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抗體半透膜

發布時間:2022-09-27 23:41:55

Ⅰ 過敏的抗體為什麼分布在皮膚表面而不是血清中

當機體產生過敏反應的時候,毛細血管壁通透性會增加,導致正常狀態下應該存在與血清中的抗體存在於皮膚表面等部位。這些生物課本上面都有的。

Ⅱ 天生就有肝病抗體免疫力嗎

病情分析:
您好,沒有人生來就有乙肝抗體,而且也不會從母體獲得.有兩種獲得抗體的途徑1,在與乙肝的接觸中,由於本身的免疫力較好,或是乙肝病毒的毒力低,數量少,被傳染上乙肝病毒,但是沒有表現乙肝的臨床症狀,自身體內產生了抗體.2,就是通過疫苗的接種,被動獲得乙肝抗體. 值得強調的是乙肝抗體是不會通過母體得到的,因為母親在懷孕期間與胎兒的物質交流都要通過胎盤,乙肝抗體是種大分子物質,根本無法透過半透膜.

Ⅲ 大量單克隆抗體的制備方法

目前制備大量單克隆抗體的方法主要有兩種:一種是動物體內誘生法;另一種是體外培養法。

背景

BACKGROUND

無血清培養(serum free medium,SFM)的實質就是有針對性地使用添加劑來代替血清,維持雜交瘤細胞在體外的生長。採用無血清培養基培養雜交瘤細胞制備單克隆抗體,便於抗體純化,有利於規模化、標准化生產,同時降低細胞污染的概率。但無血清培養的細胞新陳代謝較弱,同時無血清培養基缺乏血清中保護細胞免受環境機械損傷的細胞因子等。盡管如此,隨著無血清培養基的不斷優化、完善,最終無血清培養基肯定會成為理想的雜瘤細胞培養基。

Ⅳ 我又沒得過乙肝病,怎麼有抗體.

沒有人生來就有乙肝抗體,而且也不會從母體獲得.有兩種獲得抗體的途徑1,在與乙肝的接觸中,由於本身的免疫力較好,或是乙肝病毒的毒力低,數量少,被傳染上乙肝病毒,但是沒有表現乙肝的臨床症狀,自身體內產生了抗體.2,就是通過疫苗的接種,被動獲得乙肝抗體.
值得強調的是乙肝抗體是不會通過母體得到的,因為母親在懷孕期間與胎兒的物質交流都要通過胎盤,乙肝抗體是種大分子物質,根本無法透過半透膜.

Ⅳ 高中生物知識點總結大全

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生物高考必背知識點總結

高中生物易錯知識點

高考生物知識點總結

1.基因重組只發生在減數分裂過程和基因工程中,(三倍體,病毒,細菌等不能基因重組。)

2.細胞生物的遺傳物質就是dna,有dna就有rna,有5種鹼基,8種核苷酸。

3.雙縮尿試劑不能檢測蛋白酶活性,因為蛋白酶本身也是蛋白質。

4.高血糖症,不等於糖尿病,高血糖症尿液中不含葡萄糖,只能驗血,不能用本尼迪特試劑檢驗,因為血液是紅色的。

5.洋蔥表皮細胞不能進行有絲分裂,必須是連續分裂的細胞才有細胞周期。

6.細胞克隆,就是細胞培養,利用細胞增值的原理。

7.細胞板不等於赤道板,細胞板是植物細胞分裂後期由高爾基體形成,赤道板不是細胞結構。

8.激素調節是體液調節的主要部分,co2刺激呼吸中樞使呼吸加快屬於體液調節。

9.注射血清治療患者不屬於二次免疫,(抗原加記憶細胞才是),血清中的抗體是多種抗體的混合物。

10.刺激肌肉會收縮,不屬於反射,反射必須經過完整的反射弧(這個點昨天一摸理綜就考了),判斷興奮傳導方向有突觸或神經節。

11.遞質分興奮行遞質和抑制性遞質,抑制性遞質能引起下一個神經元電位變化,但電性不變,所以不會引起效應器反應。

12.dna是主要的遺傳物質中的「主要」如何理解?每種生物只有一種遺傳物質,細胞生物就是dna.rna也不是次要的遺傳物質,而是針對「整個」生物界而言的,只有少數rna病毒的遺傳物質是rna。

13.隱性基因在哪些情況下性狀能表達?...1.單倍體,2,純合子,3.位於y染色體上。

14.染色體組不等於染色體組型不等於基因組。染色體組是一組非同元染色體,如人類為2個染色體組,為二倍體生物。基因組為22+x+y,而染色體組型為44+__或xy.

15.病毒不具細胞結構,無獨立心陳代謝,只能過寄生生活,用普通培養基無法培養,之能用活細胞培養,如活雞胚。

16.病毒在生物學中的應用舉例:①基因工程中作載體,②細胞工程中作誘融合劑,③在免疫學上可作疫苗用於免疫預防。

17.遺傳中注意事項:(1)基因型頻率≠基因型概率。(2)顯性突變、隱性突變。(3)重新化整的思路(aa自交→1aa:2aa:1aa, 其中aa致死,則1/3aa+2/3aa=1)(4)自交≠自由交配,自由交配用基因頻率去解,特別提示:豌豆的自由交配就是自交。(5)基因型的書寫格 式要正確,如常染色體上基因寫前面xy一定要大寫。要用題中所給的字母表示。(6)一次雜交實驗,通常選同型用隱性,異型用顯性。(7)遺傳圖解的書寫一 定要寫基因型,表現型,×,↓,p,f等符號,遺傳圖解區別遺傳系譜圖,需文字說明的一定要寫,特別注意括弧中的說明。(8)f2出現3:1(aa自交) 出現1:1(測交aa×aa),出現9:3:3:1(aabb自交)出現1:1:1:1(aabb×aabb測交或aabb×aabb雜交)。(9)驗證 基因位於一對同源染色體上滿足基因分離定律(或位於兩對同源染色體上滿足基因自由組合定律) 方法 可以用自交或測交。(植物一般用自交,動物一般用測交) (10)子代中雌雄比例不同,則基因通常位於x染色體上;出現2:1或6:3:2:1則通常考慮純合致死效應;子代中雌雄性狀比例相同,基因位於常染色體 上。(11)f2出現1:2:1不完全顯性),9:7、15:1、12:3:1、9:6;1(總和為16)都是9:3:3:1的變形(aabb的自交或互 交)。(12)育種方法:快速繁殖(單倍體育種,植物組織培養)、最簡單育種方法(自交)。(13)秋水仙素作用於萌發的種子或幼苗(未作用的部位,如根 部仍為二倍體);秋水仙素的作用原理:有絲分裂前期抑制紡錘體的形成;秋水仙素能抑制植物細胞紡錘體的形成,對動物細胞無效。秋水仙素是生物鹼,不是植物 激素。(14)遺傳病不一定含有致病基因,如21-三體綜合症。

