水和废水总大肠菌群滤膜法

A. 水体中大肠菌群如何检测

水的大肠菌群数是指100 mL水检样内含有的大肠菌群实际数值，以大肠菌群最近似数(MPN)表示。在正常情况下，肠道中主要有大肠菌群、粪链球菌和厌氧芽孢杆菌等多种细菌。这些细菌都可以随人畜排泄物进入水源，由于大肠菌群在肠道内数量多，所以，水源中大肠菌群的数量，是直接反映水源被人畜排泄物污染的一项重要指标。目前，国际上已公认大肠菌群是粪便污染的指标。因而对饮用水必须进行大肠菌群的检查。水中大肠菌群的检测方法，常用多管发酵法和滤膜法。多管发酵法可适用于各种水样的检验，但操作繁琐，需要的时间较长。滤膜法仅适用于自来水和深井水，操作简单、快速，但不适用于杂质较多、易于堵塞滤孔的水样。

B. 有什么方法可以简单的检验水质

1、看

用透明度较高的玻璃杯接满一杯水,对着光线看有无悬浮在水中的细微物质？静置三小时,然后观察杯底是否有沉淀物？如果有,说明水中悬浮杂质严重超标。

2、闻

用玻璃杯距离水龙头尽量远一点接一杯水，然后用鼻子闻一闻，是否有漂白粉（氯气）的味道？如果能闻到漂白粉（氯气）的味道，说明自来水中余氯超标。

3、尝

热喝白开水,有无有漂白粉（氯气）的味道,如果能闻到漂白粉（氯气）的味道,说明自来水中余氯超标！也必须使用净水器进行终端处理。

4、观

用自来水泡茶，隔夜后观察茶水是否变黑？如果茶水变黑，说明自来水中含铁、锰严重超标，应选用装有除铁、锰滤芯的净水器进行终端处理。

5、品

品尝白开水，口感有无涩涩的感觉？如有,说明水的硬度过高。

(2)水和废水总大肠菌群滤膜法扩展阅读：

检验项目

天然水、用水和废水的水质参数分别见河流自净、用水水质和废水水质。某些检验项目的制定与单位，决定于检验方法。例如反映粪便对水的污染，检验项目最好采用大肠杆菌。

但是，由于大肠杆菌的检验费事费时，一般常用大肠菌群为参数，采用的是多管发酵法，其单位按统计原理估计细菌个数，所以采用每升（或100毫升）最可能个数。

如果采用滤膜法检验，大肠菌群的定义和单位就要修改。类似这样的检验项目还有浑浊度、色度、臭、味、悬浮固体、可沉固体等。

C. 请问总大肠菌群是指什么啊

大肠菌群不代表某一个或某一属细菌，而指的是具有某些特性的一组与粪便污染有关的细菌，这些细菌在生化及血清学方面并非完全一致。

其定义为：需氧及兼性厌氧、在37℃能分解乳糖产酸产气的革兰氏阴性无芽胚杆菌。一般认为该菌群细菌可包括大肠埃希氏菌、柠檬酸杆菌、产气克雷伯氏菌和阴沟肠杆菌等。

(3)水和废水总大肠菌群滤膜法扩展阅读：

大肠菌群都是直接或间接地来自人或动物的粪便。而大肠菌群超标可能由于产品的加工原料、包装材料受污染，或在生产过程中产品受到人员、生产设备的污染，或产品灭菌不彻底而导致的。

大肠菌群存在于人畜肠道内，是一个能反映食品被粪便污染情况的指标，结果为每100ml（g）样品中大肠菌群的最近似数，而超标就意味着该食品可能被人畜粪便污染。粪便中除了正常细菌外，还可能存在一些肠道致病菌，即能够引起人们发病的细菌。

D. 为什么用大肠杆菌来测水质污染程度

大肠杆菌的数量是一个很重要的水质标准。（溶解氧及大肠杆菌是两项可反映海水水质的重要参数。）
然后有人拿草履虫测铜离子浓度，（铜离子多了也是很有害的。）
要知道水质污染生物监测一般包括：生物群落法、细菌学检验法、水生生物毒性测定等等，所以很多生物都用于测定，而且像细菌检定是不看各个种类的细菌分别有多少的。

