導航:首頁 > 凈水問答 > 密理博超濾離心管所有型號

密理博超濾離心管所有型號

發布時間:2023-03-25 05:39:35

A. 哪種離心管不能高溫高壓滅菌

超濾離心管不能高溫高壓滅菌。根據相關信息查詢,否則會變形,不論是是密理博、頗爾還是賽多利斯的都不能。

B. millipore超濾管 可以用普通離心機嗎

【上海巴玖】提示您:一般的離心機達不到說明書上4000g的離心力。

C. transwell共培養的小室膜上要鋪膠不呢我用0.4um的孔徑,鋪什麼膠呢 我用的是密理博的懸掛式

細胞遷移實驗步驟(Neuroprobe的使用方法)

1.膜預處理
將48.5ml H2O +1.5ml 醋酸+150μL 鼠尾膠原置於50ml的離心管。在膜的粗糙面用鉛筆做標記,放入上述溶液中4度過夜。
實驗前將膜取出,放入裝有PBS的培養皿中漂洗一遍,再用飢餓培養基洗一遍,吸去培養基後加入新的飢餓培養基,放入37度培養箱中。
2. 處理細胞
將細胞消化,調濃度1×105個/ml,細胞遷移裝置下層加入166μl含有刺激因子的飢餓培養基。小心鋪好膜(粗面朝下),裝好塑料墊,固定上層裝置。上層加入100μl細胞懸液,遷移4-6h。
3. 固定
小心將膜取下來,在用PBS弄濕的濾紙上掛掉光滑面的細胞,在新的濾紙上粗面朝上放置,徹底晾乾。然後再甲醇里粗面朝上固定5min,徹底晾乾。
4. 染色
粗面朝下置於結晶紫染液中30min,取出膜用雙蒸水漂洗一遍,粗面朝上放在載玻片上,數細胞。
這個方法比transwell方便。與boyden chemper法類似。

Transwell法的步驟:
先把小室擦乾凈後在超凈工作台照紫外過夜。如新的小室省略此步。下一步將小室倒扣並小室的底部外側滴加0.1%(還是1%記不清了)的明膠室溫放置20-30分鍾。這是將細胞消化下來,調濃度。拿出24孔板加600ml的含有刺激因子的培養基。小室上還未乾的明膠甩掉,加細胞放入24孔板里。放入細胞培養箱培養4-6小室。拿出小室甩掉里邊的培養基。小心擦盡小室里邊的細胞(不能碰外邊)。將小室放入裝有600ml結晶紫的24孔板染色1小時。移到空的24孔板後即可在顯微鏡下觀察了。