18.平常考試用常見錯別字歸納:液(葉)泡、神經(精)、類(內)囊體、必需(須)、測(側)定、純合(和)子、抑(仰)制、擬(似)核、拮(佶)抗、蒸騰(滕)、異養(氧)型。

19.細胞膜上的蛋白質有糖蛋白(識別功能,如受體、mhc等),載體蛋白,水通道蛋白等。

20.減數分裂與有絲分裂比較:減數第一次分裂同源染色體分離,減數第二次分裂和有絲分裂著絲粒斷裂,減數分裂有基因重組,有絲分裂中無基因重組,有絲分裂整個過程中都有同源染色體,減數分裂過程中有聯會、四分體時期。(識別圖象:三看法針對的是二倍體生物)。

21.沒有紡錘絲的牽拉著絲粒也會斷裂,紡錘絲的作用是使姐妹染色單體均分到兩極。

22.精子、卵細胞屬於高度分化的細胞,但全能性較大、無細胞周期。

23.表觀光合速率判斷的方法:坐標圖中有「負值」,文字中有「實驗測得」。

24.哺乳動物無氧呼吸產生乳酸,不產生二氧化碳,酵母菌兼性厭氧型能進行有氧呼吸和無氧呼吸。植物無氧呼吸一般產生酒精、二氧化碳(特例:馬鈴薯的塊莖、玉米的胚、甜菜的塊根)。

25.植物細胞具有全能性,動物細胞(受精卵、2~8細胞球期、生殖細胞)也有全能性;通常講動物細胞核具有全能性(實例:克隆羊),胚胎幹細胞具有發育全能性。

26.基因探針可以是dna雙鏈、單鏈或rna單鏈,但探針的核苷酸序列是已知的(如測某人是否患鐮刀型貧血症),則探針是放射性同位素標記或熒游標記的鐮刀型貧血症患者的dna作為探針。

27.病毒作為抗原,表面有多種蛋白質。所以由某病毒引起的抗體有多種。即一種抗原(含有多個抗原分子)引起產生的特異性抗體有多種(一種抗原分子對應一種特異性抗體)。

28.每一個漿細胞只能產生一種特異性抗體,所以人體內的b淋巴細胞表面的抗原-mhc受體是有許多種的,而血清中的抗體是多種抗體的混合物。

29.抗生素(如青黴素、四環素)只對細菌起作用(抑制細菌細胞壁形成),不能對病毒起作用。

30.轉基因作物與原物種仍是同一物種,而不是新物種。基因工程實質是基因重組,基因工程為定向變異。

31.標記基因(通常選抗性基因)的作用是:用於檢測重組質粒是否被導入受體細胞(不含抗性)而選擇性培養基(加抗生素的培養基)的作用是:篩選是否導入目的基因的受體細胞。抗生素針對的不是目的基因,而是淘汰不具有抗性的沒有導入目的基因的受體細胞。

32.產生新物種判斷的依據是有沒有達到生殖隔離;判斷是否為同一物種的依據是能否交配成功並產生可育後代。

33.動物細胞融合技術的最重要用途是制備單克隆抗體,而不是培養出動物。

34.微生物包括病毒、細菌、支原體、酵母菌等肉眼看不到的微小生物。

35.漿細胞是唯一不能識別抗原的免疫細胞。吞噬細胞能識別抗原、但不能特異性識別抗原。

36.0℃時,散熱增加,產熱也增加,兩者相等。但生病發熱時,是由於體溫調節能力減弱,產熱增加、散熱不暢造成的。

37.免疫異常有三種:過敏反應、自身免疫病、免疫缺陷病。

38.所有細胞器中,核糖體分布最廣(在核外膜、內質網膜上、線粒體、葉綠體內都有分布)。

39.生長素≠生長激素。

40.線粒體、葉綠體內的dna也能轉錄、翻譯產生蛋白質。

41.細胞分化的實質是基因的選擇性表達,指都是由受精卵分裂過來的細胞,結構、功能不同的細胞中,dna相同,而轉錄出的'rna不同,所翻譯的蛋白質不同。42.精原細胞(特殊的體細胞)通過復制後形成初級精母細胞,通過有絲分裂形成更多的精原細胞。

43.trna上有3個暴露在外面的鹼基,而不是只有3個鹼基,是由多個鹼基構成的單鏈rna。

44.觀察質壁分離實驗時,細胞無色透明,如何調節光線?縮小光圈或用平面反光鏡。

45.抗體指免疫球蛋白,還有抗毒素、凝集素。但干擾素不是抗體,干擾素是病毒侵入細胞後產生的糖蛋白,具有抗病毒、抗細胞分裂和免疫調節等多種生物學功能。

46。基因工程中切割目的基因和質粒的限制酶可以不同。

47.基因工程中導入的目的基因通常考慮整合到核dna,形成的生物可看作雜合子(aa),產生配子時,可能含有目的基因。

48.寒冷刺激時,僅甲狀腺激素調節而言,垂體細胞表面受體2種,下丘腦細胞表面受體有1種。

49.建立生態農業(桑基魚塘),能提高能量的利用率,而不是提高能量傳遞效率。人工生態系統(農田、城市)中人的作用非常關鍵。

50.免疫活性物質有:淋巴因子(白細胞介素、干擾素)、抗體、溶菌酶。

51.外植體:由活植物體上切取下來以進行培養的那部分組織或器官叫做外植體。52.去分化=脫分化。

53.消毒與滅菌的區別:滅菌,是指殺滅或者去處物體上所有微生物,包括抵抗力極強的細菌芽孢在內。注意,是微生物,不僅包括細菌,還有病毒, 真菌,支原體,衣原體等。消毒,是指殺死物體上的病原微生物,也就是可能致病的微生物啦,細菌芽孢和非病原微生物可能還是存活的。

54.隨機(自由)交配與自交區別:隨機交配中,交配個體的基因型可能不同,而自交的基因型一定是相同的。隨機交配的種群,基因頻率和基因型頻 率均不變(前提無基因的遷移、突變、選擇、遺傳漂變、非隨機交配)符合遺傳平衡定律;自交多代,基因型頻率是變化的,變化趨勢是純合子個體增加,雜合個體 減少,而基因頻率不變。

55.血紅蛋白不屬於內環境成分,存在於紅細胞內部,血漿蛋白屬於內環境成分。56.血友病女患者基因治療痊癒後,血友病性狀會傳給她兒子嗎?能,因為產生生殖細胞在卵巢,基因不變,仍為xbxb,治癒的僅是造血細胞。

