色凍乾粉劑，配製成溶液後可供靜脈輸注。溶解後曲妥珠單抗的濃度為21 mg/mL。
溶劑 ：滅菌注射用水，含1.1%苯乙醇作為防腐劑，為無色液體。
賦形劑 ：L-鹽酸組氨酸，L-組氨酸，α,α-雙羧海藻糖，聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯20。

【葯理作用】曲妥珠單抗是一種重組DNA衍生的人源化單克隆抗體，選擇性地作用於人表皮生長因子受體-2(HER2)的細胞外部位。此抗體屬IgGl型，含人的框架區，及能與HER-2結合的鼠抗-p185 HER2抗體的互補決定區。
人源化的抗HER2抗體是由懸養於無菌培養基中的哺乳動物細胞(中國倉鼠卵巢細胞CHO)產生的，用親合色譜法和離子交換法純化，包括特殊的病毒滅活的去除程序。
HER2原癌基因或C-erbB2編碼一個單一的受體樣跨膜蛋白，分子量185kDa，其結構上與表皮生長因子受體相關。在原發性乳腺癌患者中觀察到有25%-30%的患者HER2過度表達。HER2基因擴增的結果是這些腫瘤細胞表面HER2蛋白表達增加，導致HER2受體活化。
研究表明，HER2過度表達的腫瘤患者較無過度表達的無病生存期短。HER2的過度表達可通過以下方法診斷：對腫瘤組織塊以免疫組化為基礎的評價法，組織或血漿樣品的ELISA法或熒光原位雜交法（FISH）。
曲妥珠單抗是抗體依賴的細胞介導的細胞毒反應（ADCC）的潛在介質。在體外研究中，曲妥珠單抗介導的ADCC被證明在HER2過度表達的癌細胞中比HER2非過度表達的癌細胞中更優先產生。

【療效】
本葯已被用於臨床試驗，作為單葯治療HER2過度表達的轉移性乳腺癌，這些患者曾接受過針對其轉移灶1個或1個以上化療方案化療而失敗。
1、本葯在臨床試驗中還與紫杉醇或蒽環類葯物（阿黴素或表阿黴素）加環磷醯胺合用作為一線葯物，治療HER2過度表達的轉移性乳腺癌。
2、既往未接受化療的轉移性乳腺癌用蒽環類葯物（阿黴素60 mg/m2，表阿黴素75 mg/m2 ）加環磷醯胺（600 mg/m2 ）加（本品+AC）或不加（單AC）本品治療。
3、以前接受過以蒽環類葯為基礎的輔助化療的病人用紫杉醇（175 mg/m2，3小時輸入）加（本品+P）或不加（單P）本葯治療。病人可用本葯治療直到病情進展。
4、免疫原性兩個主要試驗中，除2例病人外，其它病人均接受了抗體的檢測。只有1例病人體內檢測到曲妥珠單抗的抗體，但該病人未產生過敏症狀。

【葯代動力學】葯物清除對轉移性乳腺癌的研究表明，短時間靜脈輸入10，50，100，250和500 mg 曲妥珠單抗每周1次的葯代動力學呈劑量依賴性。隨劑量水平的提高，平均半衰期延長，清除率下降。在臨床試驗中，使用了曲妥珠單抗4 mg/kg的首次負荷量和2 mg/kg每周維持量，觀察到其平均半衰期為5.8天（1-32天），在16-32周之間，曲妥珠單抗的血漿濃度達到穩定狀態，平均谷濃度約75 ug/mL。
特殊臨床情況下的葯物動力學 病人特性（如年齡，血漿肌酐濃度）對曲妥珠單抗分布的影響也進行了評價。數據顯示，曲妥珠單抗的體內分布在不同亞群病人中均無變化。

【適應症】適用於治療HER2過度表達的轉移性乳腺癌 ：作為單一葯物治療已接受過1個或多個化療方案的轉移性乳腺癌 ；與紫杉類葯物合用治療未接受過化療的轉移性乳腺癌。

【用法用量】作為單一葯物或與其它化療葯合用時建議按下列初次負荷量和維持量給葯。
1、初次負荷劑量 ：建議初次負荷量為4 mg/kg，90分鍾內靜脈輸入。應觀察病人是否出現發熱，寒戰或其它輸注相關症狀。停止輸注可控制這些症狀，待症狀消失後可繼續輸注。
2、維持劑量 ：建議每周用量為2 mg/kg。如初次負荷量可耐受，則此劑量可於30分鍾內輸完。
請勿靜推或靜脈沖入。

【療程】 本葯可一直用到疾病進展。根據國外市場調查資料顯示：接受治療的患者平均約連續使用24至26周
減量：臨床試驗中未減量使用過本葯。在可逆的化療導致的骨髓抑制過程中患者仍可繼續使用，是否減少或持續使用化療葯劑量需特別指導。
特殊患者 ：數據顯示不同年齡或血漿肌酐濃度對本葯的分布無影響。臨床試驗中，年老患者並未減量使用。

