污水中提取噬菌体

① 如何从污水（或土壤）中提取微生物

把污水加蒸馏水分别稀释10，100，1000倍，然后加入培养基中培养，如果培养出来菌落重合，菌非常多，无法分离，就加大稀释倍数，直至获得清晰可分离的菌落，有时甚至是非常小的菌落，要用倒置显微镜操作。而培养基则根据要分离的菌的营养类型进行配置，若要获得多种微生物就要配置多种培养基进行如上操作。对于土壤加水溶解，对溶解液进行如上操作，不溶的部分就不用管了

② 为什么噬菌体可以去除污水中的致病微生物

噬菌体可以去除污水中的致病微生物，噬菌体可以吞噬微生物。

③ 噬菌体纯化不成功

没有严格按照实验步骤。
噬菌体是专性寄生物，所以自然界中凡有细菌分布的地方，均可发现其特异的噬菌体的存在，亦即噬菌体是伴随着宿主细菌的分布而分布的，例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌，故也能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体；乳牛场有较多的乳酸杆菌，也容易分离到乳酸杆菌噬菌体等。
纯化过程会长出的分离的单个噬菌斑，其形态、大小常不一致，再用接种针在单个噬菌斑中刺一下，小心采取噬菌体，接入含有大肠杆菌的液体培养基内， 37 ℃培养。

④ 微生物学基础，微生物的特征检查噬菌体有哪些方法

5 方法
5.1 噬菌体的检查
5.1.1 样品采集
将2～3g土样或5mL水样（如阴沟污水）放入灭菌三角瓶中，加入对数生长期的敏感指示菌（大肠杆菌(Escherichia coli)）菌液3～5mL，再加20mL二倍肉汤蛋白胨培养液。
5.1.2 增殖培养
30℃振荡培养12～18h, 使噬菌体增殖。
5.1.3 离心分离
将上述培养液以3000rpm离心15～20min, 取上清液，用pH7.0，1%蛋白胨水稀释至10-2～10-3，用于噬菌体检查及效价测定。
5.1.4 生物测定法
5.1.4.1双层琼脂平板法
5.1.4.1.1 倒下层琼脂
融化下层培养基，倒平板（约10mL/皿）待用。
5.1.4.1.2倒上层琼脂
融化上层培养基，待融化的上层培养基冷却至50℃左右时，每管中加入敏感指示菌 (大肠杆菌(Escherichia coli)) 菌液0.2mL，待检样品液或上述噬菌体增殖液0.2～0.5mL，混合后立即倒入上层平板铺平。
5.1.4.1.3恒温培养
30℃恒温培养6～12h观察结果。
5.1.4.1.4 观察结果
如有噬菌体，则在双层培养基的上层出现透亮无菌圆形空斑──????噬菌斑。
5.1.4.2 单层琼脂平板法
省略下层培养基，将上层培养基的琼脂量增加至2%，融化后冷却至45℃左右，如同上法加入指示菌和检样，混合后迅速倒平板。30℃恒温培养6～16h后观察结果。
5.1.5 离心分离加热法（快速检查）
取大肠杆菌(Escherichia coli)正常培养液和侵染有噬菌体的异常大肠杆菌(Escherichia coli)培养液，4000rpm离心20min，分别取两组发酵液的上清液(A1)，一部分于721分光光度计上测定OD650光密度值，另外各取5mL上清液于试管中，置水浴中煮沸2min（A2），检测A2溶液OD650光密度值，记录结果。
5.2 噬菌体效价的测定
5.2.1 倒平板
将融化后冷却到45℃左右的下层肉膏蛋白胨固体培养基倾倒于11个无菌培养皿中，每皿约倾注10mL培养基，平放，待冷凝后在培养皿底部注明噬菌体稀释度。
5.2.2 稀释噬菌体
按10倍稀释法，吸取0.5mL大肠杆菌(Escherichia coli)噬菌体，注入一支装有4.5mL1%蛋白胨水的试管中，即稀释到10-1，依次稀释到10-6稀释度。
5.3 噬菌体与菌液混合
将11支灭菌空试管分别标记10-4、10-5、10-6和对照。分别从10-4、10-5和10-6噬菌体稀释液中吸取0.1mL于上述编号的无菌试管中，每个稀释度平行做三个管，在另外两支对照管中加0.1mL无菌水，并分别于各管中加入0.2mL大肠杆菌(Escherichia coli)菌悬液，振荡试管使菌液与噬菌体液混合均匀，置37℃水浴中保温5min，让噬菌体粒子充分吸附并侵入菌体细胞。
5.4.4 接种上层平板
将11支融化并保温于45℃的上层肉膏蛋白胨半固体琼脂培养基5mL分别加入到含有噬菌体和敏感菌液的混合管中，迅速搓匀，立即倒入相应编号的底层培养基平板表面，边倒入边摇动平板使其迅速地铺展表面。水平静置，凝固后置37℃培养。
5.5 观察并计数
观察平板中的噬菌斑，并将结果记录于实验报告表格内，选取每皿有30～300个噬菌斑的平板计算噬菌体效价。
计算公式： N=Y/V?X
（N：效价值，Y：平均噬菌斑数／皿，V：取样量，X：稀释度）
例如：当稀释度为10-6时，取样量为0.1 mL/皿，同一稀释度中3个平板上的噬菌斑的平均值为186个，则该样品的效价为：N＝186／0.1×10-6＝1.86×109。