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水质污染生物监测
水环境中存在着大量的水生生物群落,各类水生生物之间及水生生物与其赖以生存的环境之间存在着互相依存又互相制约的密切关系.当水体受到污染而使水环境条件改变时,各种不同的水生生物由于对环境的要求和适应能力不同而产生不同的反应,因此可用水生生物来了解和判断水体污染的类型,程度.
用水生生物来监测研究水体污染状况的方法较多,如生物群落法,生产力测定法,残毒测定法,急性毒性试验,细菌学检验等.
2.6.1 生物群落法
(1)指示生物:生物群落中生活着各种水生生物,如浮游生物,着生生物,底栖动物,鱼类和细菌等.由于它们的群落结构,种类和数量的变化能反映水质状况,故称之为指示生物.
(2) 监测方法
1.污水生物系统法
该方法将受有机物污染的河流按其污染程度和自净过程划分为几个互相连续的污染带,每一带生存着各自独特的生物(指示生物),据此评价水质状况.
如根据河流的污染程度,通常将其分为四个污染带,即多污带,α-中污带β-中污带和寡污带.各污染带水体内存在着特有的生物种群.
2.生物指数法
是指运用数学公式反映生物种群或群落结构的变化,以评价环境质量的数值.
贝克生物指数(BI)= 2nA + nB BI=0时,属严重污染区域,BI=1-6时,为中等有机物污染区域,BI=10-40时,为清洁水区.
2.6.2细菌学检验法
水的细菌学检验,特别是肠道细菌的检验,在卫生学上具有重要意义.实际工作中,常以检验细菌总数,特别是检验作为粪便污染的指示细菌,来间接判断水的卫生学质量.
2.6.2.1 水样的采集
:严格按无菌操作要求进行,防止在运输过程中被污染,并应迅速进行检验.
2.6.2.2 细菌总数的测定
细菌总数是指1mL水样在营养琼脂培养基中,于37℃经24小时培养后,所生长的细菌菌落的总数.它是判断饮用水,水源水,地表水等污染程度的标志.
其操作过程如下:1)灭菌 ;2)制备营养琼脂培养基 ;3)培养(二份平行样,一份空白) ;4)菌落计数.
2.6.2.3 总大肠菌群的测定
总大肠菌群是指那些能在35℃,48小时之内使乳糖发酵产酸,产气,需氧及兼性厌氧的,革兰氏阴性的无芽孢杆菌,以每升水样中所含有的大肠菌群的数目来表示.
总大肠菌群的检验方法富有发酵法和滤膜法.发酵法可用于各种水样(包括底泥),但操作繁琐,费时间.滤膜法操作简便,快速,但不适用于浑浊水样.
2.6.2.4其他细菌的测定
2.7 底质监测
底质是沉积在水体底部的堆积物质的统称,是矿物,岩石,土壤的自然侵蚀产物,是生物活动及降解有机质等过程的产物.一般不包括工厂废水沉积物及废水处理厂污泥.底质是水体的主要组成部分.

E. 滤膜法测大肠杆菌的培养基

（1）过滤待测水样需要用到滤杯、滤膜和滤瓶，这些实验仪器都需要经过灭菌处理，与过滤有关的操作都要在酒精灯火焰旁进行，防止杂菌的污染．
（2）待测水样过滤完之后，还有部分细菌吸附在滤杯杯壁上，此时可以在无菌条件下，用无菌水冲洗滤杯，再次过滤，将这部分细菌也尽可能集中到滤膜上．
（3）将完成过滤之后的滤膜紧贴在EMB培养基上，属于微生物培养中的接种操作．从功能上看，该培养基中含有伊红美蓝，因此EMB培养基属于鉴别培养基．
（4）无菌操作下将90ml无菌水加入到10ml待测水样中，这样就将待测水样稀释了10倍；根据大肠杆菌鉴定的原理可知，黑色菌落为大肠杆菌，因此1升待测水样中的大肠杆菌数目=5×（1000÷10）=500个．
（5）若要测定待测水样中酵母菌的数目，酵母菌属于真核生物，大肠杆菌属于原核生物，真核细胞的直径比原核细胞大，因此应更换上述过滤装置中的滤膜，选择孔径更大的滤膜．
故答案为：
（1）滤杯、滤膜和滤瓶
（2）无菌条件下用无菌水冲洗滤杯，再次过滤
（3）接种 鉴别
（4）10 500
（5）更大

