1. 大孔樹脂富集層析柱怎麼選擇
層析柱是凝膠層析技術中的主體，我們研究所用的就是同興玻璃儀器，一般用玻璃管或有機玻璃管。根據樣品混合物中各組分在固定相和流動相中分配系數不同，從而分離的一種層析法。 層析柱是凝膠層析技術中的主體，一般用玻璃管或有機玻璃管。層析柱的直徑大小不影響分離度，樣品用量大，可加大柱的直徑，一般制備用凝膠柱，直徑大於2厘米，但在加樣時應將樣品均勻分布於凝膠柱床面上。
2. D101大孔樹脂怎麼裝柱
3．操作方法〔1～3〕：
3.1．裝柱：將D101大孔吸附樹脂用丙酮浸泡過夜(大約15～18h)，用水浴迴流8h，過濾(或抽濾)，用水洗至溶液：水(1∶2)不產生混濁為止，浸泡在水中，再進行裝柱，並在柱頂加少量氧化鋁，製成預處理柱，備用。
3.2．樣品預處理：精密吸取樣品5ml(固體樣品製成相當濃度的溶液)，加入已處理好的D101大孔樹脂層析柱中，用100ml水洗脫(含蔗糖樣品用300ml水)，洗液棄去(流速1.5ml／min)。再以原流速用30ml無水乙醇分次洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘渣用無水乙醇溶解，定量轉移至5ml容量瓶中，稀釋至刻度，作為供試品溶液。
3.3．標准曲線制備：精密吸取絞股藍皂甙標准液0、20、40、60、80μl，於10ml具塞試管中，在水浴上揮干溶劑，精密加入5%香草醛冰醋酸溶液0.5ml，高氯酸1.5ml，混勻。於60℃水浴上加熱15～20min，冰水浴冷卻，加入5.0ml冰醋酸，搖勻，以相應的試劑為空白，於545nm處比色測吸光度。
3.4．樣品測定：精密吸取供試品溶液100μl，置具塞試管中，按3.3．項下方法進行，測出吸光度，從標准曲線上讀出供試品溶液中絞股藍皂甙的重量。
3. 急求：離子交換柱層析分離氨基酸的講義
一、目的
學慣用陽離子交換樹脂柱分離氦基酸的操作方法和基本原理.
二、原理
各種氨基酸分子的結構不同,在同一PH時與離子交換樹脂的親和力有差異,因此可依親和力從小到大的順序被洗脫液洗脫下來,達到分離的效果.
三、器材
1、20cmX 1cm層析管 2、試管
3、吸管． 4、恆壓洗脫瓶
5、部分收集器 6、搪磁杯
7、電爐 8、分光光度計
四、試劑和材料
1、．苯乙烯磺酸鈉型樹脂（強酸 lx 8,l00一200目,可用上海華東化工學院產品）
2 、2 mol／L鹽酸溶液
3、2mol／L氫氧化鈉溶液
4、標准氨基酸溶液 天冬氨酸、賴氨酸和組氨酸均配製成 2 mg／mL的0.1M鹽酸溶液.
5、混合氫基酸溶液將上述天冬氨酸、賴氨酸和組氨酸溶液按1：2．5：10的比例混合.
6、檸檬酸－氫氧化鈉一鹽酸沖液（pH5.8）,鈉離子濃度0 .45M）
取檸檬酸（C6O7H8.H20 ）14.25g、氫氧化鈉9.30g和 濃鹽酸 5．25 mL溶於少量水後,定容至 500 mL,冰箱保存.
7、顯色劑 2 g水合茚三酮溶於 75mL乙二醇單甲醚中．加水至 100 mL.
8、50%乙醇水溶液
五、操作
1、層析柱的准備：將強酸型陽離子交換樹脂用氫氧化鈉處理成Na+型後洗至中性（處理方法見第三篇實驗十二）．攪拌一小時後裝成一個直徑1cm．高 16～18 cm的層析柱.