57.葉綠素提取用95%酒精,分離用層析液。

58.重組質粒在細胞外形成,而不是在細胞內。

59.基因工程中cacl2能增大細菌細胞壁通透性,對植物細胞壁無效。

60.dna指紋分析需要限制酶嗎?需要。先剪下,再解旋,再用dna探針檢測。外分泌性蛋白通過生物膜系統運送出細胞外,穿過的生物膜層數為零。

61.葉表皮細胞是無色透明的,不含葉綠體。葉肉細胞為綠色,含葉綠體。保衛細胞含葉綠體。

62.呼吸作用與光合作用均有水生成,均有水參與反應。

63.atp中所含的糖為核糖。

64.並非所有的植物都是自養型生物(如菟絲子是寄生)並非所有的動物都是需氧型生物;(蛔蟲);蚯蚓、螃蟹、屎殼郎為分解者。

65.語言中樞位於大腦皮層,小腦有協調運動的作用,呼吸中樞位於腦干。下丘腦為血糖,體溫,滲透壓調節中樞。下丘既是神經器官,又是內分泌器官。

66.胰島細胞分第4/6頁泌活動不受垂體控制,而由下丘腦通過有關神經控制,也可受血糖濃度直接調節。

67.淋巴循環可調節血漿與組織液的平衡,將少量蛋白質運輸回血液.毛細淋巴管阻塞會引起組織水腫。

68.有少量抗體分布在組織液和外分泌液中,主要存在於血清中。

69.真核生物的同一個基因片段可以轉錄為兩種或兩種以上的mrna。原因:外顯子與內含子的相對性。

70.質粒不是細菌的細胞器,而是某些基因的載體,質粒存在於細菌和酵母菌細胞內。

71.動物、植物細胞均可傳代大量培養。動物細胞通常用液體培養基,植物細胞通常用固體培養基,擴大培養時,都是用液體培養基。

72.細菌進行有氧呼吸的酶類分布在細胞膜內表面,有氧呼吸也在也在細胞膜上進行(如:硝化細菌)。光合細菌,光合作用的酶類也結合在細胞膜上,主要在細胞膜上進行(如:藍藻)。

73.細胞遺傳信息的表達過程既可發生在細胞核中,也可發生在線粒體和葉綠體中。

74.在生態系統中初級消費者糞便中的能量不屬於初級消費者,仍屬於生產者的能量。

75.用植物莖尖和根尖培養不含病毒的植株。是因為病毒來不及感染。

病毒:噬菌體、艾滋病病毒(hiv)、sars病毒、禽流感病毒、流感病毒、煙草花葉病毒。

80.需要熟悉的植物:玉米、甘蔗、高粱、莧菜、水稻、小麥、豌豆。

81.需要熟悉的動物:草履蟲、水螅、蠑螈、蚯蚓、蜣螂、果蠅。

82.還有例外的生物:朊病毒、類病毒。

83.需要熟悉的細胞:人成熟的紅細胞、蛙的紅細胞、雞血細胞、胰島b細胞、胰島a細胞、造血幹細胞、b淋巴細胞、t淋巴細胞、漿細胞、效應t 細胞、記憶細胞吞噬細胞、白細胞、靶細胞、汗腺細胞、腸腺細胞、肝細胞、骨骼肌細胞、神經細胞、神經元、分生區細胞、成熟區細胞、根毛細胞、洋蔥表皮細 胞、葉肉細胞。

84.需要熟悉的酶:atp水解酶、atp合成酶、唾液澱粉酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、dna解旋酶、dna聚合酶、dna連接酶、限制酶、rna聚合酶、轉氨酶、纖維素酶、果膠酶。

85.需要熟悉的蛋白質:生長激素、抗體、凝集素、抗毒素、干擾素、白細胞介素、血紅蛋白、糖被、受體、單克隆抗體、單細胞蛋白、各種消化酶、部分激素。


高中生物基本知識總結大全

1.誘變育種的意義:提高變異的頻率,創造人類需要的變異類型,從中選擇、培育出優良的生物品種。

2.原核細胞與真核細胞相比最主要特點:沒有核膜包圍的典型細胞核。

3.細胞分裂間期最主要變化:DNA的復制和有關蛋白質的合成。

4.構成蛋白質的氨基酸的主要特點是:

(a-氨基酸)都至少含一個氨基和一個羧基,並且都有一氨基酸和一個羧基連在同一碳原子上。

5.核酸的主要功能:一切生物的遺傳物質,對生物的遺傳性,變異性及蛋白質的生物合成有重要意義。

6.細胞膜的主要成分是:蛋白質分子和磷脂分子。

7.選擇透過性膜主要特點是:

水分子可自由通過,被選擇吸收的小分子、離子可以通過,而其他小分子、離子、大分子卻不能通過。

8.線粒體功能:細胞進行有氧呼吸的主要場所。

9.葉綠體色素的功能:吸收、傳遞和轉化光能。

10.細胞核的主要功能:遺傳物質的儲存和復制場所,是細胞遺傳性和代謝活動的控制中心。

新陳代謝主要場所:細胞質基質。

11.細胞有絲分裂的意義:使親代和子代保持遺傳性狀的穩定性。

12.ATP的功能:生物體生命活動所需能量的直接來源。

13.與分泌蛋白形成有關的細胞器:核糖體、內質網、高爾基體、線粒體。

14.能產生ATP的細胞器(結構):線粒體、葉綠體、(細胞質基質(結構))

能產生水的細胞器_(結構):線粒體、葉綠體、核糖體、(細胞核(結構))

能鹼基互補 配對 的細胞器(結構):線粒體、葉綠體、核糖體、(細胞核(結構))

14.確切地說,光合作用產物是:有機物(一般是葡萄糖,也可以是氨基酸等物質)和氧

15.滲透作用必備的條件是:一是半透膜;二是半透膜兩側要有濃度差。

16.礦質元素是指:除C、H、O外,主要由根系從土壤中吸收的元素。

17.內環境穩態的生理意義:機體進行正常生命活動的必要條件。

18.呼吸作用的意義是:(1)提供生命活動所需能量;(2)為體內其他化合物的合成提供原料。

19.促進果實發育的生長素一般來自:發育著的種子。

20.利用無性繁殖繁殖果樹的優點是:周期短;能保持母體的優良性狀。

21.有性生殖的特性是:具有兩個親本的遺傳物質,具更大的生活力和變異性,對生物的進化有重要意義。


高中生物重點知識記憶口訣

1、減數分裂

性原細胞做准備,初母細胞先聯會;

排板以後同源分,從此染色不成對;

次母似與有絲同,排板接著點裂匆;

姐妹道別分極去,再次質縊個西東;

染色一復胞兩裂,數目減半同源別;

精質平分卵相異,其他在此暫不提。

2、鹼基互補配對

DNA,四鹼基,A對T,G對C,互補配對雙鏈齊;

RNA,沒有T,轉錄只好U來替,AUGC傳信息;

核糖體,做機器,tRNA上三鹼基,能與密碼配對齊。

3、遺傳判定

核、質基因,特點不同。

父親有,子女沒有,母親有子女才有,基因在細胞質;

父親有,子女也有,基因在細胞核;

基因分顯隱,判斷要細心

無中生有,此有必為隱;

顯性世代相傳無間斷;

基因所在染色體,有常有X還有Y,

母病子必病,女病父難逃,是X隱;

父病女必病,是X顯;

傳兒不傳女,是伴Y;

