1. “两级冷却，加热除菌”的过程和原理
两级冷却，加热除菌流程：1-粗过滤器 2-压缩机 3-贮罐 4，6-冷却器 5-旋风分离器 7-丝网分离器 8-加热器 9-过滤器
这个流程的特点是，空气经过两次冷却，两次油水分离，再适当加热后再过滤。两次冷却和分离的好处是能够提高传热系数，节约冷却用水，油水的分离比较完全。经过冷凝器4第一次冷却后，大部分油、水被冷凝成雾滴，而且雾滴达，浓度高，从而适宜用旋风分离器分离。第二次冷凝下来的雾滴小而少，要用丝网分离器才能捕集。冷却可采用地下水或冰水，第一次冷却到35℃以下，第二级冷却到20℃左右。这样除去油、水后，空气的湿度仍为100%，再通过加热的办法，使之降到50%左右再进行过滤除菌。通常加热到35℃即可达到目的。
除了上述总过滤系统外，为保险起见，每个种子罐和发酵罐还配备一只分过滤器，这种设备起除菌作用的是薄层过滤板或滤纸。由总过滤器输入的空气由筒身中部切向进入，空气夹带的液滴由于旋风作用被部分分离。再经过进室丝网（或其他过滤介质）进一步粗滤和分离液滴之后，经过除菌滤层输入发酵罐。除菌滤层采用两层丝网和麻布，中间夹三层超细纤维滤纸组成。采用三层滤纸的目的不是为了提高过滤效率，而是预防万一击穿一层后造成短路。滤纸应该采用经过疏水处理后的Ju型滤纸，它可以耐油、水和蒸汽的反复杀菌、分过滤器在每批发酵前必须随同发酵罐（或种子罐）一同灭菌。
2. 关于实验室抽虑除菌的操作
问：最近要做一些培养基，有一些糖类需要过滤除菌，但不知道怎么操作，还需要什么辅助设备？
答：你只要有滤膜和配套的过滤器就可以了，一般在超净工作台上进行。滤膜用0.22微米或0.45微米两种规格，指的是滤膜的孔径大小吧。一般0.22就够了！
答：如果溶液的量比较大，超过500ml，可以采用已灭菌的抽滤瓶，预先垫好0.22um 的滤膜。抽滤瓶灭菌前要检查封口用纱布或棉花堵牢，使用时，不用在无菌室中进行，只要保证收集瓶无菌状态就可以。抽滤后，过滤好的溶液在无菌条件下倒进已灭菌的空试剂瓶中。
如果用小量的溶液过滤，无菌室内用一次性注射器和一次性0.22um滤膜（millipore或pall都有卖）就可以。
答：看过滤的量，如果量小，用注射器加滤器、0.22微米滤膜过滤，滤器加上滤膜后盖紧，稍旋松，饭盒密封100度蒸馏水煮沸30分钟灭菌，用来承接无菌糖水的瓶需高压。用时在无菌操作台上操作，并先旋紧滤器，注意滤器外流下去的哪怕一滴也会造成染菌；过滤应该是费力的，如果感觉很轻松，则滤膜已破。0.45微米的滤膜一般用于两次过滤的第一次，以防止0.22堵塞。注射器，若能高压更好些。
如果量大，正压可用蠕动泵接皮管接不锈钢滤器大张滤膜，这些都是要高压的。负压可用抽滤。
3. 空气过滤除菌工艺技术要求中需注意哪些方面
以下三个问题应该特别注意：
（1）高效过滤器对微生物的过滤效率
由于微生物的等价直径远大于05μm，所以高效过滤器的滤菌效率几近100%，高效过滤器出口菌浓皆可为“0”。用喷含菌溶液来试验，由于溶液的最后液滴大小也都大于细菌自身大小，所以也获得较高的效率。对于常用的高效过滤器，当以每L细菌浓度为82102～6104空气通过它时，对于不同大小菌种，不同滤速条件的过滤效率也不一样，对自身大小约01～05μm的细菌其过滤效率和03μmDOP微粒的效率一致。