【不良反應】所有不良事件的數據均由臨床試驗得到，本葯均按推薦劑量單葯或與化療葯（蒽環類[阿黴素或表阿黴素]加環磷醯胺或紫杉醇）合用。單獨使用赫賽汀 有HER2過度表達的轉移癌患者，已對進行過1或多個方案化療無效者單獨使用本葯。213例患者，下列不良反應發生率≥ (greater than or equal to) 5% ：
整體 ：腹痛，意外損傷，乏力，背痛，胸痛，寒戰，發熱，感冒樣症狀，頭痛，感染，頸痛，疼痛。
心血管 ：血管擴張。
消化 ：厭食，便秘，腹瀉，消化不良，胃腸脹氣，嘔吐和惡心。
代謝 ：周圍水腫，水腫。
肌肉骨骼 ：關節痛，肌肉疼痛。
神經系統 ：焦慮，抑鬱，眩暈，失眠，感覺異常，嗜睡。
呼吸 ：哮喘，咳嗽增多，呼吸困難，鼻出血，肺部疾病，胸腔積液，咽炎，鼻炎，鼻竇炎。
皮膚 ：瘙癢，皮疹。
輸液相關症狀 ：第一次輸注本葯時，約40%患者會出現通常包括寒戰和/或發熱等的癥候群。這些症狀一般為輕或中度，很少需停用，可用解熱鎮痛葯如對乙醯氨基酚或抗組織胺葯如苯海拉明治療。其它症狀和/或體征包括：惡心，嘔吐，疼痛，寒戰，頭痛，眩暈，呼吸困難，低血壓，皮疹和乏力。這些症狀在以後的輸入本葯過程中很少出現。

【禁忌症】對曲妥珠單抗或其它成分過敏的患者禁止使用。

【注意事項】本葯治療必須在治療癌症方面很有經驗的內科醫生的監測下開始進行。在使用本葯治療的患者中觀察到有心臟功能減退的症狀和體征，如呼吸困難，咳嗽增加，夜間陣發性呼吸困難，周圍性水腫，S3奔馬律或射血分數減低。與赫賽汀治療相關的充血性心衰可能相當嚴重，並可引起致命性心衰、死亡、粘液栓子腦栓塞。特別在赫賽汀與蒽環類葯（阿黴素或表阿黴素）和環磷醯胺合用治療轉移乳腺癌的患者中，觀察到中至重度的心功能減退（紐約心臟學會（NYHA）分級的III/IV）。在治療前就有心功能不全的患者需特別小心。選擇使用本葯治療的患者應進行全面的基礎心臟評價，包括病史，物理檢查和以下一或多項檢查：EKG，超聲心動圖，MUGA掃描。目前尚無數據顯示有合適的評價方法可確定病人有發生心臟毒性危險。在本葯治療過程中，左室功能應經常評估。若患者出現臨床顯著的左室功能減退應考慮停用赫賽汀。監測並不能全部發現將發生心功能減退的患者。約2/3有心功能減退的患者因有症狀被治療，大多數治療後症狀好轉。治療通常包括利尿葯，強心苷類葯和/或血管緊張素轉換酶抑制劑類葯。絕大多數用本葯治療臨床有效的有心臟症狀和表現的患者繼續每周使用赫賽汀，並未產生更多的臨床心臟情況。在滅菌注射水中，苯乙醇作為防腐劑，它對新生兒和3歲以下的兒童有毒性。當本葯用於已知對苯乙醇過敏的病人時，應用注射用水重新配製。

【孕婦及哺乳期婦女用葯】在發育早期（孕20-50天）和晚期（孕120-150天）均觀察到曲妥珠單抗經胎盤傳送入胎兒。鑒於動物生殖研究結果並不能預示人類的反應，赫賽汀應不用於孕期婦女，除非對孕婦的潛在好處遠大於對胎兒的潛在危險。
哺乳期婦女 ：哺乳期cynomolgus猴子用25倍人每周維持量赫賽汀（2 mg/kg）進行研究，顯示曲妥珠單抗可分泌到乳汁里。出生3月內，幼猴血中存在曲妥珠單抗對其生長發育無任何不利影響。

【兒童用葯】小於18歲患者使用本葯的安全性和療效尚未確立。

【葯物相互作用】無正式的本葯在人體內與其它葯物相互作用的研究。未觀察到臨床試驗中與其共同使用的葯物有臨床明顯的相互作用。

【葯物過量】人體臨床試驗中未使用過過量赫賽汀。未嘗試用過單劑量>10 mg/kg。

【用葯須知】輸液准備 應採用正確的無菌操作。每瓶赫賽汀應由同時配送的20 mL滅菌注射用水衡釋，配好的溶液可多次使用，其曲妥珠單抗的濃度為21 mg/mL，pH 值約6.0。
配製成的溶液為無色至淡黃色的透明液體。
注射用水（非同時配送）也可以用於單劑量輸液准備。其它液體不能用於配製溶液。
根據曲妥珠單抗初次負荷量4 mg/kg或維持量2 mg/kg計算所需溶液的體積 ：
所需溶液的體積=體重（Kg）x 劑量（4 mg/Kg負荷量或2 mg/Kg維持量）/ 21（mg/mL，配置好溶液的濃度）
所需的溶液量從小瓶中吸出後加入250 mL 0.9% NaCl輸液袋中，5%的葡萄糖液不可使用。輸液袋輕輕翻轉混勻，防止氣泡產生。所有腸外用葯均應在使用前肉眼觀察有無顆粒產生或變色。一旦輸注液配好即應馬上使用。如果在無菌條件下稀釋的，可在2-8°C冰箱中保存24小時。
配伍禁忌 使用聚氯乙烯或聚乙烯袋未觀察到赫賽汀失效。
5%的葡萄糖溶液不能使用，因其可使蛋白凝固。
赫賽汀不可與其它葯混合或稀釋。