此外皆由常。

1、原核生物的種類

藍色細線織(支)毛衣

即藍藻、細菌、放線菌、支原體、衣原體

2、微量元素

鐵猛碰新木桶

FeMnBZnMoCu

3、八種必需氨基酸

方法一、攜一兩本單色書來

纈氨酸、異亮氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、甲硫氨酸(蛋氨酸)、色氨酸、蘇氨酸、賴氨酸

方法二、姓賴的好色(賴、色),笨笨的(苯、丙),頭上光光的(亮、異亮),蘇嫁劉(蘇、甲硫),

賒了(纈)。

賴、色;苯丙;亮、異亮;蘇、甲硫;纈。

4、色素層析

(從上到下)胡黃ab

5、植物有絲分裂

前中後末由人定(各期人為劃定)

仁消膜逝兩體現(核膜、核仁消失,染色體、紡錘體出現。)

赤道板處點整齊(著絲點排列在赤道板處)

姐妹分離分極去(染色單體分開,移向兩極。)

膜仁重現兩體失(核膜、核仁重新出現,染色體、紡錘體消失)

高中生物必背知識點

1、生命系統的結構層次依次為:細胞→組織→器官→系統→個體→種群→群落→生態系統。

2、還原糖(葡萄糖、果糖、麥芽糖)可與斐林試劑反應生成磚紅色沉澱;脂肪可蘇丹III染成橘黃色(或被蘇丹IV染成紅色);澱粉(多糖)遇碘變藍色;蛋白質與雙縮脲試劑產生紫色反應。

3、蛋白質的基本組成單位是氨基酸,氨基酸結構通式為NH2—C—COOH,各種氨基酸的區別在於R基的不同。

4、每種氨基酸分子至少都含有一個氨基(—NH2)和一個羧基(—COOH),並且都有一個氨基和一個羧基連接在同一個碳原子上,這個碳原子還連接一個氫原子和一個側鏈基因。

5、遺傳信息的攜帶者是核酸,它在生物體的遺傳變異和蛋白質合成中具有極其重要作用,核酸包括兩大類:一類是脫氧核糖核酸,簡稱DNA;一類是核糖核酸,簡稱RNA,核酸基本組成單位核苷酸。

6、維持細胞內環境相對穩定生物膜系統功能許多重要化學反應的位點把各種細胞器分開,提高生命活動效率。

7、物質跨膜運輸方式主動運輸:需要能量;載體蛋白協助;低濃度→高濃度,如無機鹽、離子、胞吞、胞吐:如載體蛋白等大分子。


生物高考必背知識點總結

1、消化酶、抗體等分泌蛋白合成需要四種細胞器:核糖體,內質網、高爾基體、線粒體。

2、細胞膜、核膜、細胞器膜共同構成細胞的生物膜系統,它們在結構和功能上緊密聯系,協調。

維持細胞內環境相對穩定生物膜系統功能許多重要化學反應的位點把各種細胞器分開,提高生命活動效率

核膜:雙層膜,其上有核孔,可供mRNA通過結構核仁

3、細胞核由DNA及蛋白質構成,與染色體是同種物質在不同時期的染色質兩種狀態容易被鹼性染料染成深色

功能:是遺傳信息庫,是細胞代謝和遺傳的控制中心

4、植物細胞內的液體環境,主要是指液泡中的細胞液

原生質層指細胞膜,液泡膜及兩層膜之間的細胞質

植物細胞原生質層相當於一層半透膜;質壁分離中質指原生質層,壁為細胞壁

5、細胞膜和其他生物膜都是選擇透過性膜

自由擴散:高濃度→低濃度,如H2O,O2,CO2,甘油,乙醇、苯

協助擴散:載體蛋白質協助,高濃度→低濃度,如葡萄糖進入紅細胞


高中生物易錯知識點

生物技術的安全性和倫理問題

(一)轉基因生物的安全性爭論 :

(1)基因生物與食物安全:

反方觀點:反對「實質性等同」、出現滯後效應、出現新的過敏原、營養成分改變

正方觀點:有安全性評價、科學家負責的態度、無實例無證據

(2)轉基因生物與生物安全:對生物多樣性的影響

反方觀點:擴散到 種植 區之外變成野生種類、成為入侵外來物種、重組出有害的病原體、成為超級雜草、有可能造成「基因污染」

正方觀點:生命力有限、存在生殖隔離、花粉傳播距離有限、花粉存活時間有限

(3)轉基因生物與環境安全:對生態系統穩定性的影響

反方觀點:打破物種界限、二次污染、重組出有害的病原微生物、毒蛋白等可能通過食物鏈進入人體

正方觀點:不改變生物原有的分類地位、減少農葯使用、保護農田土壤環境

(二)生物技術的倫理問題

(1)克隆人:兩種不同觀點,多數人持否定態度。

否定的理由:克隆人嚴重違反了人類倫理道德,是克隆技術的濫用;克隆人沖擊了現有的婚姻、家庭和兩性關系等傳統的倫理道德觀念;克隆人是在人為的製造在心理上和社會地位上都不健全的人。

肯定的理由:技術性問題可以通過胚胎分級、基因診斷和染色體檢查等方法解決。不成熟的技術也只有通過實踐才能使之成熟。

中國政府的態度:禁止生殖性克隆,不反對治療性克隆。四不原則:不贊成、不允許、不支持、不接受任何生殖性克隆人的實驗。

(2)試管嬰兒:不同觀點,多數人持認可態度。

否定的理由:把試管嬰兒當作人體零配件工廠,是對生命的不尊重;早期生命也有活下去的權利,拋棄或殺死多餘胚胎,無異於「謀殺」。

肯定的理由:解決了不育問題,提供骨髓中造血幹細胞救治患者最好、最快捷的方法,提供骨髓造血幹細胞並不會對試管嬰兒造成損傷。

(3)基因身份證:

否定的理由:個人基因資訊的泄漏造成基因歧視,勢必造成遺傳學失業大軍、造成個人婚姻困難、人際關系疏遠等嚴重後果。

肯定的理由:通過基因檢測可以及早採取預防 措施 ,適時進行治療,達到挽救患者生命的目的。

(三)生物武器

(1)種類:致病菌、病毒、生化毒劑,以及經過基因重組的致病菌。

(2)散布方式:吸入、誤食、接觸帶菌物品、被帶菌昆蟲叮咬等。

(3)特點:致病力強、多數具傳染性、傳染途徑多、污染面廣、有潛伏期、不易被發現、危害時間長等。

(4)禁止生物武器公約及中國政府的態度


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Ⅵ 澱粉溶液和蛋白質溶液,可以通過半透膜嗎

蛋白質是生物大分子物質,不能透過半透膜。舉一個簡單的例子:生物裡面抗體蛋白的分泌必須要高爾基體小泡送出細胞外,(細胞膜就是一種半透膜),如果蛋白質可以透過,就不用高爾基體囊泡運送了。

