Ⅰ 如何用蛋白濃縮管
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應回截留分子量答不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。
新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
(1)超濾管截留分子量3000擴展閱讀:
超濾濃縮離心管,最新推出專利產品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。
備有四種材質的超濾膜:聚醚碸、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取並回收,又可將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使濃縮液達到近乎完全回收;
Ⅱ 超濾膜的原理是什麼孔徑與分子量之間有關系嗎
超濾膜原理
超濾膜篩分過程,以膜兩側的壓力差為驅動力,以超濾膜為過濾介質,在一定的專壓力下,當屬原液流過膜表面時,超濾膜表面密布的許多細小的微孔只允許水及小分子物質通過而成為透過液,而原液中體積大於膜表面微孔徑的物質則被截留在膜的進液側,成為濃縮液,因而實現對原液的凈化、分離和濃縮的目的。
超濾膜孔徑與分子量之間的關系
超濾膜是一種具有超級「篩分」分離功能的多孔膜。它的孔徑只有幾納米到幾十納米,也就是說只有一根頭發絲的1‰!在膜的一側施以適當壓力,就能篩出大於孔徑的溶質分子,以分離分子量大於500道爾頓、粒徑大於2~20納米的顆粒。超濾膜的結構有對稱和非對稱之分。前者是各向同性的,沒有皮層,所有方向上的孔隙都是一樣的,屬於深層過濾;後者具有較緻密的表層和以指狀結構為主的底層,表層厚度為0.1微米或更小,並具有排列有序的微孔,底層厚度為200~250微米,屬於表層過濾。工業使用的超濾膜一般為非對稱膜。超濾膜的膜材料主要有纖維素及其衍生物、聚碳酸酯、聚氯乙烯、聚偏氟乙烯、聚碸、聚丙烯腈、聚醯胺、聚碸醯胺、磺化聚碸、交鏈的聚乙烯醇、改性丙烯酸聚合物等等。
Ⅲ 超濾管截留分子量與孔徑之間的對應關系是怎樣的
第一超濾管達不到100%的與孔徑完全一致。任何濾膜都達不到和標稱孔徑完全內一致,只能是無限的接容近孔徑。
其二分子量是質量,而孔徑是長度單位,原則上不具有匹配性。原因是,標的物的結構會直接影響過濾精度。球狀的和鏈狀的,分子量相同,但是用相同孔徑可以截住球狀的,而鏈狀的就會透過去。
因此,兩者之間沒有絕對的聯系。
Ⅳ 超濾蛋白 咪唑濃度在多少一下可以了
超濾蛋白不需要考慮咪唑的濃度
咪唑是小分子試劑,分子量68.07,正常的超濾管截留分子量一般都是3KD~10KD
咪唑這樣的小分子會直接透過濾膜進入到下層濾出液中,而蛋白會被留在上層溶液中
超濾蛋白如果不添加溶液,咪唑濃度是不會改變的,只會是提高蛋白的濃度
所以超濾蛋白不需要去考慮咪唑的濃度
Ⅳ 超濾離心管能分離蛋白和聚乙二醇嗎
超濾離心管可以用來分離蛋白和聚乙二醇的
聚乙二醇(PEG)是一種分子量內很小的試劑,而超濾管的容截留分子量一般是在3000道爾頓~10000道爾頓之間。絕大多數蛋白可以被截留在超濾管上層,而聚乙二醇可以穿透濾膜到達超濾管下層
所以超濾離心管可以用來分離蛋白和聚乙二醇的
Ⅵ 超濾膜一般有哪些材質,各有什麼特點
超濾膜主要有以下幾種材質:
根據的性能,超濾膜的材料可分為高分子材料和無機材料兩大類。高分子材料主要有纖維素類、聚楓類、聚醯胺類、聚烯烴、含氟類等;無機材料主要有陶瓷、金屬、玻璃、分子篩等。
1.纖維素類 :纖維素類膜材料是最早應用的超濾膜材料。主要包括:再生纖維素、二肼、聚醯亞胺、聚醚醯胺等。還有碳分子篩膜、不銹鋼醋酸纖維素、三醋酸纖維素、混合纖維素等。
2.聚烯烴類:聚烯烴類超濾膜材料主要包括聚氯乙烯、聚丙烯腈。
3.聚碸類: 聚碸類超濾膜材料主要包括聚楓、聚醚碸、磺化聚楓、聚苯碸和聚芳碸。