F. 水中大肠杆菌滤膜法检验

1. 消毒设备按照产品使用说明操作，待设备运转正常后，取水样进行消毒效果检验。消毒剂发生器按照产品使用说明书操作，待设备运转正常后，在出口处采集样品，按说明书规定的有效剂量稀释后，进行消毒效果检验。消毒剂按产品使用说明书稀释配制水样。2. 细菌加标操作程序(1) 在脱氯自来水中加入大肠杆菌，实验用菌种为大肠杆菌8099。加标量为>5×100-2×1000/100ml。(2) 将装有加标菌水样的三角烧瓶放入恒温水浴箱(20℃)中，开动磁力搅拌器5min，使细菌在水中分布均匀。先取2份细菌加标的水样，进行大肠杆菌活菌计数(阳性对照组)。(3) 待水温恒定后按说明书规定的最小剂量加入消毒剂，迅速搅拌均匀，从加入消毒剂起计时。设定3个工作时间，说明书规定的最短作用时间为T，3个作用时间分别为0.5T，T和1.5T，作用后分别吸取水样，注入装有中和剂(如硫代硫酸钠)无菌三角烧瓶中，以终止消毒作用。 对饮用水消毒处理器和消毒剂发生器应根据消毒产物的产生量及处理水最高流量进行加标采样。(4) 将中和的水样，分别取100ml、10ml、1ml各两份，用滤膜法进行大肠菌活菌计数。(5) 将未接种大肠杆菌的试验用同批培养基平板2个，置温箱中培养(阴性对照组)。试验重复三次。3. 上述试验同时，测定消毒成分和剂量，记录作用时间和水温。4. 结果评价消毒后水中大肠菌群指标应符合《生活饮用水水质卫生规范》规定5．√－ 必需测定项目 ； △ －如含有，需测定http://szbbs.soufun.com/2810026793~-1/23633781_23633781.htm

水中大肠菌群检验方法的改进
晁福环;芮期义;王新为;高明;欧阳川
<正> 水中细菌,包括致病菌与指标菌,因受自然条件或水处理过程的影响可以形成生理上存在缺陷,这些细菌称为损伤菌。损伤菌在适宜条件下仍可发育成正常菌落,可是直接暴露于含有抑制剂的选择性培养基时就不易生长。因此,现有远藤培养基滤膜法有可能使大肠菌检
【作者单位】：军事医学科学院卫生学环境医学研究所;军事医学科学院卫生学环境医学研究所;军事医学科学院卫生学环境医学研究所;军事医学科学院卫生学环境医学研究所;军事医学科学院卫生学环境医学研究所 300050 天津;300050 天津;300050 天津;300050 天津;300050 天津
【DOI】：cnki:ISSN:1004-8685.0.1991-01-021
【正文快照】：
水中细菌,包括致病菌与指标菌,因受自然条件或水处理过程的影响可以形成生理上存在缺陷,这些细菌称为损伤菌.损伤菌在适宜条件下仍可发育成正常菌落,可是直接暴露于含有抑制剂的选择性培养基时就不易生长.因此,现有远藤培养基滤膜法有可能使大肠菌检出菌数偏低,影响水质卫生学评价的准确性。为提高检出率,本文在水中大肠菌损伤状况及生长特点研究的基础上,对现用远膝培养基进行了改进研究. 一、天然水及经不同条件处理后水中大肠菌损伤状况见表l、2.裹l不同条件处理后水中大肠,抓伤状况实较条件翻伤和.。,卜飞,了气P侧价与脚脚日)‘t习分钟…
http://www.cnki.com.cn/Article/CJFDTotal-ZWJZ199101021.htm

1 材料 呋喃唑酮片（地产及市售，规格0．10g／片），混合纤维素酯微孔滤膜，孔径规格0．45μm、1．2μm、3．0μm，大肠杆菌CMCC（B）〔4〕、胆盐乳糖增菌液（BL）、伊红美蓝琼脂（EMB）及大肠杆菌生化反应用培养基均由中国药品生物制品检定所提供。

2 方法和结果 供试液先经离心，取上清液依次经过孔径为1．2μm或3．0μm的微孔滤膜和0．45μm的微孔滤膜过滤后取0．45μm的滤膜加入BL中增菌。
2．1 由于呋喃唑酮几乎不溶于水，故选用一次离心法、二次离心法和离心-滤膜法〔1，2〕以及离心-双重滤膜法进行方法比较，结果表明只有离心-双重滤膜结合法能确保阳性菌的检出。

表1 不同方法阳性菌的检出试验结果

方法 BL增菌48h EMB平板分离 大肠杆菌
检出结果
一次离心法 微混 未长菌落 未检出
二次离心法 澄清 未长菌落 未检出
离心-滤膜法 澄清 未长菌落 未检出
离心-双重滤膜法 混浊、产气 典型的大肠
杆菌菌落 检出