Ⅶ 蛋白質水溶液能透過半透膜嗎

蛋白質是生物大分子物質,不能透過半透膜。舉一個簡單的例子:生物裡面抗體蛋白的分泌必須要高爾基體小泡送出細胞外,(細胞膜就是一種半透膜),如果蛋白質可以透過,就不用高爾基體囊泡運送了。

Ⅷ 抗原抗體反應的應用

(1)抗原:免疫動物是制備抗血清的第—步。免疫所用的抗原可用病毒、細菌或者其他蛋白質抗原,如果使用半抗原如小分子激素等,必須與大分子載體連接。抗原的用量視抗原種類及動物而異,—次注射小鼠可以少至幾個微克,免、羊甚至更大的動物每次注射的量就相應增加,從幾百μg/次至幾mg/次。
〔2)佐劑及乳化:佐劑可以幫助抗原在注射部位緩慢釋放,以增加免疫刺激的效果。佐劑有完全和不完全佐劑之分。完全佐劑加有滅活的分枝桿菌(如卡介苗)或棒狀桿菌。福氏佐劑可從試劑公司購買,也可用羊毛脂和石蠟油按1:2—4混合自行制備。佐劑與抗原按1:1的比例混合乳化為均勻的乳液,放置後不會發生油水分離。
(3)免疫動物:常用於制備抗血清的動物打豚鼠、家免、小鼠、大鼠等,如果大量生產可用動物羊、馬等,動物接受免疫的乳液量小鼠為1.0—2.0 mL,家兔為2—4mL。抗原免疫動物的途徑取決於動物種類、抗原特性和是否使用佐劑。腹腔注射(i.p),肌肉注射(i.m),皮內注射(i.d.)和皮下注射(s.c.)適合於任何抗原,這些途徑主要刺激局部淋巴結發生免疫應答,初次免疫和免疫加強注射均可使用。靜脈注射(i.v.)則只適合於可溶性抗原及分散的單細胞懸液,且不能使用佐劑,其誘發的免疫應答主要發生在脾臟。此外,在單克隆抗體制備時,亦可用脾臟直接注射或體外免疫方法,尤其對微量抗原比較實用。體外免疫方法也常用於人源單克隆抗體的制備。體外免疫時將脾細胞或外周血淋巴細胞(包括B細胞,T細胞及抗原遞呈細胞)與抗原一起作體外培養,然後再與骨髓瘤細胞融合。初次免疫後要經過2—3次以上的免疫加強以保證能形成較高水平的IgC抗體。兩次免疫注射之間的時間間隔,一般3—4周比較適合大部分動物,小動物可間隔10—14d,大動物則在2月左右。在免疫加強最後一次注射後的一周內採集抗血清,可獲得高水平的抗體。 (1)采血:加強免疫的動物2—3次後,可通過耳靜脈或眼球(小鼠)采血,進行抗血清效價測定。當效價達到理想的高度後,可以采血。采血方式可以從心臟直接取血,也可通過動脈放血。待血液凝固後用針筒或吸管吸取血清。
(2)抗血清的純化與保存:除抗體外血清中含有多種其他蛋白成分。為了避免這些蛋白質干擾抗體(免疫球蛋白)標記反應和抗原抗體反應,抗血清可經過純化以獲得單一的機體(常為IgG)組分。常用的純化IgG的方法為飽和硫酸胺鹽析和層析法。蛋白質在不同的鹽濃度的溶液中,其溶解度不一樣,鹽離子干擾蛋白質和水分子間氫鍵形成,因為水—鹽結合比水—蛋白質結合更穩定,蛋白質即可從溶液中沉澱出來。蛋白質分子越大,沉澱時所需鹽離子濃度越低。免疫球蛋白(Mr 1.5×105)比血清中主要蛋白質白蛋白(M r 6.7×104)的分子大得多,抗體在30%—50%飽和度的硫酸鹽中析出,而白蛋白需在70%—80%飽和度才析出,因此常用33%飽和度的硫酸胺純化血清中的IgG。鹽析時為了減少抗體變性,需在4℃進行,同時用pH8.0緩沖液稀釋抗血清,以減少蛋白濃度過高而發生共沉澱。銨鹽的溶解度不隨溫度變化而明顯改變,0℃和25℃僅差3%,而鈉鹽則相差5倍,因此常在低溫沉澱時用銨鹽,室溫沉澱用鈉鹽。銨鹽對抗體的標記反應(如FITC和biotin標記時)有一定的干擾作用。
鹽析法只能部分純化抗體,更高純度的抗體制劑可用層析法制備。IgM五聚體相對分子質量達9.7×10,比血清中任何其他蛋白都大,用分子篩層析很容易將其純化。IgG在PH 8.0時帶負電荷,能與DEAE纖維素上的陽離子結合,因此可用離子交換層析來純化IgG。IgG純化最常用的方法為親和層析。IgG與葡萄球菌A蛋白和鏈球菌G蛋白具合高度的親和性,可用這兩種蛋白質交聯親和層析柱將IgG純化。大部分IgG與蛋白A結合PH為8—9,洗脫PH為2—4;而與蛋白G的結合PH為5—7,洗脫PH為9—10。C蛋白更適合於IgG的純化,不但反應條件為溫和的弱酸性或弱鹼性,並且與IgG的結合力高於A蛋白。G蛋自能與大部分動物種類的IgG結合,而A蛋白對小鼠IgG1、大鼠IgG2b、人IgG3、馬和綿羊IgG結合力弱或不能結合G蛋白和A蛋白均不能與雞IgG結合。
抗血清或純化的抗體在低溫保存可維持活性數年,反復凍融使抗體很快失活,被細菌或黴菌污染的抗血清或IgG製品也易失去活性。稀釋的抗血清加入防腐劑疊氮化鈉和保護劑如BSA等可於4℃保存。長期保存常用等量甘油於—20℃以下冷藏。也可置於 50%飽和硫酸銨中4℃保存,還可以冷凍乾燥保存。 根據不同目的制備的抗血清,對其中所含抗體的濃度,特異性及免疫球蛋白種類的要求也不一樣。為了獲得質量和數量上合符要求的抗血清,在收集動物血清前必須對免疫效果進行檢測,對收獲後的抗血清也必須對—些參數進行分析,如效價、親和力及交叉反應等。根據不同的抗原性質選用合適的檢測方法。最常用的為免疫沉澱,ELISA,放射免疫等。
效價又稱滴度(titer),是常用於表達抗血清中特異性抗體相對含量的—個半定量指標,即在給定的條件下,結合—定量抗原的抗血清的稀釋度。抗血清經一系列稀釋後(如倍比稀釋)與定量的抗原反應,以能檢測抗血清最大稀釋倍數即為該抗血清的效價。不同的檢測方法測定同一種抗血清的效價,靈敏度不一樣,抗血清的效價也不一樣,如沉澱反應(瓊脂雙擴散)與ELISA二者的效價相差甚大,後者遠高於前者。放射免疫分析(RIA)常用於標記小分子抗原來檢測抗血清的效價。
親和力(affinity)表示抗血清與相應抗原的結合強度,是描述抗體持異性的重要指標,
常用親和常數K表示。親和常數K與抗原抗體反應的平衡常數有關:
抗體特異性與交叉反應:抗體是特異的。只與相應抗原反應。實際制備的抗體卻常有非特異性反應,這是因為抗原不純造成的。多組分抗原之間存在共同的抗原決定簇,或者兩個抗原決定簇結構類似能與同一抗體結合,均可出現抗體與異源抗原的交叉反應。用瓊脂雙擴散能簡便直觀地反映不同抗原與同一抗血清,或不同抗血清與同一抗原的交叉反應。 原理1:單克隆抗體(MAb)與抗血清(又稱多克隆抗體,PAb)最主要的區別是MAb為單一種B細胞克隆所產生的一種均一的免疫球蛋白分子。所以MAb是B細胞克隆的標志,是一種獨特型的抗體,它的特異性是針對一個抗原決定簇的。制備單克隆抗體不能用化學分離的方法從多克隆抗體中去分離純化得到它,而是用分離產生抗體的B細胞克隆的方法得到它。為了使B細胞克隆能在體外人工培養下長期存活並產生完全均一的MAb,G.KÖhler合Milstein於1975年創立了雜交瘤方法。所以制備單克隆抗體的技術又稱雜交瘤技術(hybredoma technique)。
雜交瘤技術的基本原理是用分泌抗體但不能長期培養的B細胞與能在體外長期培養並可低溫保存的腫瘤細胞進行雜交。篩選得到的雜交瘤細胞應該是既能分泌抗體又有瘤細胞的特性,可長期傳代培養,又可在液氮中保存的細胞。把這些細胞單克隆化,用單克隆化的雜交瘤細胞進行單克隆抗體的生產。
