過濾柱

1. 幾種柱層析的特點和在純化工藝中的選擇

分享到： 收藏推薦 在過去的三十年中,分離生物大分子的各種技術和方法得到了不斷的發展。隨著各種介質的完善和商品化,使以填料為核心的柱層析技術在蛋白質等粗提後的純化中起到了重要作用。本文在一定范圍內,僅就其中幾種最常用柱層析的特點和在純化中的選擇應用作一綜述。一、幾種柱層析的特點1凝膠過濾柱層析(ＧｅｌＦｉｌｔｒａｔｉｏｎＣｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙ,ＧＦＣ)ＧＦＣ是以分子大小和形狀為分離基礎的。具體說就是利用不同大小分子通過凝膠滯留時間的差別來分離混合物的柱層析方法。另外一種說法是分離是以分子體積的大小為基礎的,分子體積即分子溶劑化後的體積,受分子形狀和相對分子質量兩方面因素的影響。有時加入變性劑(尿素、鹽酸胍等)以破壞蛋白質的三、四級結構,可以使分離主要受控於相對分子質量的大小。ＧＦＣ特別適用於分離相對分子質量大於2000的高分子化合物和相對分子質量差異大的混合物及低聚物。ＧＦＣ的分離不依賴於流動相和固定相的相互作用,所以不必使用梯度洗脫。但是由於電荷屏蔽的因素,為了降低填料與生物分子之間的相互作用,往往會適當提高鹽濃度,至少高於005ｍｏｌ/ＬＮａＣｌ。

2. 請教sephacryl s-400的裝柱要領

1.確定填料的用量。一般所銷售的凝膠填料是濃度為2/3填充床體積的漿狀物，因此應該根據柱體積決定所要用的凝膠體積。
（裝填凝膠過濾柱時，填料床的均勻性非常重要 ）
2.將填料溫和的懸浮於緩沖液，或者水中，至體積為所需填充床體積的兩倍。
（可以將凝膠置於真空下，進行脫氣處理。以除去介質和緩沖液中所溶解的氣體 ）
3.將柱子固定在穩定的支架上，並保證垂直，先向柱內加滿緩沖溶液或水，檢查是否漏水，再打開出液口，排除裡面的氣泡，特別是要排除床底支持物上的氣泡。關閉出液口，往空柱中加入約為1/10柱體積的緩沖液。
4.用裝柱器連續不斷的將凝膠注入柱子中。
（凝膠應與層析柱的溫度一致，裝柱過程中溫度也要恆定，同時，要嚴格防止氣泡進入凝膠中，如果有，就必須重裝 ）
5.讓其靜置沉降20-30min，然後用泵裝壓柱子。先以低流速裝壓柱子（一般採用層析樣品時所用的流速 ），然後，當填料停止下沉後，將流速增至層析流速的150%左右，繼續加壓，直至填料不再進一步壓縮為止。此時層析柱即裝填完畢。
6柱效測定。

3. 過濾柱中為什麼放棉花

是用於什麼過濾柱？氣體的？一般來說棉花用於過濾的作用就是阻擋氣體中較大的顆粒。

4. 為什麼要過濾柱要把細沙放在最上面

這個是很正常的呀，因為只有這樣過濾的話才能保證過濾全面，否則的話容易出現過濾不達標的。

5. 微孔折疊濾芯有什麼特點

折疊濾芯產品特點
1.傑出的化學兼容性，適合過濾強酸、強鹼及有機溶劑
2.濾膜為折疊式深層過濾，膜過濾面積大
3.壓差低，納污能力強，使用壽命長
4.有多種過濾精度可選擇
5.漸進式孔徑變化提供超高納污能力

6. 水的凈化的過濾柱的活性炭可以改為木炭嗎!

不可以！你首先要明白一個概念，木炭不是活性炭！活性炭是經過炭化和活化兩個主要過程的產物，它的吸附能力不是簡單的炭化就可以擁有的。

7. 過濾柱中順序能否改變為什麼

能，改變流動相的極性，pH等。
只要調整流動相與樣品的親和力，或者改變固定相的性質。
總體來說，柱子的分離原理就是靠流動相與固定相對樣品的吸附能力不同，加以分離的。因此，只要調整合適的親和比，就可以達到不同的保留時間

8. 液相色譜柱種類

色譜柱按用途可分為分析型和制備型兩類

①常規分析柱（常量柱），內徑2~5mm,柱長10~30cm；

②窄徑柱（narrowbore），內徑1~2mm，柱長10~20cm；

③毛細管柱（又稱微柱microcolumn），內徑0.2~0.5mm；

④半制備柱，內徑＞5mm；

⑤實驗室制備柱，內徑20~40mm，柱長10~30cm；

⑥生產制備柱內徑可達幾十厘米。

(8)過濾柱擴展閱讀

色譜柱的性能除了與固定相性能有關外，還與填充技術有關。在正常條件下，填料粒度>20um時，干法填充制備柱較為合適；顆粒<20um時，濕法填充較為理想。填充方法一般有四種：

①高壓勻漿法，多有用於分析柱和小規模製備柱的填充；

②徑向加壓法，Waters專利；

③軸向加壓法，主要用於裝填大直徑柱；

④干法，柱填充的技術性強，大多數實驗室使用己填充好的商品柱。

必須指出，高效液相色譜柱的獲得，裝填技術是重要環節，但根本問題還在於填料本身性能的優劣，以及配套的色譜儀系統的結構是否合理。

9. 水的凈化的過濾柱的活性炭可以改為木炭嗎!

你好！
活性炭可以說是木炭的深加工產品。
活性炭與木炭最大的區別就是「吸附性」,
產生吸附性的原因是它有發達的孔隙結構，而這種孔隙結構是肉眼無法看見的，吸附能力是普通竹木炭的5倍，吸附值越高吸附能力就越強。活性炭吸水性：空氣凈化炭孔隙發達，吸水性好。取一粒用舌舔一下，會感到水分迅速被吸收，普通炭感覺不明顯。
所以嚴格來說，木炭是不可以改為木炭的。
僅代表個人觀點，不喜勿噴，謝謝。

10. 為什麼做過濾柱要把細沙放在最上面

反了吧，應該是細沙在最底下，較粗的石礫在上面