2．2 人工污染呋喃唑酮片大肠杆菌的检出情况 选用8批样品加入大肠杆菌进行人工污染5d后，采用离心-双重滤膜法进行检验，结果表明8批均能检出。
表2 人工污染大肠杆菌的阳性检出情况

药品
批次 BL增菌
48h EMB
平板分离 大肠杆菌
检出结果 检出率
％
8批 8批出现混
浊、产气 8批呈典型菌落 8批检出 100

注：上述EMB平板分离的典型菌落均经生化反应确认检出大肠杆菌
3 讨论

3．1 虽然呋喃唑酮在水中的溶解仅达40mg／L〔3〕，但由于呋喃唑酮在BL增菌液中的最低抑菌浓度即MIC为0．01mg／L〔4〕，采用一次离心、二次离心法均未能使BL增菌液中的浓度低于0．01mg／L，采用2次离心-滤膜法，则由于供试液经孔径0．45μm滤膜过滤时残留呋喃唑酮，当加入BL增菌液后，呋喃唑酮的浓度仍高于MIC，因此大肠杆菌仍无法繁殖，而本文采用的离心-双重滤膜法，既能除去水中溶解的微量呋喃唑酮，又能把离心后上清液残留的呋喃唑酮截留在孔径1．2μm或3．0μm的滤膜上，最大程度地降低孔径0．45μm滤膜上的呋喃唑酮，也降低了BL增菌液中的呋喃唑酮浓度，所以大大提高了阳性检出率。
3．2 人工污染大肠杆菌5d仍能检出，说明离心-双重滤膜法检验过程中不影响大肠杆菌在BL增菌液中的繁殖，能有效地保证样品的阳性检出率。
3．3 离心-双重滤膜法能在很大程度上解决难溶于水的抗菌剂在BL增菌液中的浓度，故对今后开展口服抗生素控制菌的检验具有较高的参考意义。
3．4 因埃希氏杆菌属的菌体，直径为0．4～0．7μm，长度为1．0～3．0μm，笔者认为采用3．0μm孔径的滤膜比1．2μm的滤膜可使实际检验效果更佳。同时，笔者也认为选择何种规格的滤膜可因样品而异，这方面还有待进一步深入探讨。http://www.wanfangdata.com.cn/qikan/periodical.articles/haixyx/haix99/haix9903/990393.htm

G. 大肠菌群怎么样测定

不同的产品可能检测方法略有不同，但是基本原理是差不多的。
主要是利用大肠菌群能在特定的培养基上产酸产气这个原理。
如果是食品行业，现在有新的国家标准了，GB4789.3-2008食品卫生微生物学检验——大肠菌群计数，那里有具体的步骤。买来培养基，照着做就行了。
还是不太懂的话可以找我啊！我就是从事这个行业的，天天和大肠菌群打交道，呵呵！

H. 滤膜法指的是什么

滤膜法是适用于杂质较少的水样或检测空气中浮菌数的方法。
1、滤膜法是检测水样中大肠细菌群的方法。将一定量水样注入已灭菌的微孔薄膜的滤器中，经过抽滤，细菌被截留在滤膜上，将滤膜贴于品红亚硫酸钠培养基上，经培养后计数和鉴定滤膜上生长的大肠菌群菌落，依据过滤水样计算每升或每100毫升水样中的大肠菌群数。操作简单、快速，主要适用于杂质较少的水样。
2、滤膜法是检测空气中浮菌数的方法。将定量的空气抽滤器通过微孔薄膜，带菌的尘粒即留滞在滤膜上，将滤膜贴于营养琼脂平皿上，培养后计数滤膜上生长的菌群数，根据气样量计算每立方米空气中的细菌总数。

I. 用滤膜法检测大肠菌群有何优点

滤膜法的优点：⑴与直接法比较可以检测大量的样品。
⑵浓缩效应使微生物的检测结果提高。
⑶带有菌落的滤膜可作为检测的永久记录存档。
⑷可见的菌落与样品量直接对应，得出定量结果。

J. 做生产用水微生物的细菌总数和大肠菌群德检测依据是什么

一、水质微生物及指示菌

在各种水体，特别是污染水体中存在有大量的有机物质，适于各种微生物的生长，因此水体是仅次于土壤的第二种微生物天然培养基。水体中的微生物主要来源于土壤，以及人类的动物的排泄物及污染。水体中微生物的数量和种类受各种环境条件的制约。

