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秋水仙素过滤灭菌

发布时间:2021-03-25 17:42:26

1. 秋水仙素溶液怎么配制秋水仙素溶液是否能高压灭菌

1.0g/L秋水仙素溶液的配制:称取20 mg秋水仙素,加入8.5g/L NaCl溶液20mL,待完全溶解后,经5.516×104Pa(81bf/in2)15min高压蒸汽灭菌后避光保存于4oC冰箱中。

取10.0g/L秋水仙素溶液1mL加入8.5g/L NaCl溶液99mL即10µg/mL的秋水仙素。使用时取10µg/mL的秋水素溶液0.1mL,用8.5g/L NaCl稀释至1mL即为1µg/mL的秋水仙素溶液。

2. 在培养基中加入过滤灭菌的秋水仙素,接入叶片5天后叶片周围一圈白色的液体包围,是污染了吗

这是你在接种叶片时,叶片上或者接种过程中携带了霉菌或者放线菌,你看到的白色液体包围,其实不是液体,而是霉菌菌丝之类的结构造成的,其中霉菌的孢子往往很难去除掉。多注意一下接种过程中的各种预防污染的措施可以大大降低出现这种情况的可能性。此时接种的叶片肯定已经不能用了,重新做吧!

3. 请教:自己用粉末配的秋水仙素如何保证无菌

配好后在超净台内,吸入注射器内,注入过滤灭菌器(一般实验公司和淘宝都有卖的)过滤了,滤液装入灭菌后的空瓶就行了。

4. 幼苗利用秋水仙素处理的作用原理

秋水仙素(C22H25O6N)是1937年发现的,是从百合科植物秋水仙的种子和球茎中提取出来的一种植物碱。它是白色或淡黄色的粉末或针状结晶,易溶于冷水、酒精和氯仿,难溶于热水、乙醚等,熔点155℃。一般多使用它的水溶液。实验表明,有效的诱变浓度是0.0006—1.6%,以0.2%的浓度诱变效果最好。此药有剧毒,在应用时要特别注意。秋水仙素是诱变多倍体效果最好的药剂之一。秋水仙素的作用机理:当细胞进行分裂时,一方面能使染色体的着丝点延迟分裂,于是已复制的染色体两条单体分离,而着丝点仍连在一起,形成“X”形染色体图象(称为C-有丝分裂,即秋水仙效应有丝分裂);另一方面是引起分裂中期的纺锤丝断裂,或抑制前期纺锤体的形成,结果到分裂后期染色体不能移向两极,而重组成一个双倍性的细胞核。这时候,细胞加大而不分裂,或者分裂成一个无细胞核的子细胞和一个有双倍性细胞核的子细胞。经过一个时期以后,这种染色体数目加倍了的细胞再分裂增长时,就构成了双倍性的细胞和组织。秋水仙素不论是破坏还是抑制纺锤体的形成,作用都是一时的。秋水仙素可以抑制纺锤体的形成,导致细胞不分裂,——然后过一段时间秋水仙素代谢掉,不再起作用,细胞继续分裂,——然后才是“染色体数目加倍”(着丝点的分裂)。着丝点的分离与纺锤体无关,因为在用秋水仙素处理,破坏微管的情况下,两条单体也可以分开。这是由于Ca离子的诱导,使着丝点分开后,再由纺锤体牵引移向两极,也就是说纺锤体只起牵引染色体的作用。 秋水仙素之所以造成两个方面的应用,是在于他们在利用时,秋水仙浓度的不同。用于中期核型分析的浓度较高而用于产生双倍体或多倍体时浓度较低,并且当秋水仙素浓度很低时,还有加快染色体运动,使染色体更快的到达两极!那么如何确定作用时期呢?现在我们已经确定秋水仙素的作用是抑制或破坏纺锤体微管的形成。在分裂前期,“胞质微管网络中的微管去装配,游离的微管蛋白亚单位组装为纺锤体。”可见,秋水仙素的作用时期应该为细胞有丝分裂的前期,因为研究育种时常用来处理萌发的种子或幼苗。

5. 秋水仙素用微孔滤膜来灭菌滤膜孔有多大

过滤除菌一般都用0.22微米。

6. 秋水仙素抑制细胞分裂的具体原理是什么

通过抑制纺锤体的形成,从而使细胞在完成了染色体复制后,不能分配到两个细胞中。使得细胞中染色体数目加倍。

7. 秋水仙素能否高温灭菌

纯秋水仙素呈黄色针状结晶,熔点157℃。易溶于冷水、乙醇和氯仿。
高温湿热灭菌会使它部分溶解,但可以尝试一下,毕竟它难溶于热水;
高温干热灭菌(最低为150℃灭菌)会使它融化,建议不用高温干热灭菌。
秋水仙素的化学性质比较稳定(提取过程中有蒸馏步骤),应该不会失去作用。

8. 用过的秋水仙素怎样处理才能不污染环境呢

秋水仙素易吸收空气中的水分和二氧化碳生成次氯酸而失效,所以应保持在密闭的容器里,存放于干冷处。
针对生化上使用的试剂,即使知道其物化性质,也不做处理,而是按照其物化特性保存起来,交给专门机构处理。不过,(题外话)国内高校和科研院所在生化和有毒试剂处理方面存在一些问题,主要是没有统一回收集中处理,现在,在这方面越来越注意了。

如果用热碱,那得知道秋水仙素的浓度,然后配置浓度为秋水仙素浓度十分之一(二十分之一或者五十分之一)的均可,然后滴加到废液中,保证最终热碱的量大于秋水仙素的量即可。

9. 用秋水仙素处理大肠杆菌

不会
秋水仙素的作用是影响纺锤丝的形成,使得姐妹染色单体不能分开,从而导致细胞不能正常完成分裂,形成多倍体细胞。
大肠杆菌是原核生物,没有想真核生物一样的有丝分裂。即,在分裂期没有染色体出现,也不需要出现纺锤丝。秋水仙素或许对大肠杆菌的细胞分裂有其他影响,但绝对不会让它的DNA加倍。

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