（2）控制减少洁净区的微生物提高洁净度应努力做到：尽量减少涡流，避免将工作区以外的污染带入工作区；尽量防止灰尘的二次飞扬，以减少灰尘对工作的污染机会；为了稀释空气中的含尘浓度，要有足够的通风换气量；工作区的气流要尽量均匀，风速必须满足工艺和卫生要求，当气流向回风口流动时，要使空气中的灰尘能有效地带走。
总的来说，洁净室的灰尘主要来源于人其占80%~90%,来源于建筑物是次要的仅占10%~15%，来源于净化送风系统的就更少了。
4. 在生物工业生产中，“无菌空气”的标准是什么在比较潮湿的气候条件下，应采用怎样的空气除菌流程
1、“无菌空气”的标准问题，建议您到“国标网”上，了解国标的标准。
2、空气除菌流程：
最好先用除湿机降低空气的湿度，然后将干燥空气再经过HIPA媒过滤杀菌（或红外线杀菌、或紫外线杀菌）（或多重杀菌）和除尘过滤，然后通过风机将“干燥的无菌空气”排放到使用空间去。
5. 空气总过滤器和分过滤器如何灭菌
总过滤器灭菌时，一定要保证蒸汽的压力，使用压力一定要在0.3~0.4
MPa之间，灭菌过程中过滤器的表压应在0.15~0.20
MPa左右。中小型过滤器一般保压45~60
min，总过滤器（一级过滤器）保压时间为1.5~2
h。对于新装介质的过滤器，灭菌时间应适当延长一些，一般延长15~20
min。灭菌后要用压缩空气将介质吹干，吹干时间可根据介质的吸水性质和过滤器的规模而定。玻璃纤维吹干时间略短，棉花介质稍长，中小型过滤器吹干时间在1~2
h，大型过滤器可达2~4
h。用压缩空气吹时，气流要适当，太小吹不干，过大容易将介质顶翻，造成空气走短路而带菌。
6. 答题，根据题目数据，设计简单的培养基灭菌流程和空气除菌流程
要根据你的培养基成分来选择灭菌方式。
如果你的培养基中所有的成分都可以耐高温，那就用压力蒸汽高温灭菌的方式：121℃或者115℃30分钟。
2.如果你的培养基中有些成分不耐高温，就可以用除菌过滤的方式除菌：用除菌滤器过滤培养基至已灭菌的培养器中。
3.如何要求不高，部分试验用培养基，可以用煮沸的方式灭菌。
不知你是哪种培养基。
7. 制备压缩空气过程中,如何提高过滤除菌效率
制备压缩空气过程中，如何提高过滤除菌的效率：
设计合理的附属设备，选择合内适的容空气净化流程，以达到除油、水和杂质的目的。
设计和安装合理的空气过滤器，选用除菌效率高的过滤介质。
保证进口空气清洁度，减少进口空气的含菌数。加强生产场地的卫生管理，减少生产环境空气中的含菌数，正确选择进风口，压缩空气站应设上风向，提高进口空气的采气位置，减少菌数和尘埃数，加强空气压缩前的预处理。
8. 空气除菌的方法有哪些
空气除菌一般有加热灭菌、静电除菌和介质过滤除菌三种，目前国内广泛采用介质过滤除菌。
(1)加热灭菌即将空气加热到一定温度后，保温一定时间，将微生物杀死的方法。美国某发酵厂采用提高进El空气的温度，经压缩后达220~C，保特15 S，达到灭菌目的。国内水冷式空压机出口空气的温度为120—140~C，风冷式空压机出口空气的温度为140-160~C，也有一定的杀菌作用。
(2)静电除菌它是利用静电引力吸附带电粒子，而达到除菌除尘的目的。将交流电电压提高到2～5万V，经整流变成直流电。当气体通过时，在强的电场(>7000V／era )作用下形成电离作用，产生带正负电荷的离子，并分别向正负电极移动，在移动的过程中又使灰尘、微生物带电，而被电极所吸附。