6 结果
6.1 噬菌体检查
6.1.1离心分离加热法
处理方法 OD650光密度值
正常发酵液（对照） 异常发酵液（试验）
离心上清液(A1)
离心上清液加热煮沸后(A2)
A2/A1
6.1.2 绘出平板上的噬菌斑检测结果，指出噬菌斑和宿主细菌。
6.2 噬菌体效价测定
6.2.1 平板上噬菌斑数目
噬菌体稀释度 10-4 10-5 10-6 对照
噬菌斑数（个）/皿
平均每皿噬菌斑数目
6.2.2 计算噬菌体效价(即噬菌斑形成单位pfu, plague-forming unit).
7 思考
1有哪些方法可检查发酵液中确有噬菌体存在？比较其优缺点。
2测定噬菌体效价的原理是什么？要提高测定的准确性应注意哪些操作？
3噬菌体与菌液混合后保温时间越长其吸附率越高的说法对吗？
回复
吸收率：在噬菌体和过量菌液混合后，菌/噬菌体混合液中未感染的噬菌体颗粒经过氯仿处理后，在不同时间点检测其数量。一般情况下几分钟内噬菌体即可大部分吸附到宿主菌上.
潜伏期：细菌与噬菌体混合作用5分钟后，彻底清洗以除去未结合的噬菌体。然后用新鲜的培养基重悬至相同体积。该重悬液在370C下孵育，其间有规则地收集噬菌体测滴度。
裂解量指的是单个宿主细菌被噬菌体完全裂解后所释放的噬菌体数量.具体检测方法本人也不是很清楚.

⑤ Indigenous somatic coliphage removal from a real municipal 怎么翻译

中心语 coliphage (大肠杆菌)，
indigenous(本土的，此处应为当地种，) 和 somatic (somatic 与 coliphage 组合特指一种噬菌体(见楼上), )为前置定语
removal from a real municipal wastewater by a submerged membrance bioreactor 整体为后置定语 可以分为两个部分：
1. removal from a real municipal wastewater(从城市污水中去除，removal 是名词做定语的用法)
2. by a submerged membrance bioreactor (用/以全透性膜处理器)(半透膜是semipermeable membrane，所以这里应该是全透 )
整合成为 用全透性膜处理器从城市污水中提取的当地种大肠杆菌噬菌体