原理:最常用的單克隆抗體是小鼠的單抗,此外也有大鼠的和人源的單抗。人源單抗制備比較復雜。小鼠單抗的制備通常是使用Balb/c小鼠的B細胞和它的骨髓瘤細胞。大鼠的單抗制備通常用Lou/c大鼠及其骨髓瘤和Y3/AO大鼠及其骨髓瘤細胞。B細胞是從免疫動物的脾臟中分離出來的。動物免疫方法與抗血清制備相同,只是在制備脾臟前3d必須進行一次靜脈加強注射以保證得到的B細胞有旺盛的分泌抗體的活性。骨髓瘤細胞有許多細胞株是經過誘變和篩選得到的缺陷型。篩選的標準是①瘤細胞本身不產生抗體或者產生抗體的某種鏈,但不能分泌;②是次黃嘌呤鳥嘌呤核苷酸轉移酶(HGPRT)和胸腺嘧啶激酶(TK)的缺陷型。因為這種缺陷型的瘤細胞正常的核酸合成途徑被氨基喋吟(aminopterin)阻斷後,由於缺失這些酶,即使補充它的底物次黃嘌呤(H)和胸腺嘧啶(T),核酸合成的旁路也不能起到救援的作用,結果導致瘤細胞死亡(圖7—2)。而雜交瘤細胞因帶有B細胞的全套基因,在HAT存在的條件下藉助於HGPRT和TK的作用通過替代的核酸合成途徑能正常合成DNA和RNA。所以雜交瘤能正常地生長繁殖而被選擇出來。未被融合的游離的B細胞只能存活3d而後自行死亡。這就是用HAT培養基進行選擇的原理。 (1)融合:細胞雜交之前,要分別准備好脾臟的B細胞懸液和小鼠骨髓瘤細胞(如SP2/0—Agl4細胞株)。免疫後的小鼠脾臟在無菌條件下破碎,將B細胞懸浮在沒有血清的培養液中(通常使用RPMIl640商品配製),並洗滌3次去掉小鼠的血清。SP2/0細胞是用加有10%胎牛或小牛血清培養的,每天更換新鮮培養液使成為對數分裂期生長旺盛的細胞。細胞用RPMIl640洗滌2—3次,把兩種細胞合並在同—試管中,用50%的聚乙二醇(相對分子質量為1000—1500)作為融合劑,在37℃條件下融合l—2min。然後用1640培養液緩慢稀釋,然後除去PEG,將細胞分散至HAT選擇培養板中。電融合方法也可用於單克隆抗體制備,雖融合率較高,但一次融合的細胞數少,且需專門設備,故限制了其廣泛使用。融合時脾細胞和骨髓瘤細胞的比例在5:1—10:1均可獲得滿意結果,每次融合細胞數量在10—10較為合適。融合後的細胞在40或96孔板上的HAT培養液(RPMIl640含10%—20%胎牛或小牛血清和HAT)中37℃,5%CO2條件下培養。融合後的細胞懸液中只有脾細胞和骨髓瘤細胞形成的雜交瘤細胞能在HAT培養基中生長,其他形式的融合細胞均不能生長.未融合的細胞也不能在HAT培養液中生存。
在融合後的細胞培養過程中,飼養細胞(feeder cell)有助於雜交瘤細胞的生長。飼養細胞可用同種動物的腹腔細胞或胸腹細胞。腹腔細胞中的吞噬細胞能清除死亡細胞碎片。使背景更為清潔「干凈」。同時飼養細胞分泌的細胞因子或活性物質有助於雜交瘤細胞的生長。現有商品「雜交瘤細胞生長因子」可用於替代飼養細胞。
(2)陽性雜交瘤細胞的篩選與單克降化:雜交細胞經約10—14d培養後,形成可用的細胞集落(克隆)。經過幾次更換培養液(HT培養液)後進行抗體活性檢測。常用的篩選槍測方法是ELISA和凝集試驗,前者常用於可溶性抗原,後者適用於細胞、細菌等表面抗原。此外,Dot-ELISA、免疫印跡及免疫熒光試驗均可用於雜交瘤細胞的篩選。
使許多細胞克隆混合生長的細胞分離為單個的細胞克隆的過程稱克隆化(colonization)最常用的單克隆化方法是有限稀釋法(limited dilution),即將混合細胞經稀釋後分裝於培養板上,使培養板的大部分孔中只出現一個細胞。為了確保抗體分泌細胞來源於單個細胞,克隆化過程可重復進行,稱為亞克隆化(subclonization)。除有限稀釋法外,熒光激活細胞分揀法(FACS)也用於雜交瘤細胞的克隆化過程。 產生特異性抗體的單克隆雜交瘤細胞株應立即擴大培養,以獲得足夠的細胞用於保存和生產可供應用的抗體。生產大量單克隆抗體的方法目前常用的有3種:小鼠腹水制備、大瓶培養和中空纖維反應器,前者多用於實驗室制備,後二者適應於工廠化生產。
腹水制備:雜交骨髓瘤細胞在腹腔中定植,並產生大量腹水。選用與單克隆抗體制備所用相同的動物品系或者含有相同基因的Fl代雜交品系。雜交F1代品系更適合於腹水制備,如果用異源動物制備腹水時可選用無MHC限制性的裸鼠。用小鼠制備腹水時,先用礦物油或Pristane致敏,以抑制其免疫功能,利於腹水的形成。腹腔注射10—10個雜交瘤細胞,經過7—10 d後形成腹水。每隻小鼠可獲得3—5mL腹水,每mL含IgG抗體可達5—10mg。腹水中含有較多的雜蛋白和非特異性IgG,並且含有許多蛋白酶,易使抗體失活,因此腹水收集後應盡快純化,以防止降解。
大瓶培養:採用1000mL或更大的搖瓶培養。大瓶培養上清體積大,但抗體濃度低,給抗體純化帶來很大困難,消耗人力和培養液,增加生產成本。
中空纖維反應器:是比較經濟的單克隆抗體生產方法。該裝置由具有半透膜性質的成束的微孔纖維組成,雜交瘤細胞位於纖維外部的小量培養液中,培養液在纖維的微孔中循環,供給營養和帶走廢物,抗體大分子和小分子化合物被隔開。高密度的雜交瘤細胞能在此系統中維持數月,每天可產生數百毫克的抗體,抗體濃度高,體積小易於純化。
胎(小)牛血清一直是細胞培養所必須的,在單克隆抗體生產過程中培養液中的血清蛋白使抗體的純化增加了困難,近年開發的無血清培養技術已逐漸用於單克隆抗體的生產中。 小鼠的單克隆抗體蛋白應用於人體後,作為抗原能引起人的免疫應答,大大降低其生物活性,並可能導致變態反應。因此人源單克隆抗體在臨床治療上有廣泛應用前景,引起人們的普遍興趣。但是人單克隆抗體制備存在許多技術上和倫理上的障礙,如人雜交瘤細胞系不穩定,有些抗原不能對人進行人工免疫,人B細胞只能從外周血中分離而無法從脾臟取得等。盡管如此,一些人源單克隆抗體已經獲得,技術上也在逐步完善起來。
人的瘤細胞株U—266常用來與人外周血B細胞融合以獲得人源單克隆抗體。另一些淋巴母細胞抹(LCL)則來源於EB病毒轉化的淋巴細胞,如GMl500,W1—L2和ARH77等也用於雜交瘤細胞的制備。這些細胞系表現ED病毒核抗原(EBNA)陽性,且形成的雜交瘤細胞抗體的分泌水平不高。
獲得人單克隆抗體的另一方法是用EBV直接轉化某些抗體分泌細胞,使之成為「不死」的細胞在體外培養。EBV感染人B細胞後,病毒基因插入人B細胞基因組中,有1%的細胞轉化為「不死」的細胞。B細胞轉化可通過「病毒驅動」和「細胞驅動」兩種方法獲得。前者是將B細胞與分泌EBV的B95—8細胞系一同培養,後者則是與EBNA陽性的LCL細胞一同培養。「細胞驅動」轉化的B細胞比較穩定,抗體分泌能力也較強。
人淋巴母細胞系和人雜交瘤細胞較難獲得,人單克隆抗體也可以通過異源雜文的辦法制備,即將EBV轉化的B細胞與小鼠骨髓瘤細胞融合,將獲得的異源雜交瘤細胞再與免疫後的B細胞融合,得到人單克隆抗體分泌細胞,不產生自身免疫球蛋白,EBVA也是陰性。 抗體的化學修飾:
抗體Fc段用雙功能連接劑與熒光素,同位素,酶,發光化合物,稀土元素以及葯物,毒素等連接後,並不影響其Fab功能區與特異性抗原結合。根據交聯物的性質不同,標記的抗體可用作診斷試劑,也可作為葯物的定向載體,引導葯物或毒素到達抗原存在部位使葯物或使毒素發揮更有效的作用,即俗稱「生物導彈」。從而減少葯物、毒素、同位素、酶在腫瘤治療過程中引起嚴重的副作用,大大提高治療腫瘤的效果。
