⑴ 就是我在LB培养基里面加的卡那抗生素是怎么配制的,谁能告诉我
首先查找你所要的质粒的卡那霉素的工作浓度,(一般为50ug/ml,但不同质粒所用浓度不同),然后将卡那霉素配成贮存液(一般为200×),用0.22um滤器过滤除菌。例如,你配制20ml卡那霉素200×贮存液,则称取0.2g卡那霉素,20ml水溶解。
接着你就可以配制LB培养基了,灭菌后,加入卡那霉素贮存液,配制成工作浓度。例如,500ml培养基加入2.5ml 200×卡那霉素贮存液,稀释成工作浓度。液体培养基待冷却后加入,固体培养基待冷却至40-60℃左右加入,混匀,倒板。
⑵ 抗生素发酵提取的具体步骤是怎么做的,有懂的人吗
首先是过滤把菌体和发酵液分开来,如果抗生素是胞外的(基本都是),也就是说抗生素在发酵液中,可采取萃取、醇沉水提、膜过滤、树脂吸附等方法来提取(不同抗生素有不同的方法);如果是胞内的,就需要用超声或其他方法进行菌体破碎,然后再提取,基本就是用浸提的方法。
⑶ 抗生素供试品选择什么材质的微孔滤膜
水溶性的用混合纤维素滤膜或醋酸纤维素滤膜
脂溶性的用PVDF滤膜或PTFE滤膜
⑷ 用无水乙醇配制的红霉素需要过滤除菌吗
一般不需要除菌的,无水乙醇本来就不能长菌,如果一定要做过滤的操作的话,可以选用0.33μm的过滤器,用注射器装乙醇,然后通过过滤器过滤到已灭菌的容器里,当然,要在超净台里操作。这样就没问题了,一般抗生素,溶菌酶什么的都是这么过滤的。
⑸ 培养基中加抗生素怎么灭菌
首先确定您的灭菌方法对抗生素的药效有无影响,如无影响 按需要浓度把抗生素定量加入培养基中就可以,然后一起灭菌。如果有影响就要再灭菌完后将抗生素过滤除菌再定量加入
⑹ 抗生素的配制
过滤除菌···没听说过
巴氏灭菌法 (低温)
⑺ 抗生素是怎么做的,自己可以做吗
LZ您好
首先我回答你后一个问题吧
抗生素理论上自己可以做...甚至高中实验范围就可进行简单的抗生素提取。
接下来是怎么做。
我先告诉你一个概念:
抗生素,是指由微生物(包括细菌、真菌、放线菌属)或高等动植物在生活过程中所产生的具有抗病原体或其他活性的一类次级代谢产物,能干扰其他生活细胞发育功能的化学物质。
所以,你有培养过细菌,真菌等……理论就有提取其抗生素的机会。
嗯?你说你没培养过细菌真菌??我就问你你有没有忘了吃饭结果米饭发霉?忘了吃面包结果面包长毛?那就是真菌。
当然上面导致发霉的细菌真菌不一定是我们要的,然而其中有一种叫青霉的,就是世界上第一个被我们人类提取并利用的抗生素的青霉素的来源。
所以譬如高中生物实验,应该就有菌类接种这一课。(见于高中生物选修1,微生物培养一节)
该章节就有详细描述菌种接种的基本方法,包含灭菌操作,培养基,划线操作等过程。以及之后培养过程。
接下来有了真菌培养(假设),我们得到了他发酵分泌物,那么接下来就是化学实验了。当然不同的抗生素提取工艺不一样(毕竟不同的抗生素其理化性质不一样)。譬如青霉素有土法是加入菜籽油,进行萃取;土霉素则是草酸酸化,再用黄血盐除去蛋白质,再树脂吸附,调节PH…………
当然也有更为进步的工艺。纯度可以更好。
当然,以上我只想说,抗生素确实可以自己动手做,但做出来纯度能不能达到商品标准就是另一回事了。
还有,就是产量,什么样的霉菌能多产,什么霉菌产量较少,如何淘汰产量少的菌种,就是别的问题了。
再有,进行实验,制取研究就算了。如果进行商品化,药用等,还必须取得特定的许可。这种行政问题在此也不加赘述了。
⑻ 急!抗生素溶液的配置问题
琼脂稀释法配制带药平板
如果是测试微生物的耐药性,可按以下步骤配制,如果只是用于筛选某些菌,只要配制好抗生素母液按照步骤(3)操作即可。
(1)抗生素药物溶液:按产品说明书配制各种抗生素药物原液,浓度应不低于1000μg/ml或10倍于最高测试浓度,除非药物的溶解度有影响。将原液对倍稀释形成浓度梯度,与培养基混合后的最终浓度可依次为512μg/ml,256μg/ml;128μg/ml;64μg/ml;32μg/ml;16μg/ml;8μg/ml;4μg/ml;2μg/ml;1μg/ml;0.5μg/ml;0.25μg/ml和0.125μg/ml。按实验室的具体需求选用适当的药物浓度范围。抗生素药物原液应贮存在-60℃或更低温度,保存期不超过6个月,期间需用标准质控菌株检测其效价。
(2)培养基:M-H琼脂为常规细菌药敏试验的最佳培养基,其pH应为7.2~7.4,用于葡萄球菌属对甲氧西林、苯唑西林和萘夫西林的耐药性检测则需添加2%NaCl。
(3)配制带药培养基:配制时加水量应减少1/10,以备添加稀释好的抗生素溶液。灭菌后水浴冷却至48~50℃,逐个将各个浓度的抗生素溶液以1:10加入M-H琼脂中,充分混匀,倾注平板,配制完成后于0~4℃保存,用于质控试验的平板保存期限为5天,用于常规试验的可略有延长。
一般不用考虑抗生素溶液的杂菌问题,不过如果有条件,可以采用膜过滤的方法过滤除菌,再用于带药平板的配制。