谢谢！

⑥ 论述污水处理的微生物学原理及主要的处理方式

参与污废水处理的生物主要有四类：
1.细菌类：在污水处理所利用的生物群中，细菌是体型最微小的一种，它具有在好氧及厌氧条件下分解吸收各种有机物的能力。对污水生物处理起作用的细菌有.菌胶团.球衣细菌.硝化菌.脱氮菌.聚磷菌等几种。
2.原生动物：原生动物具有吞食污水中的有机物，细菌，在体内迅速氧化分解的能力，因此在活性污泥法和生物膜中。它除了能除去的有机物，加快有机物的分解速度外，还能使生物膜的表面附着能力再生，原声动物是单细胞的好氧性生物。
3.藻类：藻类是植物，含有叶绿素，当叶绿素吸收二氧化碳和水进行光合作用而产生碳水化合物时将放出大量的氧于水中，稳定塘就是利用这种氧来氧化污水的有机物。
4：后生动物，以上所介绍的生物都是单细胞构成，体内还有各种器官，参与污水处理的后生动物，包括从形态较小的轮虫到栖息于生物滤池的甲壳虫，昆虫，幼虫等体形较大的种种类型。

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⑦ 印度恒河水，究竟有多脏其他人都不敢碰的水，为什么印度人喝了却没事

在印度人的心里，其“母亲河”恒河是圣洁无比的，实际上恒河已经受到了严重的污染，只不过是印度人给恒河加上了神圣的光环而已。

通过专家对恒河水质研究检测显示，其水质含有的细菌量超过国际规定的几百倍，可以说是世界上污染非常严重的河流。上游和下游的河水污染程度之严重导致外国游客都不敢碰，但是印度人不仅用恒河水洗衣服，而且做饭和喝水都是直接恒河水。

⑧ 水污染的建议

加强企业与城市污水排放标准管理,兴建污水处理场,清理和保护好河道卫生.简单说起来就这么几件,办好了就治理好了!

⑨ 什么是噬菌体，如何提取

你好
噬菌体是一种病毒，是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称，
病毒是提取不了的，可以提取噬菌体中的DNA
对人体应该无影响，它是专门侵染细菌的病毒
纯手打，望采纳

⑩ 污水处理的六个步骤是什么

1、废水首先经过格栅、筛网后流至絮凝沉淀池，为了使处理效果好，在絮凝沉淀池中加入混凝剂，使废水中悬浮物治理效果更好，混凝加药也起到调节废水的作用，絮凝沉淀后的废水流入预曝气调节池中。

2、曝气调节池中通入空气，起到预曝气调节的作用，调节均匀的废水用泵提升到一级浮动填料生化池中。

3、生化池中安装充氧效率很高的曝气头，并装入浮动填料，实践证明该项技术对COD和BOD有较高的去除效率，一级浮动填料生化池中废水自流入二级浮动填料生化池，二池采用方法相同。

4、二级浮动填料生化池水自流入斜板沉淀池中，池中加入聚丙烯蜂窝斜管，可大大提高沉降效率，另外水力负荷高，停留时间短，占地面积小。

5、混凝沉淀池与斜板沉淀池沉淀污泥排入污泥浓缩池中，然后经污泥脱水机械脱水。

6、斜板沉淀池排出的水流入清水池中，经检测后外排。

(10)污水中提取噬菌体扩展阅读：

污水处理一般来说包含以下三级处理：

一级处理是它通过机械处理，如格栅、沉淀或气浮，去除污水中所含的石块、砂石和脂肪、油脂等。一级处理具有投资少、成本低等特点，但是废水经过一级处理一般达不到符合国家排放标准所以还需要进行第二级处理。

二级处理是生物处理，污水中的污染物在微生物的作用下被降解和转化为污泥。使bod5降至20-30mg.l-1,经过二级处理后的水一般就可以达到国家排放标准了。

三级处理是污水的深度处理，它包括营养物的去除和通过加氯、紫外辐射或臭氧技术对污水进行消毒。