流動相過濾超聲

⑴ 高效液相色譜的流動相要經過過濾，那標准品和待測樣品需不需要過濾呢我是用大鼠腦里的紋狀體測的。

當然要過濾，尤其是一些溶解性不好的樣品~

樣品用針式過濾器就可以。我一般就使用0.22um針頭過濾器

生物製品配置時盡量用薄膜濾過的溶劑，最後注入進樣瓶前用針頭過濾器過濾.我做中葯檢測時一般提取後濾紙過濾，進樣前用0.45nm的過濾下就好了。

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⑵ 液相色譜所用流動相使用時應注意哪些問題

1、流動相恢復到室溫後使用。流動相溫度與室溫相差時，流動相在恢復到室溫前，基線水平很難穩定，特別是發生漂移，也容易產生氣泡等現象。水與有機溶劑混合時，混合液變化大，往往會與室溫相差很大，務必注意。

2、做HPLC流動相的試劑應用HPLC級的、水應用二次蒸餾水，水相流動相需經常更換，防止長菌變質。使用去離子水、針劑水、純凈水（炊用）並不合適、尤其是做梯度洗脫時，水中的不純物會成為鬼峰，從而干擾分析結果。

3、流動相的pH值過高或過低，流動相使用純水，使用高濃度磷酸鹽緩沖溶液，使用離子對試劑等，均可能造成色譜柱填料被化學破壞，這種對色譜柱固定相及鍵合相的破壞通常是不可修復的。

4、用緩沖鹽做流動相時，在使用前和使用後都要用水清洗流路，絕對禁止將緩沖溶液留在流路中靜置或更長時間。

5、在更換兩種互不相容的流動相時，中間要用異丙醇溶液清洗過渡。例如：先用甲醇水做流動相，然後再用正己烷做流動相時，一定要先用異丙醇溶液沖洗甲醇水，然後用正己烷沖洗異丙醇，反之也是一樣。在更換流動相時還要考慮色譜柱是否更換。

⑶ 高效液相色譜儀操作流程

高效液相色譜儀操作流程為開機、超聲、排氣、走基線。

1、開機前先將流動相過濾和超聲：水流動相用混合濾膜（0.2μm）過濾，有機流動相用有機濾膜過濾，之後超聲脫氣15-20分鍾。（過濾的目的是除去流動相里的雜質，以免雜質進入色譜柱堵塞色譜柱；超聲的目的是排除流動相裡面的氣體，以防氣體進入色譜柱損害色譜柱，影響柱效能）

注意：試驗過程中由於只有0.45μm的混合濾膜，第一次使用時感覺效果不好，於是過濾水時同時使用兩張混合濾膜過濾水流動相。

數據分析：

色譜得到的原始數據為色譜圖，我們需要對途中的色譜峰進行積分，獲得峰面積，並根據實驗需要，使用不同的方法進行定量計算，比如外標法，內標法，面積百分比法等。

儀器還可以得到光譜或者質譜信息，我們可以通過色譜柱數據軟體的對應功能得到光譜圖及質譜圖，獲得定性信息。

獲得所需信息後，可以利用色譜軟體將結果輸出成不同格式的報告，或將處理好的結果導入其他軟體（如統計分析）進行二次處理。

⑷ 乙腈水流動相需要超聲嗎

需要。將20體積的乙腈和80體積的水混勻，用有機膜抽濾，超聲脫氣。乙腈在純度滿足要求的前提下，還需要超聲而且要過濾後才能用作流動相。

⑸ 高效液相色譜的流動相要經過哪些處理

流動相要先過濾，超聲脫氣後方可使用。
另外選用試劑是要選用色譜級的專，過濾時選擇合屬適的濾膜。流動相最好現配現用，不要保存太長時間。
使用旋轉蒸發儀上的真空泵 抽空氣20min，可以達到脫氣的作用。使用濾膜過濾掉雜質。
流動相必須過濾膜，用前要超聲除氣泡半個小時左右，否則基線不穩
儀器和色譜柱先要用有機溶劑（如乙腈等）好好清洗一下，待基線平衡後才能進一步工作，乙腈和水混合的流動性最好先超聲抽濾脫氣，准備工作做好了會節省好多時間。
若用色譜純的乙腈和超純水做流動相，流動相可以不用過濾膜，但超純水需要超聲約30分鍾脫氣。