許多毒素如蓖麻毒素,白喉毒素,天花粉,紅豆毒素等均為蛋白質或糖蛋白,可用雙功能劑與抗體相連;嗎啡,前列腺素,氨甲喋吟,磷酸酯酶C等含有羧基能用碳二亞胺(EDC),混合酸酐法與抗體的氨基形成醯胺鍵;同樣,含脂肪胺的葯物如慶大雷素,阿黴素在水溶性EDC的作用下與抗體的羧基連接;而含芳香胺的葯物則先在低溫下與亞硝酸作用形成重氮化合物,再與抗體分子上的酪氨酸或組氨酸殘基形成偶氮鍵。總之通過抗體的化學修飾把抗體的特異性用到定向給葯和定位檢測上。 抗體基因文庫(antibody recombination library)是將不同的重鏈和輕鏈基因隨機組合,克隆到合適的表達載體中,在原核細胞表達不同的抗體,形成一個抗體庫,從這個抗體庫中,用抗原可以篩選到相應的抗體基因。抗體基因來源於雜交瘤細胞或動物B細胞(免疫或未免疫)的DNA和mRNA。
用質粒作為抗體文庫的載體,雖然也可能表達有活性的抗體分子或片段,但由線狀噬菌體表達更為方便有效。M13、fd、F1等噬菌體的外殼蛋白由5種蛋白組成:pⅢ、pⅥ、pⅦ、pⅧ和pⅨ。每種含量不一,其中pⅧ含量最多,每個噬菌體有2700個pⅧ亞基,其餘4種蛋白僅5個拷貝。增加噬菌體外殼蛋白的長度並不影響噬菌體的裝配,抗體以融合蛋白的形式表達於噬菌體表面。噬菌體表達質粒常用的有fd-CAT1、fd-tet-DOG1、PHEN1、pComb3和pComb3H等。抗體融合蛋白構建多用pⅢ和pⅧ,pⅧ拷貝數高,低親和力的抗體蛋白容易篩選出來。
在噬菌體表達抗體時,常常不表達完整的抗體分子,(因為CH2上不能進行糖基化)。根據不同的引物得到重鏈的VH或VHCH1區,輕鏈的VL或VLCL區。VL和VH兩個片段用一短肽作連接片段,形成單鏈可變區(single-chain fragment variable,scFv);VHCH1和VLCL兩片段則形成Fab片段。另外,單獨的VH和VL也能結合抗原,如果二者形成同源或異源二聚體(dAb),則穩定性和親和性明顯提高(圖7—4)。此外在抗體片段DNA末端加上一些功能蛋白(如鹼性磷酸酶和蛋白毒素)的基因,則表達的抗體就帶有一定生物活性功能片段,可用於檢測或治療。如果在抗體基因末端加上終止子(TAG)則表達的抗體片段是可溶性的,而不是結合在噬菌體表面。
用特異性抗原免疫的動物B細胞構建抗體的噬菌體文庫,抗體親和性高,用與免疫抗原不同的抗原篩選得到的抗體親和性普遍較低。可用模擬天然體細胞突變的方法來提高親和力。如混雜重組法,即將己獲得的輕鏈或重鏈的V片段切下,再克隆至隨機的文庫中的V區構成二級文庫,使H鏈和L鏈混雜,可以使抗體片段的親和性提高。利用PCR錯配將隨機突變引人至抗體的抗原結合區,也能提高對抗原的親和力。先用低親和力的載體在噬菌體的PⅧ表達,篩選後、將抗體基因片段PCR擴增轉至PⅢ上表達,可獲得高親和力的抗體片段。
抗體基因文庫有兩個優點,一是從不適合進行人工免疫的物種獲得單克隆抗體,如人源單克隆抗體;二是可快速方便獲得單克隆抗體。 將鼠源抗體的V區基因與人源抗體C區基因重組,獲得的嵌合抗體(chimericalantibody),可保留鼠抗體對抗原的高親和性,又減弱鼠源抗體對人的免疫原性,提高治療性抗體的效果。
重組的嵌合抗體基因轉化骨髓瘤細胞或中國地鼠卵細胞(CH0),可在其中表達。為了進一步地消除鼠抗體V區框架區(FW)的異源性,可實行CDR移植(CDR grafting),以獲得與鼠FW類似的人FW結構的嵌合抗體。
噬菌體表達的抗體僅含V區(scFv)或Fab片段,缺乏Fc區,使抗體的穩定性下降,半衰期縮短,與Fc受體結合功能也消失。因此在抗體功能片段的末端連接A蛋白、酶、細胞因子、CD4和毒素等分子,既可增加抗體片段的穩定性,又可發揮某些生物學活性功能。
用抗體基因工程方法獲得的抗體與效應分子交聯物比用化學交聯法具有優點:可以大量生產,不會因修飾作用影響抗體及效應分子的活性,效應分子還可根據需要進行改造。
此外在抗體片段的末端連接一段特異的雙親性螺旋(amphiphilic helixes)結構,如亮氨酸拉鏈結構(leucine zipper),可使單價的scFv或Fab片段在體內或體外形成穩定的雙分子聚合體,從而提高抗體片段的親和力。此法也可用於制備雙特異性抗體。 噬菌體表達的抗體片段常常是在原核細胞(E.coli)中完成。原核系統表達抗體片段產量
高,成本低,快速易於操作。但抗體片段在原核表達系統中不能進行CH2糖基化,從而影響抗體的活性。因此重組抗體基因片段可轉移至適合的骨髓瘤細胞系或哺乳動物細胞系(如CHO),甚至於植物細胞中表達,可以得到與淋巴細胞表達相同的抗體分子。免疫球蛋白IgA的重鏈和輕鏈及分泌片基因可以分別轉化不同的植株,將表達這些蛋白的植株進行有性雜交,在雜交後代中可以裝配成完整的IgA雙分子。以植物作為生物反應器進行抗體的表達已有許多成功的研究報道,與動物細胞相比更為經濟,具有廣泛的應用前景。 抗體酶是抗原決定簇處於轉換態結構的抗體。因為轉換態分子極不穩定無法制備抗體,所以催化性抗體的獲得主要是通過設計穩定的轉換態的類似物作為半抗原,與載體蛋白交聯後,免疫動物,獲得針對半抗原的抗體,從中篩選具有催化活性的抗體。篩選催化性單克隆抗體所用的ELISA與篩選一般抗體的方法不完全一樣,應根據催化反應的特點而進行適當的修改。經典的方法是先篩選出與底物或半抗原結合的抗體,然後從中再篩選出有催化活力的抗體,這種方法費時費力。利用催化性抗體對底物的催化活性,對底物進行適當修飾,使催化反應的產物可直接表現抗體的催化活性,這樣可以簡化檢測步驟。
轉換態類似物半抗原的設計,必須了解催化反應的轉換態模型的結構特點。催化抗體的抗原結合位點上與轉換態互補的某些催化基團的形成,能穩定轉換態分子。此外有人把單克隆抗體分子用化學修飾方法引入一些活性基團,提高催化性抗體的催化與親和效率。應用噬菌體抗體文庫也可以篩選催化性抗體,可省去制備轉換態類似物的復雜過程,直接用底物從文庫中篩選有催化活性的抗體片段。如用半抗原免疫後制備的文庫或文庫經過多次混雜重組,則可以得到更高的親和力的催化性抗體。抗獨特型抗體也用於催化性抗體的制備,用酶作為抗原免疫小鼠獲得能夠封閉酶活性位點的單克隆抗體,將這個抗體用蛋白酶除去Fc片段,用Fab免疫其他品系的小鼠或家兔,得到的抗體具有相應的酶催化活性。
從理論上看,B細胞具有全套免疫球蛋白的多樣性的胚系基因,當然也包括有催化作用的自身抗體在內。然而1989年Paul W.首次報道了人體的一種能催化蛋白質水解的免疫球蛋白。它是—種自身抗體,能水解血管活性腸肽(vasoactive intenstinal peptide,VIP)的Glnl6—Met17鍵。用VIP作為抗原能得到有催化作用的單克隆抗體,也能催化Glnl6—Met17鍵。大約有17%的人有這種自身抗體酶,但患有氣喘的病人中該抗體與VIP的親和力比健康人高50倍。由於VIP是一種氣管鬆弛劑,因此有人認為這種VIP自身抗體的長期作用可能與氣喘的過敏應答有一定關系。由此推測除了人工設計催化抗體以及發現的自身催化抗體外,用篩選單抗的方法,也有可能找到所需要的催化抗體。