【規 格】440mg

【貯藏】2-8°C下貯存。
本葯用配套提供的注射用滅菌水溶解後在2-8°C冰箱中可穩定保存28天。配好的溶液中含防腐劑，因此可多次使用。28天後剩餘的溶液應棄去。
如果注射用水中不含防腐劑，則配好的赫賽汀溶液應該馬上使用。
不要把配的的溶液冷凍起來。
含0.9%NaCl的配好的赫賽汀輸注液，可在聚氯乙烯或聚乙烯袋中2-8°C條件下穩定保存24小時。30°C條件下，稀釋後的赫賽汀液最長可穩定保存24小時。但由於稀釋後的赫賽汀不含有效濃度的防腐劑，配置和稀釋後溶液最好還是保存在2-8°C冰箱內。從微生物學角度看赫賽汀輸注液應馬上使用。除非稀釋是在嚴格控制和證實為無菌條件下進行的，否則稀釋後的溶液不能保存。

【有效期】3年

【批准文號】注冊證號S20060026

【生產企業】Roche Pharma（Schweiz）Ltd.

『叄』 什麼是cho細胞它的來源細胞特徵常用培養液有哪些

產品名稱:C H O細胞
中文名稱:中國倉鼠卵巢細胞(C h i n e s e h a m s t e r o v a r y)
種屬倉鼠
組織來源 卵巢
生長狀態 貼壁生長
細胞形態 上皮樣
cH o細胞具有不死性，可以傳代百代以上
C H O細胞培養
1、培養條件：
培養基類型:D M E M(H y c l o ne S H30243.01)培養基
F B S(G l B C O 16000-044):10%
抗生素:雙抗
培養條件：37'C，C O2: 5%
2.傳代方法：
收到細胞後，在倒置顯微鏡觀察細胞生長狀態
如果沒長滿，將培養瓶用75%酒精消毒後在超凈台內更換新鮮培養液，繼續培養
如果細胞己經長滿(約80%-90%)則傳代後繼續培養
貼壁細胞傳代方法
1)棄去培養基，用不含鈣，鎂離子的P B S冼1-2次
2)加1m10.25%胰酶(含0.02%E D T A)，讓胰酸與大部分細胞接觸後放入37'C培養箱內，隨時觀察細胞狀態變化，待細胞大部分變圓後加完全培養基終止消化
懸浮細胞傳代方法可以直接傳他可以離心法傳代
1)直接傳化是讓懸浮細胞慢慢沉澱在瓶底後，將上清吸掉1/2-2/3，吹打細胞形成細胞懸液後，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養
2)離心法傳化是將細胞連同培養液一並轉移到離心管內，1000r p m，5分鍾，去除上清，加新的培養液到離心管內，吹打細胞形成細胞懸液後，分別接種到其他培養皿或培養瓶中繼續培養。
般沒有特殊說明，細胞一般是一傳二。
3)凍存方法
70%完全培養基，20%F B S，10%D M S O，現用現配。
儲存:液氮中長期保存。

『肆』 離子交換法的純化方法

若將離子交換法與其他純化水質方法(例如反滲透法、過濾法和活性碳吸附內法)組合應用時，則離子交容換法在整個純化系統中，將扮演非常重要的一個部分。離子交換法能有效的去除離子，卻無法有效的去除大部分的有機物或微生物。而微生物可附著在樹脂上，並以樹脂作為培養基，使得微生物可快速生長並產生熱源。因此，需配合其他的純化方法設計使用。

『伍』 曲妥珠單抗的葯理作用

曲妥珠單抗是抗體依賴的細胞介導的細胞毒反應（ADCC）的潛在介質。
在體外研究中，曲妥珠單抗介導的ADCC被證明在HER2過度表達的癌細胞中比HER2非過度表達的癌細胞中更優先產生。有需要的可以連系/盛康合醫療/ 即可~