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⑹ 高效液相色譜法測定時,流動相合樣品均應先過濾和超聲波,為什麼

流動相需要過濾、超聲，過濾是除去固體雜質或異物，同時驅除溶解的氣體，超聲進一步驅內除溶解的氣容體。樣品需要過濾，防止不溶性物質堵塞系統的管路，樣品不需要超聲，超聲過程往往伴隨溫度升高，樣品一旦溫度升高液體的體積會改變，濃度發生變化，影響到結果的准確性。

⑺ 為什麼高效液相色譜儀的流動相在使用前必須過濾，脫氣

用於高效液相色譜的流動相必須事先除氣，否則容易在系統中逸出氣泡，影響泵的工作。氣泡還會影響色譜柱的分離效率、檢測器的靈敏度、基線的穩定性，甚至使其無法檢測。

噪音增加，基線不穩定，突然跳躍。此外，溶解在流動相中的氧可以與樣品、流動相甚至固定相（如烷基胺）發生反應。溶解氣體也會引起溶劑ph值的變化，從而導致分離或分析結果的誤差。

常用的除氣方法有加熱沸騰、抽真空、超聲波、吹氦等。

高效液相色譜（hplc）是色譜的一個重要分支。以液體為流動相，高壓輸液系統，將不同極性的單溶劑或不同比例的混合溶劑、緩沖液等流動相泵入固定相色譜柱。分離柱中的組分後，用檢測器檢測。實現了樣品的分析。

(7)流動相過濾超聲擴展閱讀：

液相色譜-質譜聯用（LC-MS）可增加額外的分析能力，准確識別和量化細胞和組織裂解物、血液、血漿、尿液和口服液等復雜樣品基質中的微量化合物。

流動相和固定相都是液體。流動相與固定相應不相容（極性不同，避免固定液流失），界面清晰。當樣品進入色譜柱時，溶質分布在兩相之間。達到平衡後，遵循高效液相色譜的計算公式。

公式中cs溶質在固定相的濃度、cm溶質在流動相的濃度、vs固定相的體積和vm流動相的體積。llpc與gpc有相似之處，即分離順序取決於k值較大的組分的保留值，但也存在差異。在gpc中，流量對k的影響較小，而llpc流量對k的影響較大。

⑻ 液相色譜的流動相配置完成後是先過濾還是先進行超聲

過濾後，超聲效果會更好，或者可以減少時間

⑼ 液相色譜法中應該怎麼解釋組分的洗脫順序

使用高效液相色譜儀進行分析時，常用兩種洗脫方式，一種為等度洗脫，另一種為梯度洗脫。

用等度洗脫進行色譜分離時，由不同溶劑構成的流動相的組成，如流動相的極性、離子強度、pH值等，在分離的全過程中皆保持不變。用梯度洗脫進行色譜分離時，在洗脫過程中含2種或兩種以上不同極性溶劑的流動相組成會連續或間歇地改變，其間可調節流動相的極性，改善樣品中各組分間的分離度。

使用梯度洗脫時，也會使干擾分離的強保留雜質組分在較短的時間內從柱中清楚，使色譜柱保持干凈狀態，以進行下一次的分析。梯度洗脫一般是指流動相的組成隨分析時間的延長呈現線性變化，即線性梯度洗脫，可用於反相和正相高效液相色譜儀及離子對色譜法。

(9)流動相過濾超聲擴展閱讀：

注意事項：

1、流動相必須用HPLC級的試劑，使用前過濾除去其中的顆粒性雜質和其他物質(使用0.45μm或更細的膜過濾)。

2、流動相過濾後要用超聲波脫氣，脫氣後應該恢復到室溫後使用。

3、不能用純乙腈作為流動相，這樣會使單向閥粘住而導致泵不進液。

4、使用緩沖溶液時，做完樣品後應立即用去離子水沖洗管路及柱子一小時，然後用甲醇(或甲醇水溶液)沖洗40分鍾以上，以充分洗去離子。對於柱塞桿外部，做完樣品後也必須用去離子水沖洗20mL以上。