❶ 用western檢測真核表達的帶有flag標簽的融合蛋白時,能用目的蛋白本身的抗體進行檢測,但用flag抗體確無法
看你的flag抗體是否有問題,我是做抗體生產的,原來開發flag抗體時就會對其進行C端、N端、M端的Qc檢測,正常情況下三端都需要有識別,我擔心你的抗flag抗體有可能不識別N端,還有一種可能就是你的融合蛋白不含flag標簽。你可以從這兩個方面入手解決,至於你運用什麼實驗設計,我想你應該完全沒問題。預祝你能夠順利解決此疑問。
❷ rhTNFR:Fc中,為什麼要用融合蛋白單單用受體或是抗體不行嗎CD120b是什麼意思
那個是rhTNFR-Fc吧。。。為什麼用重組人腫瘤壞死因子受體-Fc融合蛋白說實話我也不清楚,我簡單查了查,應該是蛋白能為細胞生長提供能量吧,看你干什麼用了,如果做細胞試驗用蛋白可以增加細胞培養周期,你要是干別的可能就用不著了吧,得看你目的是什麼了
至於CD120b貌似是一種蛋白的編號。。。
❸ fc融合蛋白為什麼能coat細胞培養板上
免疫球蛋白(Ig)融合蛋白免疫球蛋白融合蛋白是指在基因水平將目的基因同Ig部分片段基因相連,並在真核或原核細胞中表達出的具有上述兩部分結構域的重組蛋白。據目的蛋白與Ig不同片斷相連,可將其分為二大類:一類為Fab(Fv)融合蛋白;另一類為Fc融合蛋白。甲狀旁腺激素(PTH)融合蛋白甲狀旁腺激素(ParathyroidHormone,PTH)是由甲狀旁腺主細胞合成和分泌的一種單鏈多肽激素,成熟PTH含84個氨基酸殘基,分子量約為9500,是人體內調節鈣磷代謝及骨轉換的最為重要的激素之一。它主要通過作用於靶細胞膜上腺苷酸環化酶系統,增加胞漿內cAMP及焦磷酸鹽(PPi)的水平來發揮作用。細胞因子重組融合蛋白細胞因子重組融合蛋白是一類利用基因工程的方法將編碼細胞因子和其他有特定功能的蛋白分子基因序列連接並表達相應蛋白質融合產物。其結構特點為將細胞因子功能活性域與其他分子的活性域融合,各組分可發揮協同作用,使融合蛋白的生物學活性較各單體大大增強。
❹ 怎麼預測fc融合蛋白的分子量 expasy
首先進ncbi的主頁,主頁半年前改版了現在更人性化。在搜索框(很大的那個)裡面輸入要搜索的內容,比如你的『E.Coli BL21 DNA Ligase 』,搜索框上面有個search選項,下拉菜單選擇「protein」,點search,搜索會返回一個結果,就是你那個蛋白的信息了。Chain A, Last Stop On The Road To Repair: Structure Of E.Coli Dna Ligase Bound To Nicked Dna-Adenylate
信息全在下面,最後那個是蛋白質序列,相對分子量就可以用別的計算方法算出來了。如果這個蛋白有人做了晶體結構,會在右邊顯示,很方便。
❺ 白血病檢測融合基因多少為正常
融合蛋白有兩種不同的含義,一種是通過DNA重組技術得到的兩個基因重組後的表達產物。另一種含義就是介導兩個細胞質膜融合的一組蛋白,如在仙台病毒脂雙層外側小葉中含有的兩種糖蛋白之一,介導病毒被膜與宿主細胞質膜的融合作用。另一種糖蛋白是血細胞凝集素神經醯胺酶。
檢查不同,數值也不相同,那麼意義就存在了差別。
❻ 蛋白質放置一段時間後,形成二聚體,用什麼方法檢測
蛋白質放置一段時間後,形成二聚體,用什麼方法檢測
融合蛋白(fusion protein)有兩種不同的含義,一種是通過DNA重組技術得到的兩個基因重組後的表達產物。另一種含義就是介導兩個細胞質膜融合的一組蛋白,如在仙台病毒脂雙層外側小葉中含有的兩種糖蛋白之一,介導病毒被膜與宿主細胞質膜的融合作用。另一種糖蛋白是血細胞凝集素神經醯胺酶。 兩個不同的蛋白質連成一個大分子。可以通過化學方法連接,也可通過基因的融合來實現。
❼ GST融合蛋白試驗中為什麼要保留沉澱
因為雖說GST適合於可溶分泌性蛋白的純化,但是有些蛋白是包涵體形式的,你必須要保留沉澱,細胞破碎後收集蛋白,再做蛋白復性然後純化。
即使是分泌性蛋白,也可保留沉澱當做對照,檢測蛋白殘留量等
❽ 離子交換層析和親和層析都可以用來分離所有的蛋白質嗎哪種的效果更好
這個你問的太籠統了,方法沒有最好的,只有最合適的
蛋白的分離純化無非是利用版目標蛋白和權別的蛋白不同進行分離,這包括分子量大小,電荷,極性等特性的不同,此外包括別的特性,特別是酶例如酶需要輔酶象蘋果酸 脫氫酶,或者底物,酶抑制劑,金屬離子等,那相對應的純化方法有凝膠過濾,離子交換,疏水層析,後面的可以分別把底物,酶抑制劑,金屬離子偶聯或鰲合到介質上做親和介質,而象果酸脫氫酶也可以用染料親和的辦法,因為染料的結構和NAD類似。糖蛋白可以用凝集素親和或者苯硼酸瓊脂糖親和分離等方法,總之要盡 量多知道目標蛋白的特性和了解各種分離的手段,就很容易找到最有效的分離純化的方法。
❾ 抗體fc融合蛋白怎麼具有靶向性
融合蛋白(fusion protein)有兩種不同的含義,一種是通過DNA重組技術得到的兩個基因重組後的表達產物,另一種是介導兩個細胞質膜融合的一組蛋白,如在仙台病毒脂雙層外側小葉中含有的兩種糖蛋白之一,介導病毒被膜與宿主細胞質膜的融合作用。另一種糖蛋白是血細胞凝集素神經醯胺酶。 兩個不同的蛋白質既可以通過化學方法也可以通過基因的融合來連成一個大分子。