『陸』 赫賽汀說明書

葯品概述
商品名： 赫賽汀 英文名：Herceptin 通用名：注射用曲妥珠單抗 英文名： Trastuzumab 赫賽汀（注射用曲妥珠單抗）——HER2過度表達的轉移性乳腺癌 ★重組DNA衍生的人源化單克隆抗體 ★可單葯使用,不良反應輕，耐受性好,可在門診治療 ★療效顯著，中位緩解時間長
[編輯本段]性狀
本葯每瓶含濃縮曲妥珠單抗粉末440 mg，為白色至淡黃色凍乾粉劑，配製成溶液後可供靜脈輸注。溶解後曲妥珠單抗的濃度為21 mg/mL。
溶劑
滅菌注射用水，含1.1%苯乙醇作為防腐劑，為無色液體。賦形劑 ：L-鹽酸組氨酸，L-組氨酸，α,α-雙羧海藻糖，聚氧乙烯山梨醇脂肪酸酯20。 臨床療效總結於下表。免疫原性 兩個主要試驗中，除2例病人外，其它病人均接受了抗體的檢測。只有1例病人體內檢測到曲妥珠單抗的抗體，但該病人未產生過敏症狀。
[編輯本段]葯理作用
曲妥珠單抗是一種重組DNA衍生的人源化單克隆抗體，選擇性地作用於人表皮生長因子受體-2(HER2)的細胞外部位。此抗體屬IgGl型，含人的框架區，及能與HER-2結合的鼠抗-p185 HER2抗體的互補決定區。 人源化的抗HER2抗體是由懸養於無菌培養基中的哺乳動物細胞(中CHO)產生的，用親合色譜法和離子交換法純化，包括特殊的病毒滅活的去除程序。國倉鼠卵巢細胞 HER2原癌基因或C-erbB2編碼一個單一的受體樣跨膜蛋白，分子量185kDa，其結構上與表皮生長因子受體相關。在原發性乳腺癌患者中觀察到有25%-30%的患者HER2過度表達。HER2基因擴增的結果是這些腫瘤細胞表面HER2蛋白表達增加，導致HER2受體活化。 研究表明，HER2過度表達的腫瘤患者較無過度表達的無病生存期短。HER2的過度表達可通過以下方法診斷：對腫瘤組織塊以免疫組化為基礎的評價法，組織或血漿樣品的ELISA法或熒光原位雜交法（FISH）。 曲妥珠單抗在體外及動物實驗中均顯示可抑制HER2過度表達的腫瘤細胞的增殖。另外，曲妥珠單抗是抗體依賴的細胞介導的細胞毒反應（ADCC）的潛在介質。在體外研究中，曲妥珠單抗介導的ADCC被證明在HER2過度表達的癌細胞中比HER2非過度表達的癌細胞中更優先產生。
臨床療效
本葯已被用於臨床試驗，作為單葯治療HER2過度表達的轉移性乳腺癌，這些患者曾接受過針對其轉移灶1個或1個以上化療方案化療而失敗。 本葯在臨床試驗中還與紫杉醇或蒽環類葯物（阿黴素或表阿黴素）加環磷醯胺合用作為一線葯物，治療HER2過度表達的轉移性乳腺癌。 既往未接受化療的轉移性乳腺癌用蒽環類葯物（阿黴素60 mg/m2或表阿黴素75 mg/m2 ）加環磷醯胺（600 mg/m2 ）加（本品+AC）或不加（單AC）本品治療。 以前接受過以蒽環類葯為基礎的輔助化療的病人用紫杉醇（175 mg/m2，3小時輸入）加（本品+P）或不加（單P）本葯治療。病人可用本葯治療直到病情進展。 臨床療效總結於下表。 免疫原性 兩個主要試驗中，除2例病人外，其它病人均接受了抗體的檢測。只有1例病人體內檢測到曲妥珠單抗的抗體，但該病人未產生過敏症狀。
葯代動力學
葯物清除 對轉移性乳腺癌的研究表明，短時間靜脈輸入10，50，100，250和500 mg 曲妥珠單抗每周1次的葯代動力學呈劑量依賴性。隨劑量水平的提高，平均半衰期延長，清除率下降。在臨床試驗中，使用了曲妥珠單抗4 mg/kg的首次負荷量和2 mg/kg每周維持量，觀察到其平均半衰期為5.8天（1-32天），在16-32周之間，曲妥珠單抗的血漿濃度達到穩定狀態，平均谷濃度約75 ug/mL。 特殊臨床情況下的葯物動力學 病人特性（如年齡，血漿肌酐濃度）對曲妥珠單抗分布的影響也進行了評價。數據顯示，曲妥珠單抗的體內分布在不同亞群病人中均無變化。
適應症
適用於治療HER2過度表達的轉移性乳腺癌 ：作為單一葯物治療已接受過1個或多個化療方案的轉移性乳腺癌 ；與紫杉類葯物合用治療未接受過化療的轉移性乳腺癌。
用法用量
作為單一葯物或與其它化療葯合用時建議按下列初次負荷量和維持量給葯。 初次負荷劑量 ：建議初次負荷量為4 mg/kg，90分鍾內靜脈輸入。應觀察病人是否出現發熱，寒戰或其它輸注相關症狀。停止輸注可控制這些症狀，待症狀消失後可繼續輸注。 維持劑量 ：建議每周用量為2 mg/kg。如初次負荷量可耐受，則此劑量可於30分鍾內輸完。 請勿靜推或靜脈沖入。 療程 本葯可一直用到疾病進展。根據國外市場調查資料顯示：接受治療的患者平均約連續使用24至26周 減量 臨床試驗中未減量使用過本葯。在可逆的化療導致的骨髓抑制過程中患者仍可繼續使用，是否減少或持續使用化療葯劑量需特別指導。 特殊患者 ：數據顯示不同年齡或血漿肌酐濃度對本葯的分布無影響。臨床試驗中，年老患者並未減量使用。