(3)介质过滤除菌介质过滤除菌是目前国内外发酵工业上普遍使用的空气除菌方法。它是使空气通过经高温灭菌的介质过滤层，将空气中的微生物等颗粒阻截在介质层中，而达到除菌目的。
9. 空气过滤器怎么使用和消毒
过滤器操作说明指导 气体过滤器使用说明 安装步骤 1 2 彻底清洗过滤器壳体； 吹净气体管路中的杂质，按照正确的工作流程，将过滤器壳体接入过滤系统 管路中。连接时注意进出气口方向，确保滤芯为外侧进气、内侧出气状态； 3 将滤芯开口一端的塑料袋打开，检查 O 型圈是否完好； 4 5 6 用合适的湿润剂（例如水）湿润 O 型圈和滤芯座插孔； 手握滤芯靠近 O 型圈的一端，垂直将滤芯插口完全插入滤芯座插口内； 将所有的滤芯插好后去掉滤芯包装袋，多芯过滤器需扣上压板固定，然后将 金属罩壳安装好； 使用注意事项 1 2 操作时应防止压力冲击，禁止反向加压； 当精过滤器上、 下游之间的压力降大于 0.05MPa 或气通量明显下降时， 应考 虑更换滤芯；预过滤器压差达 0.03-0.04MPa 时考虑更换。 3 进入过滤器的气体应是除油去湿气体，相对湿度在 70%以下，以保证过滤器 的最佳过滤效率； 4 气体过滤器之后连接液体负载（例如发酵罐）时，过滤器应安装在高于液面 的平台上， 出气口端应安装性能良好的止回阀，以防管路系统异常时出现反 压或负载中的液体反向进入气体过滤器中导致过滤器受损； 5 如需对过滤器进行蒸汽消毒时，首先必须排尽蒸汽管路中的冷凝水，蒸汽压 力不要超过 0.1MPa。 蒸汽过滤器使用说明书 安装步骤 1 2 彻底清洗过滤器壳体； 将外壳进出口管与过滤系统管路相连。连接时注意方向，确保滤芯为外侧进 蒸汽、内侧出蒸汽状态； 3 将滤芯开口一端的塑料袋打开，垂直将滤芯插入滤芯座内，拧上压钉。注意 压钉不能拧的过紧，以滤芯不晃动为宜； 4 将所有的滤芯插好后，去掉滤芯包装袋，再扣上压板固定，然后将金属罩壳 安装好； 5 在对滤芯进行灭菌时，先稍微打开入口阀，使蒸汽进入壳体，然后再打开排 污阀，排尽蒸汽管路中的冷凝水。等排尽冷凝水后，再关上排污阀。 6 在关上排污阀的同时，缓慢打开下游出口阀，直至完全打开，开始对滤芯进 行消毒； 使用注意事项 1 2 操作时应防止压力冲击，禁止反向加压； 当过滤器上、下游之间的压力降大于 0.3MPa 或流量明显下降时，应考虑更 换滤芯； 3 在对过滤器进行蒸汽灭菌时，必须注意蒸汽压力不要超过 0.1MPa。同时过 滤器上、下游的蒸汽压力降不要超过 0.015MPa，如果对湿态的滤芯进行蒸 汽灭菌， 通入蒸汽前应先用干净的压缩空气将滤芯所吸收的液体排尽，否则 通入蒸汽时会损坏滤芯。 4 灭菌周期确定必须根据实际使用情况逐级总结，如发酵生产较稳定，可采取 定期灭菌，灭菌周期可定为一个月、二个月不等，采用定期灭菌，当生产停 罐时，精过滤器必须采用保压流通，以免细菌进入。 关于聚四氟乙烯滤芯使用参数 过滤精度 0.01um 过滤效率 99.99997% 扩散流泡点＞0.05MPa 液体过滤器使用说明书 安装步骤 1 2 彻底清洗过滤器壳体； 将外壳进出口管与过滤系统管路相连。连接时注意方向，确保滤芯为外侧进 蒸汽、内侧出水状态； 3 将滤芯开口一端的塑料袋打开，检查 O 形圈是否完好。 