❶ 組培時一般母液配置需要用什麼水
原則上是用蒸餾水或者無菌水,但是實際組培生產中,直接用自來水的,當然自來水裡面的離子含量不能太高
❷ 培養基母液配製的方法如何
花卉組織培養中的培養基配製是一個關鍵步驟。培養基的配方應根據花卉種類及外植體和培養階段的特定需求來調整。通常,培養基包含大量元素、微量元素、維生素、激素、糖和瓊脂等成分,並在必要時添加有機物如活性炭、香蕉汁或椰子汁等。在實際操作中,首先應選擇已有的培養基配方,這些配方是經過科學家研究並驗證有效的。若現有配方不滿足需求,可以基於MS培養基(Murashige和Skoog的縮寫,一種經典培養基)進行調整。接下來,將以MS培養基為例,介紹其配製方法。
1. 配製母液:將培養基中的元素按原配方量的50倍、100倍或1000倍稱量後,溶解於水中製成母液。母液制備後應貼上標簽,並存放在0至4攝氏度的冰箱中,可保存半年至一年。在制備過程中,注意區分可能發生化學反應或生成沉澱的物質,並使用重蒸餾水進行配製。葯物要求使用分析純或更高純度的化學物質,確保稱量和定容的准確性。
2. 配製培養基:對於每1000毫升培養基,需稱取6至10克瓊脂作為凝固劑,並按照配方要求進行稱量。將瓊脂加入水中慢慢溶解。然後,根據母液順序和規定量進行添加,並根據需要加入生長調節物質,如吲哚乙酸或萘乙酸等。每1000毫升培養基中加入蔗糖30克或根據要求調整,定容至所需體積。在加入熱瓊脂後,用鹽酸或氫氧化鈉調整pH值至5.4至6.0之間。趁熱將培養基倒入培養容器中,占據容器體積的1/3至1/4,避免沾染容器壁。之後,立即密封並按照高壓滅菌鍋的操作規程進行滅菌。在121攝氏度、111千帕的壓力下維持15至20分鍾後,切斷電源並待壓力恢復正常後打開鍋蓋,取出培養基。最後,將培養基放在接種室內培養3天,確保無感染後方可用於組織培養。