[編輯本段]不良反應
所有不良事件的數據均由臨床試驗得到，本葯均按推薦劑量單葯或與化療葯（蒽環類[阿黴素或表阿黴素]加環磷醯胺或紫杉醇）合用。
單獨使用赫賽汀
有HER2過度表達的轉移癌患者，已對進行過1或多個方案化療無效者單獨使用本葯。 213例患者，下列不良反應發生率≥ (greater than or equal to) 5% ： 整體 ：腹痛，意外損傷，乏力，背痛，胸痛，寒戰，發熱，感冒樣症狀，頭痛，感染，頸痛，疼痛。 心血管 ：血管擴張。 消化 ：厭食，便秘，腹瀉，消化不良，胃腸脹氣，嘔吐和惡心。 代謝 ：周圍水腫，水腫。 肌肉骨骼 ：關節痛，肌肉疼痛。 神經系統 ：焦慮，抑鬱，眩暈，失眠，感覺異常，嗜睡。 呼吸 ：哮喘，咳嗽增多，呼吸困難，鼻出血，肺部疾病，胸腔積液，咽炎，鼻炎，鼻竇炎。 皮膚 ：瘙癢，皮疹。 輸液相關症狀 ：第一次輸注本葯時，約40%患者會出現通常包括寒戰和/或發熱等的癥候群。這些症狀一般為輕或中度，很少需停用，可用解熱鎮痛葯如對乙醯氨基酚或抗組織胺葯如苯海拉明治療。其它症狀和/或體征包括：惡心，嘔吐，疼痛，寒戰，頭痛，眩暈，呼吸困難，低血壓，皮疹和乏力。這些症狀在以後的輸入本葯過程中很少出現。 心臟毒性 ：臨床試驗中觀察到使用本葯治療的患者中有心功能不全的表現。在單獨使用赫賽汀治療的患者中，中至重度心功能不全（NTHA分級III / IV）的發生率為5%。 血液毒性 ：單獨使用本葯治療的患者中，血液學毒性反應很少出現。WHO分級III級的白細胞減少，血小板減少和貧血的發生率<1%。未見WHO IV級的血液學毒性反應。 肝腎毒性 ：在單獨使用本葯治療的患者中觀察到有12%發生了WHO III或IV級肝毒性反應，60%的患者其肝毒性與肝轉移瘤進展相關，未見WHO III或IV級腎毒性反應。 腹瀉 ：單獨使用本葯治療的患者中27%發生腹瀉。
赫賽汀與其它化療葯合用
兩種化療方案加或不加赫賽汀被用於HER2過度表達的轉移乳腺癌患者，他們以前均未接受過針對轉移灶的治療。一種蒽環類葯（阿黴素或表阿黴素）加環磷醯胺（AC）；或紫杉醇，兩種化療方案的不良反應發生率≥ (greater than or equal to) 10%，且本葯加化療組明顯高於單用化療組的不良反應（P≤ (smaller than or equal to) 0.05），見下表 ： 心臟毒性 ：臨床實驗中觀察到本葯治療的患者中有心功能不全的表現。 在隨機臨床試驗中，中至重度的心功能不全（NYHA III/IV級）的發生率在本葯加一種蒽環類葯（阿黴素或表阿黴素）加環磷醯胺治療的患者中為16%，而用蒽環類/環磷醯胺合用不加赫賽汀治療的患者中發生率僅為3%。 中至重度的心功能不全（NYHA III/IV級）的發生率在用赫賽汀加紫杉醇治療患者中為2%，而紫杉醇單葯組為1%。 血液毒性 ：WHO III或IV級血液毒性在用赫賽汀加蒽環類葯物和環磷醯胺治療組患者中的發生率為63%，蒽環/環磷醯胺合用治療組為62%。 WHO III或IV級血液毒性在赫賽汀和紫杉醇合用組的發生率比僅紫杉醇組高（34%對21%）。這一結果很可能是由於赫賽汀+紫杉醇組腫瘤進展時間比紫杉醇單葯組長，導致該組病人接受更高總劑量的紫杉醇）。 肝腎毒性 ：WHO III或IV級肝毒性在赫賽汀加蒽環類葯加環磷醯胺治療組患者中的發生率為6%，而蒽環類葯/環磷醯胺聯合不加赫賽汀組的發生率為8%，未見WHO III或IV級腎毒性反應。 WHO III或IV級肝毒性在赫賽汀加紫杉醇治療組的發生率低於單用紫杉醇組（7%比15%）。未見WHO III或IV級腎毒性反應。 腹瀉 ：一般輕至中度，其發生率在赫賽汀加化療葯組（一種蒽環類葯加環磷醯胺或紫杉醇）比單用化療葯組高。 感染 ：一般為輕度、臨床症狀很少的上呼吸道感染或導管感染，其發生率在赫賽汀加化療葯組（一種蒽環加環磷醯胺或紫杉醇）比單用化療葯組高。 嚴重不良反應 ：在這兩個關鍵的臨床試驗中，在使用赫賽汀單獨治療或赫賽汀與化療葯合用（一種蒽環[阿黴素或表阿黴素]加環磷醯胺，或紫杉醇）治療的患者中至少發生過1次。 整體 ：過敏反應，過敏樣反應，腹水，惡性腫瘤，蜂窩織炎，粘膜疾病，不能評價的反應，膿毒症，猝死。 心血管 ：房顫，心肌病，深部血栓性靜脈炎，心力衰竭，肺栓塞，血栓形成。 消化 ：吞咽困難，食道潰瘍，嘔血，肝炎，肝功能衰竭，肝腫大，回腸、小腸梗阻，黃疸，肝損害，肝觸痛。 血液和淋巴 ：急性白血病，貧血，骨髓抑制，髓系細胞成熟障礙，全血細胞減少。 代謝 ：高鈣血症，高血糖。 肌肉骨骼 ：骨壞死，骨折。 精神 ：焦慮，精神錯亂，驚厥，神經病變，思維異常。 呼吸 ：窒息，哮喘，肺疾病，氣胸，胸腔積液，肺炎。 泌尿生殖 ：急性腎功能衰竭，腎積水。 特殊感官 ：耳聾，視網膜動脈阻塞。