4.聚醯胺類: 聚醯胺類超濾膜材料主要包括聚碸醯胺、芳香族聚醯胺、芳香聚醯胺醯。
5.含氟聚合物:含氟超濾膜材料主要包括聚偏二氟乙烯、聚四氟乙烯。
6.無機材料:無機超濾膜材料主要包括陶瓷材料,如氧化鋁、氧化鋯、氧化硅、氧化鈦膜、多孔玻璃膜制備所需的碳分子篩、不銹鋼粉、多孔玻璃等材料(分相法)、溶膠-凝膠法、化學氣相沉積法等。無機膜具有優良的熱穩定性、化學穩定性和機械性能。
超濾膜分離是一種物理的分子篩分過程,所以它具有分離物無相際間變化,無質變等優點,特別適合保持風味和熱敏性物質處理。選擇超濾膜性能的優劣,主要取決於膜材料和成膜工藝條件,其中,膜材料是決定膜性能的主要參數。
Ⅶ 我們用超濾法提取多糖,多糖分子量是63000和263000,對應的超濾孔徑應該是多少
1、一種玉米浸泡水中提取、提純脂多糖的方法,其特徵是本方法通過分別採用超濾法、等電點法、三氯乙酸法三種方法分離玉米浸泡水中的蛋白質,再用納濾膜將浸泡水濃縮,並通過乙醇沉澱法進一步分離浸泡水中的蛋白質,最後,用活性炭將脂多糖從浸泡水中提取出來:(1)等電點法分離蛋白及普通多糖:用飽和氫氧化鈉溶液調節浸泡水中的PH值到7.3,將浸泡液通過分離機分離,在每分鍾3000轉轉速下離心25分鍾,分離沉澱上清液;(2)超濾法分離蛋白及普通多糖:選用截留分子量10萬的超濾膜,對上述上清液進行超濾,取過濾液;(3)三氯乙酸法分離蛋白及普通多糖:在上述濾液中加入占其體積0.5%的三氯乙酸,攪拌30分鍾,於每分鍾3000轉條件下離心25分鍾,分離出含蛋白及普通多糖的上清液;(4)濃縮:採用納米過濾裝置,將分離蛋白及普通多糖後的浸泡水濃縮6-10倍,經納濾膜過濾,取濃縮後的浸泡水;(5)再分離:在上述濃縮浸泡水中加入濃度為95%的乙醇,使浸泡水中乙醇濃度達到30%,攪拌5分鍾,於每分鍾2600轉下離心30分鍾,分離後取上清液;(6)提取:將上述上清液PH值調整為6.50,加入占其重量1.5-2.5%的經處理的活性炭,攪拌15分鍾,靜置10分鍾,最後過濾,分離取出吸附了脂多糖活性炭;(7)提純:將吸附了脂多糖的活性炭裝填於1.6×90厘米的色譜柱中,用10毫摩爾每升三羥甲基氨基甲烷-鹽酸/10毫摩爾每升氯化鈉進行洗脫,洗脫液流速為每小時8毫升,分步收集洗脫液,每管收集4毫升,共收集52管,將第27~36管洗脫液合並,冷凍乾燥;將DEAE-葡聚糖凝膠A-50裝填於1.6×40厘米的色譜柱中。取上述乾燥產物0.25克,溶於6毫升的10毫摩爾每升三羥甲基氨基甲烷-鹽酸/10毫摩爾每升氯化鈉中,將其加入色譜柱。用濃度依次增加的三羥甲基氨基甲烷-鹽酸/氯化鈉溶液進行洗脫,同時進行分步收集。每管收集6毫升,共收集60根管,洗脫劑流速為每小時8毫升;(8)脫鹽:將第34~52根管的洗脫液合並,用葡聚糖凝膠G-15層析柱進行脫鹽,以超純水洗脫,最後凍幹得到脂多糖成品。
Ⅷ 超濾截留分子量與膜孔徑
超濾膜截留的分子量 10000 30000 50000 60000 100000 200000 300000 500000 1000000..
對應超濾膜孔徑(μm) 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05 0.06 0.07 0.08 0.1
也就是說100kD(10萬)的截留分子量對應50nm的孔徑
Ⅸ 透過目標物分子量435,能用3k的超濾離心管嗎
不可以,這樣目標值截留率達不到,
3K 是3000切割分子量的膜,只能截留3000以上的物質,且截留率≈93%以上
如果您的目標物質435.建議採用卷式超濾膜或者納濾 選擇100分子量左右
Ⅹ 3kd的超濾管最大轉速
4000rpm。超濾離心管是凈水器中一個過濾物品,其中3KD指的是截留分子量,是使用分子量大小表示的超濾膜的截留性能,又稱作專切割分子量,而超濾管的最大轉速也是由截留性能所進行決定的,3kd的最大轉速為4000rpm,是一個最安全並且能源消耗較少的最大轉速。