一般认为，水中微生物以革兰氏阴性杆菌占有较大优势。与其他水体相比，河水及溪水中革兰氏阳性菌相对较多，这是因为陆地微生物冲洗污染的缘故。

水体中的致病性微生物一般并不是水中原有微生物，大部分是从外界环境污染而来，特别是人和其它温血动物的粪便污染。水中常见的致病性细菌主要包括：志贺氏菌、沙门氏菌、大肠杆菌、小肠结炎耶尔森氏菌、霍乱弧菌、副溶血性弧菌等。

在实际控制中，对水质卫生质量的评价和控制，是无法对各种可能存在的致病微生物一一进行检测，而一般利用对指示菌的检测和控制，来了解水体是否受到过人畜粪便的污染，是否有肠道病原微生物存在的可能，从而评价水的质量，以保证水质的卫生安全。

目前，世界各国一般认为大肠菌群是指示水质受粪便污染较好的指示菌。

我国水质控制也采用大肠菌群作为指示菌，GB5749-85《中华人民共和国国家标准
生活饮用水卫生标准》规定，生活饮用水中大肠菌群每升不得超过3个。

在某些情况下，水体中的细菌总数也可指示水体受粪便等污染物污染的情况。这里的细菌总数其实是指营养琼脂培养后形成的菌落总数。目前世界各国对于控制饮用水的卫生质量，除采用大肠菌群等指标外，一般还采用细菌总数这个指标。我国GB5749-85《中华人民共和国国家标准
生活饮用水卫生标准》中规定生活饮用水细菌总数每毫升不得超过100个。

二、水质微生物检验方法

GB5750-85《中华人民共和国国家标准 生活饮用水标准检验法》提供了水质中细菌总数和总大肠菌群的检测方法。

（一）细菌总数的检测：

国家标准中，细菌总数是指1ml水样在营养琼脂培养基中，于37℃经24h培养后，所生长的细菌菌落的总数。

对生活饮用水，直接吸取1ml水样于平皿中，加入营养琼脂后混匀，37℃培养24h，进行计数。

对水源水，根据情况对样品进行10倍梯度稀释，选择适宜稀释液1ml，加注平皿，营养琼脂混匀，37℃培养24h，进行计数。

按照规定格式报告每毫升水中细菌总数。

（二）总大肠菌群的检测：

国家标准中，利用总大肠菌群作为粪便污染的指标。总大肠菌群是指一群需氧及兼性厌氧的，37℃生长时能使乳糖发酵，在24h内产酸产气的革兰氏阴性无芽胞杆菌。水样中总大肠菌群数的含量，表明水被粪便污染的程度，而且间接地表明有肠道致病菌存在的可能。

国家标准提供了多管发酵法及滤膜法检测总大肠菌群的方法。

多管发酵法检测总大肠菌群，分为三步：初发酵试验，平板分离，复发酵证实试验。初发酵试验，采用乳糖蛋白胨培养液37℃培养24h，观察产酸产气情况。对阳性管培养物，接种于品红亚硫酸钠培养基或伊红美蓝培养基，观察菌落特征，并进行革兰氏染色和镜检。对典型和可疑菌落，接种于乳糖蛋白胨培养液，进行复发酵证实试验，并根据标准所附检数表报告结果。

其中，对生活饮用水，初发酵试验接种水样总量300ml，即100ml接种2管，10ml接种10管，采用两个稀释度，12支发酵管。对水源水，初发酵试验接种水样总量55.5ml，即10ml接种5管，1ml接种5管，0.1ml接种10管，共采用三个稀释度，15支发酵管。两种接种方法，所用的检数表是不同的。

滤膜法检测总大肠菌群，就是利用微孔滤膜，过滤一定量水样，将水样中含有的细菌截留在滤膜上，然后将滤膜帖放在选择性培养基上（如品红亚硫酸钠培养基），经培养和证实试验后，直接计数滤膜上生长的典型大肠菌群菌落，并计算出每升水样中含有的总大肠菌群数。

三、说明：

1．菌落总数测定中，应选择合适的稀释度进行。生活饮用水，国家标准规定每毫升不得超过100个，因此可以直接吸取1毫升到平板进行培养。

2．培养时间。与食品中菌落计数不同，测定水中细菌总数，培养时间采用24h。

3．总大肠菌群的测定方法，由于饮用水和水源水可能的污染程度不同，因此采用不同的接种量，检数表也不相同。

4．当接种量超过1毫升时，一般采用多倍浓度培养液。如配制3倍浓缩乳糖蛋白胨培养液50mL，加入100mL水样后，总体积为150mL，培养液恢复到正常浓度。

5．滤膜法检测总大肠菌群，一般在检测较大量低浊度水样时采用，大量水样滤过滤膜后，水中所含有的所有细菌均截留在滤膜上。