禁忌症
對曲妥珠單抗或其它成分過敏的患者禁止使用。
注意事項
本葯治療必須在治療癌症方面很有經驗的內科醫生的監測下開始進行。 在使用本葯治療的患者中觀察到有心臟功能減退的症狀和體征，如呼吸困難，咳嗽增加，夜間陣發性呼吸困難，周圍性水腫，S3奔馬律或射血分數減低。與赫賽汀治療相關的充血性心衰可能相當嚴重，並可引起致命性心衰、死亡、粘液栓子腦栓塞。特別在赫賽汀與蒽環類葯（阿黴素或表阿黴素）和環磷醯胺合用治療轉移乳腺癌的患者中，觀察到中至重度的心功能減退（紐約心臟學會（NYHA）分級的III/IV）。 在治療前就有心功能不全的患者需特別小心。選擇使用本葯治療的患者應進行全面的基礎心臟評價，包括病史，物理檢查和以下一或多項檢查：EKG，超聲心動圖，MUGA掃描。目前尚無數據顯示有合適的評價方法可確定病人有發生心臟毒性危險。在本葯治療過程中，左室功能應經常評估。若患者出現臨床顯著的左室功能減退應考慮停用赫賽汀。監測並不能全部發現將發生心功能減退的患者。 約2/3有心功能減退的患者因有症狀被治療，大多數治療後症狀好轉。治療通常包括利尿葯，強心苷類葯和/或血管緊張素轉換酶抑制劑類葯。 絕大多數用本葯治療臨床有效的有心臟症狀和表現的患者繼續每周使用赫賽汀，並未產生更多的臨床心臟情況。 在滅菌注射水中，苯乙醇作為防腐劑，它對新生兒和3歲以下的兒童有毒性。當本葯用於已知對苯乙醇過敏的病人時，應用注射用水重新配製。
孕婦及哺乳期婦女用葯
生殖研究在Cynomolgus猴子中進行，當劑量給至人每周維持劑量（2 mg/kg）的25倍時，未見明顯生育力缺陷或對胎兒有害。在發育早期（孕20-50天）和晚期（孕120-150天）均觀察到曲妥珠單抗經胎盤傳送入胎兒。赫賽汀用於妊娠婦女是否會引起胎兒損害及是否會影響生殖能力目前尚不清楚。鑒於動物生殖研究結果並不能預示人類的反應，赫賽汀應不用於孕期婦女，除非對孕婦的潛在好處遠大於對胎兒的潛在危險。 哺乳期婦女 ：哺乳期cynomolgus猴子用25倍人每周維持量赫賽汀（2 mg/kg）進行研究，顯示曲妥珠單抗可分泌到乳汁里。出生3月內，幼猴血中存在曲妥珠單抗對其生長發育無任何不利影響。目前尚不知曲妥珠單抗是否可分泌於人的乳汁中，由於人的IgG可分泌到乳中且曲妥珠單抗對嬰幼兒的潛在危害並不知道，因此赫賽汀治療期間應避免母乳喂養。
兒童用葯
小於18歲患者使用本葯的安全性和療效尚未確立。
[編輯本段]葯物相互作用
無正式的本葯在人體內與其它葯物相互作用的研究。未觀察到臨床試驗中與其共同使用的葯物有臨床明顯的相互作用。
葯物過量
人體臨床試驗中未使用過過量赫賽汀。未嘗試用過單劑量>10 mg/kg。
用葯須知
輸液准備 應採用正確的無菌操作。每瓶赫賽汀應由同時配送的20 mL滅菌注射用水衡釋，配好的溶液可多次使用，其曲妥珠單抗的濃度為21 mg/mL，pH 值約6.0。 配製成的溶液為無色至淡黃色的透明液體。 注射用水（非同時配送）也可以用於單劑量輸液准備。其它液體不能用於配製溶液。 根據曲妥珠單抗初次負荷量4 mg/kg或維持量2 mg/kg計算所需溶液的體積 ： 所需溶液的體積=體重（Kg）x 劑量（4 mg/Kg負荷量或2 mg/Kg維持量）/ 21（mg/mL，配置好溶液的濃度） 所需的溶液量從小瓶中吸出後加入250 mL 0.9% NaCl輸液袋中，5%的葡萄糖液不可使用。輸液袋輕輕翻轉混勻，防止氣泡產生。所有腸外用葯均應在使用前肉眼觀察有無顆粒產生或變色。一旦輸注液配好即應馬上使用。如果在無菌條件下稀釋的，可在2-8°C冰箱中保存24小時。 配伍禁忌 使用聚氯乙烯或聚乙烯袋未觀察到赫賽汀失效。 5%的葡萄糖溶液不能使用，因其可使蛋白凝固。 赫賽汀不可與其它葯混合或稀釋。
貯藏/有效期
2-8°C下貯存。 本葯用配套提供的注射用滅菌水溶解後在2-8°C冰箱中可穩定保存28天。配好的溶液中含防腐劑，因此可多次使用。28天後剩餘的溶液應棄去。 如果注射用水中不含防腐劑，則配好的赫賽汀溶液應該馬上使用。 不要把配的的溶液冷凍起來。 含0.9%NaCl的配好的赫賽汀輸注液，可在聚氯乙烯或聚乙烯袋中2-8°C條件下穩定保存24小時。30°C條件下，稀釋後的赫賽汀液最長可穩定保存24小時。但由於稀釋後的赫賽汀不含有效濃度的防腐劑，配置和稀釋後溶液最好還是保存在2-8°C冰箱內。從微生物學角度看赫賽汀輸注液應馬上使用。除非稀釋是在嚴格控制和證實為無菌條件下進行的，否則稀釋後的溶液不能保存。

