蛋白浓缩超滤管

1. 超滤浓缩最低浓度

超滤浓缩最低浓度是2毫克每毫升。因为浓缩过快或者过度浓缩会引起蛋白沉淀。蛋白浓缩后最终浓度不超过2毫克每毫升，降低离心速度并改用截留分子量更大的超滤管。

2. 同一个超滤浓缩管可以用来纯化不同的蛋白吗

不可以的
不管是哪个公司生产超滤浓缩管使用后都会有蛋白残留在滤膜上，而不管是使回用氯化钠或答者氢氧化钠清洗都不能确保可以完全清理掉残留在膜上的蛋白。
如果不同的蛋白间混合使用，可能前一个蛋白会污染到后一个蛋白，甚至有些某些高活性的酶残留在上面会造成后一个蛋白被酶切降解，造成不必要的损失。

3. 分离22KD的蛋白质选择什么型号的超滤膜

如果是分离22kDa及分子量远小于它的小蛋白，推荐用millipore的超滤管，截留分子量10kDa，体积1-15ml都有。主要还是看你的目的蛋白是集中于浓缩液部分，还是滤液部分，从而选择合适的截留分子量

4. 30kd超滤管最大转速多少

30kd超滤管最大转速4000rpm。最大不能超过4000g，离心5-8分钟，即可将4ml样品浓缩至1ml以下至几十微升。一般是用来分离血浆。血浆蛋白的分离将血清加入到30kd分子量的超滤管中，将超滤管嵌套进入嵌套管中，进行高速离心，转速12000转每分钟，离心10分钟。离心结束后，将嵌套管中的液体收集，得到初步的组织液。

5. 请问超滤管可以纯化胃蛋白酶消化后的IgG吗。需要F(ab')2片段。

超滤管不建议用复于纯化，适制用于去盐或浓缩，尤其是对于你的这个实验，问题有3点：
1、胃蛋白酶35KD左右，Fab2有90KD，两者的分子量相差不到3倍，你很难选到合适孔径的超滤管能较好分离两者，用分子筛还是可以的；
2、超滤管总体蛋白回收率比纯化技术低；
3、每次超滤，都会有上层滤液残留，无法高效率去除这部分杂蛋白。

以上意见供您参考，祝愉快！

6. 超滤离心管浓缩蛋白会损失吗

会有少量损失。取决于缓冲液，滤网的网眼大小和蛋白质的分子量

7. 蛋白用超滤管浓缩容易沉淀怎么办

可能是抄这个蛋白的水溶性较差，也就是只能保持在一定浓度不能太高
另外就和这个蛋白的稳定性有关了，超滤时保持低温，体积缩小一点后就把滤液混匀避免局部浓度过高，选择更合适的缓冲液，添加一点甘油等小分子物质等都可以增加蛋白的稳定性。

8. 超滤浓缩离心管使用前要怎么处理

可能不同厂家的产品保存运输条件不一样。
如果有甘油等保护剂，那就一定要洗干净再加样品。
干的超滤管也要先润湿再用，否则可能不能完全利用膜面积。
最好，用样品buffer润洗下再加样，最大程度保证蛋白活性。尤其是用过后保存在NaOH或乙醇中后。
一般还是离心机甩一下好，使膜充分浸润。
降低吸附的办法有：
1，蛋白浓度不要过低
2，尽量选用纤维素的低吸附超滤管
3，用前可以用Tween
80等去垢剂润洗（不影响蛋白活性的前提下）
4，加入保护蛋白，如BSA(不影响蛋白后续使用的前提下)
用完保存在20%
EtOH中，4C保存，防止长菌，依不同样品可以重复使用不同的次数。

9. 如何用蛋白浓缩管

选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。

通常应回截留分子量答不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。

新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

(9)蛋白浓缩超滤管扩展阅读：

超滤浓缩离心管，最新推出专利产品Hydrosart膜2K型，具有极低的蛋白吸附特性，高流速、高通量，是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。

备有四种材质的超滤膜：聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart，可根据不同要求灵活选用；两种回收浓缩液的方法：既可用吸管直接吸取并回收，又可将离心管放入离心机反甩，将浓缩液甩入回收帽中，加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收；

10. 如何检测超滤管的膜是否破损

可以根据产水的指标以及仪表参数变化来进行间接地判断，当然还有其他的方法，直接方法倒是没听说