4 5 用合适的湿润剂（例如水）湿润 O 型圈和滤芯座插孔； 手握滤芯靠近 O 型圈的一端，垂直将滤芯插口完全插入滤芯座插口内； 6 将所有的滤芯插好后，去掉滤芯包装袋，再扣上压板固定，然后将金属罩壳 安装好； 7 8 打开外壳顶部的放气阀； 稍微打开入口阀，使液体进入壳体，直到液体从壳体顶部的放气阀溢出，此 时关闭放气阀； 9 缓缓打开下游出口阀，直至完全打开； 10 缓缓打开入口阀，直至完全打开，此时过滤器上下游压力降为 0.02MPa(确 定流量下的初始压降)； 使用注意事项 1 2 操作时应防止压力冲击，禁止反向加压； 当过滤器上、下游之间的压力降大于 0.3MPa 或流量明显下降时，应考虑更 换滤芯； 3 如果过滤器暂不使用，不要将滤芯凉干，而应将其浸泡在合适的灭菌溶液中 （或在壳体内注入此种溶液） ，重新使用前应将灭菌液冲洗干净； 4 在对滤芯进行灭菌时，先稍微打开入口阀，使蒸汽进入壳体，然后再打开排 污阀，排尽蒸汽管路中的冷凝水。等排尽冷凝水后，再关上排污阀。 5 在关上排污阀的同时，缓慢打开下游出口阀，直至完全打开，开始对滤芯进 行消毒； 6 在对过滤器进行蒸汽灭菌时，必须注意蒸汽压力不要超过 0.1MPa。同时过 滤器上、下游的蒸汽压力降不要超过 0.015MPa，如果对湿态的滤芯进行蒸 汽灭菌， 通入蒸汽前应先用干净的压缩空气将滤芯所吸收的液体排尽，否则 通入蒸汽时会损坏滤芯。 JPF 过滤器在线蒸汽灭菌操作规程 1、 适用范围 本规程适用于以饱和蒸汽作介质时的 JPF 过滤器（折叠式空气滤芯）在线灭 菌消毒。 2、 基本条件 2.1 蒸汽为饱和状态，其进气压力应大于 0.11MPa。 2.2 装置示意 3、 操作步骤 3.1 关闭空气进出口阀门 K1、K2，蒸汽阀门 Z2，微开 V2、V3、V4 阀。 3.2 打开蒸汽过滤器前置阀门 V1，排尽蒸汽管道中的冷凝水。 3.3 缓慢打开蒸汽阀门 Z1，待蒸汽平稳后缓慢打开蒸汽阀门 Z2。 3.4 调节 Z2、V3、V4 阀，使压力表读数保持在 0.1Mpa，稳定后开始计算灭菌 时间。 3.5 灭菌时间控制在 30 分钟。 3.6 30 分钟过后，关闭蒸汽阀门 Z1，V2、Z2、V3、V4 保持开启状态。 3.7 在压力表掉零前，缓慢打开空气阀门 K1，用空气吹干精滤芯、蒸汽滤芯及 空气管道、蒸汽管道中的水分。 3.8 吹干后，关闭 V2、Z2、V3，微开 V4 阀，以保持空气流动，待使用空气 时，打开空气出口阀 K2，关闭 V4 阀。 4、 注意事项 4.1 蒸汽灭菌的操作要点可归结为“两缓慢一控制” ：灭菌前缓慢打开进入精过 滤器的蒸汽阀门，灭菌时控制压力为 0.1Mpa，灭菌后空气阀门要缓慢打开。 4.2 灭菌蒸汽必须是饱和蒸汽，灭菌过程须专人看管，注意压力表读数的变化。 4.3 滤芯如用非水溶剂（例如酒精）作为介质使用过（例如测试） ，蒸汽灭菌前 必须将非水溶剂清洗干净，否则在作蒸汽灭菌时滤膜将会被破坏。 4.4 过滤器在短暂停用时须保持空气流动。
10. 空气过滤系统中经过什么无菌程度最高
空气过滤系统中经过前置高效过滤除菌流程，无菌程度最高。该流程采用高效率前置过滤设备，用压缩机抽吸作用，使空气先经中、高效过滤后进入空气压缩机，降低了主过滤器负荷。经过滤后，空气无菌程度相当高，再经冷却、分离，就可获得无菌程度更高的空气，供发酵培养过程使用。