『柒』 CHO細胞的特性

CHO細胞特性：
CHO細胞雖可像微生物細胞一樣，在人工控制條件的生物反應器中進行大規模培養，但其細胞結構和培養特性與微生物細胞相比，有顯著差別： 動物細胞比微生物細胞大得多，無細胞壁，機械強度低，對剪切力敏感，適應環境能力差；倍增時間長，生長緩慢，易受微生物污染，培養時須用抗生素；培養過程需氧量少(氧傳質系數kLa 大於10 h-1即可滿足每毫升107 個細胞的生長)；培養過程中細胞相互粘連以集群形式存在；原代培養細胞一般繁殖50 代即退化死亡；代謝產物具有生物活性，生產成本高，但附加值也高。

(Chinese Hamster Ovary，CHO) 中國倉鼠卵巢細胞
1957年美國科羅拉多大學Dr. Theodore T. Puck從一成年雌性倉鼠卵巢分離獲得，為上皮貼壁型細胞，是生物工程上廣泛使用的細胞系。
該細胞具有不死性，可以傳代百代以上，是生物工程上廣泛使用的細胞。另外CH0細胞在基因工程使用中還有一個優點，該細胞屬於成纖維細胞(fibroblast)，是一種非分泌型細胞，它本身很少分泌CHO內源蛋白，因此對目標蛋白分離純化工作十分有利。可形成有活性的二聚體(如白介素2)，具有糖基化的功能(如EPO)，CHO為表達復雜生物大分子的理想宿主。
由於該細胞存在遺傳缺陷，無脯氨酸合成基因，不能將谷氨酸轉變為谷氨酸--半醛，培養過程中需在培養基中添加L-脯氨酸才能生長。並且由於該細胞已經霍亂毒素適應，形態學有所改變。最初細胞為貼壁型細胞，經多次傳代篩選後，也可懸浮生長。
工業生產上應用較多的是CHO-K1細胞，為轉化細胞系，細胞染色體分布頻率是2n=22，系亞二倍體細胞。ATCC保存CHO-K1細胞株，編號為CCL-61，被廣泛地用於重組DNA蛋白的表達。

『捌』 關於CHO細胞的培養方法

CHO細胞（中國倉鼠卵巢細胞）培養方法（正統法）
CHO細胞（中國倉鼠卵巢細胞）培養方法（正統法）

※准備
�9�9DMEM培養基
�9�9PBS(-)
�9�9Trypsin（0.25％）
�9�9MTX（100μM）
�9�9移液管
�9�9自動移液槍
�9�9廢液缸
※培養基量
25c㎡�9�9‥‥5ｍl
75c㎡�9�9‥‥10ｍl
※操作順序
①把培養瓶內的培養基用5ml的移液管轉移到保存用的離心管里。
②用培養液量的1/2的PBS（25ml‥2.5ml）清洗細胞表面（2次）。
③再用培養液量的1/10的（25ml‥0.5ml）的胰酶沖洗細胞表面
④再CO2培養廂里靜置5分鍾。（利用這段時間，准備好15ml的大離心管，並也好標簽做好記號。）
⑤物理方法處理，（敲擊培養瓶兩側）是細胞脫離，再用顯微鏡確認是否完全脫離。
⑥加入等倍量的（25ml‥5ml）培養基，充分沖洗培養瓶內表面，在連同細胞全部轉移到大離心管中。
⑦離心分離（1,000rpm、4℃、10min）。（這段時間准備新的培養瓶，按照9/10的量（25ml‥4.5ml），加入培養液准備好。加入MTX的同時加入。）：50nMMTX:2.5ulof100uM/final5ml培養液（這期間，要在培養瓶表面寫上細胞培養的諸多條件和細胞的種類等等。）
⑧離心分離後，為了避免沉澱細胞擴散到溶液里，要迅速將上清用吸管吸除。
⑨加入培養液(DMEM+FBS,25ml‥5ml)，用移液管充分混勻細胞。
⑩按1/10量，（25ml‥0.5ml）將細胞懸濁液注入新培養瓶中。
�7�6在CO2培養廂中37度條件下培養。培養液總量為5ｍｌ
註：使用的移液管為培養專用玻璃移液管，在上面吸口處，塞上棉花經過乾熱滅菌的。乾熱條件：180℃、3小時。