Ⅸ RO是什麼意思

RO,英文全稱reverse osmosis,意思是反滲透

在自然界的滲透現象,是水由濃度低的溶液透過半透膜流向濃度高的溶液,並且在膜兩邊形成一個高度差,稱之為滲透壓。反滲透就是通過人工加壓將水從濃溶液中壓到低濃度溶液中,故與自然界的滲透作用相反。

RO(Reverse Osmosis)反滲透技術是利用壓力表差為動力的膜分離過濾技術,源於美國二十世紀六十年代宇航科技的研究,後逐漸轉化為民用,目前已廣泛運用於科研、醫葯、食品、飲料、海水淡化等領域。

RO反滲透膜孔徑小至納米級(1納米=10^-9米),在一定的壓力下,H2O分子可以通過RO膜

而源水中的無機鹽、重金屬離子、有機物、膠體、細菌、病毒等雜質無法通過RO膜,從而使可以透過的純水和無法透過的濃縮水嚴格區分開來。

一般性的自來水經過RO膜過濾後的純水電導率5μs/cm(RO膜過濾後出水電導=進水電導×除鹽率,一般進口反滲透膜脫鹽率都能達到99%以上,5年內運行能保證97%以上。

對出水電導要求比較高的,可以採用2級反滲透,再經過簡單的處理,水電導能小於1μs/cm), 符合國家實驗室三級用水標准。

再經過原子級離子交換柱循環過濾,出水電阻率可以達到18.2M .cm,超過國家實驗室一級用水標准(GB 6682-92)。

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