2、氨基酸的洗脫：用P H5.8的檸檬酸緩沖液流洗平衡交換住（裝置如圖）.調節流速為 0.5 mL／min,流出液達床體積的4倍時即可上樣.由柱上端仔細加人氨基酸混合液0．25—0．5 mL,同時開始收集流出液.當樣品液彎月面靠近樹脂頂端時,即刻加入0.5 mL擰檬酸緩沖液沖洗加樣品處.待緩沖液彎月面靠近樹脂頂端時.再加入0．5 mL緩沖液.如此重復兩次,然後用滴管小心注入檸檬酸緩沖液（切勿攪動床面）,並將柱與洗脫瓶和部分收集器相連.開始用試管收集洗脫液,每管收集lmL．共收集60一80管.
3、氨基酸的鑒定：向各管收集液中加lmL水合茚三酮顯色劑並混勻,在沸水浴中淮確加熱15分鍾後冷卻至室溫．再加15 mL的50％乙醇液.放置10分鍾.以收集液第2管為空白,測定A570nm波長的光吸收值.以光吸收值為縱坐標,以柱洗脫體積為橫坐標繪制洗脫曲線.以已知3種氨基酸的純溶液為樣品,按上述方法和條件分別操作,將得到的洗脫曲線與混合氨基酸的洗脫曲線對照．可確定3個峰的大致位置及各蜂為何種氨基酸.
4. 皂苷的檢測方法
本方法適用於功能性食品中總皂苷的測定
本方法人參皂苷Re的低檢出量為2μg/mL
一、方法提要
樣品中總皂苷經提取、PT—大孔吸附樹脂柱預分離後，在酸性條件下，香草醛與人參皂苷生成有色化合物，以人參皂苷Re為對照品，於560nm處比色測定。
二、儀器
1.722分光光度計。
2.PT—大孔吸附樹脂柱(河北省津楊濾材廠)。
3.超聲波振盪器。
三、試劑
1.甲醇(分析純)
2.乙醇(分析純)
3.人參皂苷Re標准品(中國葯品生物製品檢定所)
4.5%香草醛溶液：稱取5g香草醛，加冰乙酸溶解並定容至l00mL
5.高氯酸(分析純)
6.冰乙酸(分析純)
7.人參皂苷Re標准溶液：稱取人參皂苷Re標准品20.0mg，用甲醇溶解並定容至10mL，即每1mL含人參皂苷Re2.0mg
8.重蒸水
四、測定步驟
1.樣品處理：
(1)固體樣品
稱取1.0g左右樣品於100mL燒杯中，加入20～40mL 85%乙醇，超聲波振盪30min，再定容至50mL，搖勻，放置，吸取上清液1.0mL揮干後以水溶解殘渣，進行柱分離
(2)液體樣品
含乙醇的酒類樣品：准確吸取1.0mL樣品放於蒸發皿中，蒸干，用水溶解殘渣，用此液進行柱層析；非乙醇類液體樣品：准確吸取1.0mL樣品(如濃度高或顏色深，需稀釋一定體積後再取1.0mL)直接進行柱分離
2.柱層析
以PT—大孔吸附樹脂柱進行層析分離，准確吸取上述已處理好的樣品溶液1.0mL上柱，用15mL水洗柱，以洗去糖分等水溶性雜質，棄去洗脫液，再用20mL85%乙醇洗脫總皂苷，收集洗脫液於蒸發皿中，於水浴上蒸干，以此作顯色用
5. 大孔吸附樹脂與硅膠柱的原理
大孔吸附樹脂是一類不含交換基團且有大孔結構的高分子吸附樹脂，具有良好的大孔網狀結內構和較大的容比表面積，可以通過物理吸附從水溶液中有選擇地吸附有機物即非極性或極性較弱的物質，具有物理化學穩定性高、比表面積大、吸附容量大、選擇性好、吸附速度快、解吸條件溫和、再生處理方便、使用周期長、宜於構成閉路循環、節省費用等諸多優點。樹脂吸附作用是依靠它和被吸附的分子(吸附質) 之間的范德華引力,通過它巨大的比表面進行物理吸附而工作,使有機化合物根據有吸附力及其分子量大小可以經一定溶劑洗脫分開而達到分離、純化、除雜、濃縮等不同目的。
硅膠柱的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而得到分離， 一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附，極性較弱的物質不易被硅膠吸附，整個層析過程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸過程。其中有微孔，對不同化合物的吸附能力不同，然後選用適當的洗脫劑進行洗脫從而達到分離。