CHO細胞培養：
CHO細胞株置於RPMI1640培養基中，內含10%滅活小牛血清，青黴素100IU/mL，鏈黴素100IU/mL，置於37℃，5%CO2的培養箱（德國Heraeus）中培養。每隔48h換培液，當單層培養細胞匯合以後，用0.25%胰蛋白酶消化，傳代培養。將培養瓶中的CHO細胞按1×105/mL傳代移入培養板中，待進入對數生長期後（約24h）加葯。
這是細胞的供給源:
CHO細胞由中科院上海生物化學和細胞生物學研究所提供。
這是我對此細胞的看法:
1.CHO細胞主要來源於中華倉鼠卵巢細胞.
2.與3T3(鼠纖維細胞)293(HEK)COS(猴腎細胞)HepG2(人肝細胞)C2C12(鼠肌細胞)Hl5(昆蟲)AFT024(鼠基質細胞)一起,是重組DNA的主要載體細胞,常見於基因工程.
3.培養基可有多種選擇,一般用RPMI1640培養基或DMEM培養基.

『玖』 生產EPO的CHO細胞是什麼細胞全稱是什麼

CHO細胞， 中國倉鼠卵巢細胞，英文Chinese Hamster Ovary
1、CHO細胞簡介
1957年美國科羅拉多大學Dr. Theodore T. Puck從一成年雌性倉鼠卵巢分離獲得，為上皮貼壁型細胞，是生物工程上廣泛使用的細胞系。
該細胞具有不死性，可以傳代百代以上，是生物工程上廣泛使用的細胞。另外CH0細胞在基因工程使用中還有一個優點，該細胞屬於成纖維細胞(fibroblast)，是一種非分泌型細胞，它本身很少分泌CHO內源蛋白，因此對目標蛋白分離純化工作十分有利。可形成有活性的二聚體(如白介素2)，具有糖基化的功能(如EPO)，CHO為表達復雜生物大分子的理想宿主。
由於該細胞存在遺傳缺陷，無脯氨酸合成基因，不能將谷氨酸轉變為谷氨酸--半醛，培養過程中需在培養基中添加L-脯氨酸才能生長。並且由於該細胞已經霍亂毒素適應，形態學有所改變。最初細胞為貼壁型細胞，經多次傳代篩選後，也可懸浮生長。
工業生產上應用較多的是CHO-K1細胞，為轉化細胞系，細胞染色體分布頻率是2n=22，系亞二倍體細胞。ATCC保存CHO-K1細胞株，編號為CCL-61，被廣泛地用於重組DNA蛋白的表達。
2、EPO
EPO是促紅細胞生成素（Erythropoietin）的英文簡稱。人體中的促紅細胞生成素是由腎臟和肝臟分泌的一種激素樣物質，能夠促進紅細胞生成。服用紅細胞生成素可以使患腎病貧血的病人增加血流比溶度（即增加血液中紅細胞百分比）。去年以來，這種葯物已進入商業市場。人體缺氧時，此種激素生成增加，並導致紅細胞增生。EPO興奮劑正是根據促紅細胞生成素的原理人工合成，它能促進肌肉中氧氣生成，從而使肌肉更有勁、工作時間更長。

『拾』 cho細胞是什麼

CHO細胞Chinese hamster ovary cell;C.HU co l一個轉化細胞系，1957年從中國倉鼠卵巢細胞得到。

廣泛採用的K，亞克隆株需要脯氨酸，因為遺傳學上有缺陷，不能將谷氨酸轉變為谷氨酸一Y一半醛。該細胞是上皮樣細胞，通常貼壁生長、也可懸浮生長。CHO細胞被廣泛地用來表達重組DNA的蛋白。

CHO細胞簡介

CH0細胞在基因工程使用中還有一個優點，該細胞屬於成纖維細胞(fibroblast)，是一種非分泌型細胞，它本身很少分泌CHO內源蛋白，因此對目標蛋白分離純化工作十分有利。可形成有活性的二聚體(如白介素2)，具有糖基化的功能(如EPO)，CHO為表達復雜生物大分子的理想宿主。

工業生產上應用較多的是CHO-K1細胞，為轉化細胞系，細胞染色體分布頻率是2n=22，系亞二倍體細胞。ATCC保存CHO-K1細胞株，編號為CCL-61，被廣泛地用於重組DNA蛋白的表達。

以上內容參考：網路-CHO細胞