过滤柱

1. 几种柱层析的特点和在纯化工艺中的选择

分享到： 收藏推荐 在过去的三十年中,分离生物大分子的各种技术和方法得到了不断的发展。随着各种介质的完善和商品化,使以填料为核心的柱层析技术在蛋白质等粗提后的纯化中起到了重要作用。本文在一定范围内,仅就其中几种最常用柱层析的特点和在纯化中的选择应用作一综述。一、几种柱层析的特点1凝胶过滤柱层析(ＧｅｌＦｉｌｔｒａｔｉｏｎＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ,ＧＦＣ)ＧＦＣ是以分子大小和形状为分离基础的。具体说就是利用不同大小分子通过凝胶滞留时间的差别来分离混合物的柱层析方法。另外一种说法是分离是以分子体积的大小为基础的,分子体积即分子溶剂化后的体积,受分子形状和相对分子质量两方面因素的影响。有时加入变性剂(尿素、盐酸胍等)以破坏蛋白质的三、四级结构,可以使分离主要受控于相对分子质量的大小。ＧＦＣ特别适用于分离相对分子质量大于2000的高分子化合物和相对分子质量差异大的混合物及低聚物。ＧＦＣ的分离不依赖于流动相和固定相的相互作用,所以不必使用梯度洗脱。但是由于电荷屏蔽的因素,为了降低填料与生物分子之间的相互作用,往往会适当提高盐浓度,至少高于005ｍｏｌ/ＬＮａＣｌ。

2. 请教sephacryl s-400的装柱要领

1.确定填料的用量。一般所销售的凝胶填料是浓度为2/3填充床体积的浆状物，因此应该根据柱体积决定所要用的凝胶体积。
（装填凝胶过滤柱时，填料床的均匀性非常重要 ）
2.将填料温和的悬浮于缓冲液，或者水中，至体积为所需填充床体积的两倍。
（可以将凝胶置于真空下，进行脱气处理。以除去介质和缓冲液中所溶解的气体 ）
3.将柱子固定在稳定的支架上，并保证垂直，先向柱内加满缓冲溶液或水，检查是否漏水，再打开出液口，排除里面的气泡，特别是要排除床底支持物上的气泡。关闭出液口，往空柱中加入约为1/10柱体积的缓冲液。
4.用装柱器连续不断的将凝胶注入柱子中。
（凝胶应与层析柱的温度一致，装柱过程中温度也要恒定，同时，要严格防止气泡进入凝胶中，如果有，就必须重装 ）
5.让其静置沉降20-30min，然后用泵装压柱子。先以低流速装压柱子（一般采用层析样品时所用的流速 ），然后，当填料停止下沉后，将流速增至层析流速的150%左右，继续加压，直至填料不再进一步压缩为止。此时层析柱即装填完毕。
6柱效测定。

3. 过滤柱中为什么放棉花

是用于什么过滤柱？气体的？一般来说棉花用于过滤的作用就是阻挡气体中较大的颗粒。

4. 为什么要过滤柱要把细沙放在最上面

这个是很正常的呀，因为只有这样过滤的话才能保证过滤全面，否则的话容易出现过滤不达标的。

5. 微孔折叠滤芯有什么特点

折叠滤芯产品特点
1.杰出的化学兼容性，适合过滤强酸、强碱及有机溶剂
2.滤膜为折叠式深层过滤，膜过滤面积大
3.压差低，纳污能力强，使用寿命长
4.有多种过滤精度可选择
5.渐进式孔径变化提供超高纳污能力

6. 水的净化的过滤柱的活性炭可以改为木炭吗!

不可以！你首先要明白一个概念，木炭不是活性炭！活性炭是经过炭化和活化两个主要过程的产物，它的吸附能力不是简单的炭化就可以拥有的。

7. 过滤柱中顺序能否改变为什么

能，改变流动相的极性，pH等。
只要调整流动相与样品的亲和力，或者改变固定相的性质。
总体来说，柱子的分离原理就是靠流动相与固定相对样品的吸附能力不同，加以分离的。因此，只要调整合适的亲和比，就可以达到不同的保留时间

8. 液相色谱柱种类

色谱柱按用途可分为分析型和制备型两类

①常规分析柱（常量柱），内径2~5mm,柱长10~30cm；

②窄径柱（narrowbore），内径1~2mm，柱长10~20cm；

③毛细管柱（又称微柱microcolumn），内径0.2~0.5mm；

④半制备柱，内径＞5mm；

⑤实验室制备柱，内径20~40mm，柱长10~30cm；

⑥生产制备柱内径可达几十厘米。

(8)过滤柱扩展阅读

色谱柱的性能除了与固定相性能有关外，还与填充技术有关。在正常条件下，填料粒度>20um时，干法填充制备柱较为合适；颗粒<20um时，湿法填充较为理想。填充方法一般有四种：

①高压匀浆法，多有用于分析柱和小规模制备柱的填充；

②径向加压法，Waters专利；

③轴向加压法，主要用于装填大直径柱；

④干法，柱填充的技术性强，大多数实验室使用己填充好的商品柱。

必须指出，高效液相色谱柱的获得，装填技术是重要环节，但根本问题还在于填料本身性能的优劣，以及配套的色谱仪系统的结构是否合理。

9. 水的净化的过滤柱的活性炭可以改为木炭吗!

你好！
活性炭可以说是木炭的深加工产品。
活性炭与木炭最大的区别就是“吸附性”,
产生吸附性的原因是它有发达的孔隙结构，而这种孔隙结构是肉眼无法看见的，吸附能力是普通竹木炭的5倍，吸附值越高吸附能力就越强。活性炭吸水性：空气净化炭孔隙发达，吸水性好。取一粒用舌舔一下，会感到水分迅速被吸收，普通炭感觉不明显。
所以严格来说，木炭是不可以改为木炭的。
仅代表个人观点，不喜勿喷，谢谢。

10. 为什么做过滤柱要把细沙放在最上面

反了吧，应该是细沙在最底下，较粗的石砾在上面