D. pall和millipore的超濾系統哪個好用

兩個品牌各有所長,對實驗室用戶而言還是MILLIPORE的實用性更強

E. 超濾離心管怎麼使用

蛋白濃縮和換Buffer通常使用的超濾管,常用Millipore的Amicon-Ultra-15超濾管(MWCO10kD)。也有其它型號的、不同體積大小和MWCO超濾管可選,視目的蛋白的分子量與濃縮前體積、濃縮目標體積而定。可重復使用。
1、選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。開始離心超濾(離心機預冷至4度)。膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
4、當濃縮到剩下1ml時,【取50ul國產Bradford溶液,加入10ul流穿,看有沒變藍色,以此判斷超濾管是否漏掉蛋白。如果管漏了,將上層和流穿重新倒入新管中開始超濾。要精確判斷是否漏管,用5mg/ml的BSA離心10min,再取流穿,跑蛋白膠或Bradford粗測】,繼續加入剩下的蛋白液濃縮(在冰上操作,防止蛋白受熱),直到所有濃縮液都加完為止。離心過程中注意是否發生蛋白沉澱,導致堵管。若發生沉澱,要確定沉澱的具體原因,是蛋白濃度過高還是Buffer不合適;前者可用多根超濾管同時超濾,降低濃度的辦法解決,後者的方法是換不同的Buffer,直到蛋白不發生沉澱為止。
5、前面幾步用以濃縮蛋白,如果要換Buffer,在總蛋白液濃縮至1ml左右的時候,輕輕加入新的Buffer(經0.22um超濾膜超濾),再濃縮至1ml左右,連續三次,最後一次的濃縮終體積根據需要的蛋白濃度而定,一般不多於500ul,也有濃縮至200ul以內的情況。按照每次至少10倍左右的體積濃縮算,三次達到1000倍以上,基本上可以達到換buffer的目的。
6、取出最終蛋白濃縮液的操作在冰上操作,用黃槍頭(200ul)取,輕輕順著邊緣插入槍頭,輕輕吹打、混勻蛋白液,注意不要碰到超濾膜,然後吸取濃縮液,每次吸接近200ul,直到吸完。管底剩下的最後一點濃縮液不必吸取,否則難度太大,有可能損壞超濾膜。最後加入MilliQ水到超濾管中,沒過超濾膜,防止膜失水變干。
7、以下是處理超濾管,重復利用超濾管的步驟。
8、倒出超濾管里的水,用milliQ水輕輕潤洗幾次,【若管底有可見的蛋白沉澱,可以先加入水,然後用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉澱懸起,然後倒掉,不可用自來水猛沖】然後加入0.2M的NaOH溶液,室溫放置20min,期間平衡超濾管。再離心10min。倒出殘留的NaOH溶液,將管芯浸入MilliQ水的燒杯(1或2L)中,放置幾個小時,再換新的水,放置幾個小時,不斷稀釋NaOH濃度。50ml管和蓋子用自來水洗,內壁再用MilliQ水洗干凈。
9、取出浸沒的管芯,加至接近滿的MilliQ水,50ml管也加滿MilliQ水,將管芯慢慢放入50ml
離心管,排出部分水,然後蓋上蓋子,放4度保存,直到下次使用。一般來說,按照上述步驟和注意事項,每根管用三四年不會壞。

F. 超濾離心管可以滅菌嗎

1、可以用70%的酒精消毒
2、如果是高溫高壓滅菌,要注意滅完菌後,管裡面的超濾膜是處於濕潤的狀態,所以需要立即使用,因為膜濕潤後就不能幹

G. 求助:第一次使用超濾離心管應該怎麼處理

可能不同廠家的產品保存運輸條件不一樣。
如果有甘油等保護劑,那就一定要洗干凈再加樣品。版權
乾的超濾管也要先潤濕再用,否則可能不能完全利用膜面積。
最好,用樣品buffer潤洗下再加樣,最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好,使膜充分浸潤。

降低吸附的辦法有:
1,蛋白濃度不要過低
2,盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3,用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗(不影響蛋白活性的前提下)
4,加入保護蛋白,如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)

用完保存在20% EtOH中,4C保存,防止長菌,依不同樣品可以重復使用不同的次數。

閱讀全文

與密理博超濾離心管所有型號相關的資料

熱點內容
漿液泡放到蒸餾水中會破裂嗎 瀏覽:44
中廣核電子束輻照處理污水 瀏覽:121
空氣凈化器初效濾網怎麼裝 瀏覽:729
愛惠浦凈水器超濾 瀏覽:644
新冠肺炎醫療廢水處理方法 瀏覽:422
邁騰濾芯多少公里換 瀏覽:71
ebgp用環回口建鄰居的意義 瀏覽:163
污水處理排口在線檢測設備多少錢 瀏覽:452
長興樹脂4901 瀏覽:862
四季沐歌凈水機濾芯怎麼用 瀏覽:762
污水處理費用徵收辦公室 瀏覽:31
景德鎮前置凈水器批發價格多少 瀏覽:501
泰州污水處理池的蓋板公司有哪些 瀏覽:956
雨污水報價怎麼做 瀏覽:323
污水處理高錳酸鉀加多少 瀏覽:586
冷軋含油廢水有什麼流量計測 瀏覽:423
市政污水廠業績 瀏覽:269
pvc有五型乙烯法樹脂嗎 瀏覽:163
農村污水處理管網施工難 瀏覽:277
凈水機過水後怎麼退貨 瀏覽:623