離子交換層析的平衡緩沖液配方

㈠ 請教Good緩沖液的配方

Good's buffer是12種緩沖溶液的統稱，主要應用於生物方面，它們具有一系列共性，比如pH接近中性，低離子強度等，具體資料可以參考英文wiki中Good's buffers一條

㈡ 過離子交換柱時，pH梯度洗脫緩沖液一般用什麼緩沖液

如果不限定純抄化方法，可以考慮親和層析或離子交換，但根據你問題的意思，是選定離子交換。
此時就要考慮你蛋白的等電點了，如果等電點在你穩定pH之上，就用陽離子交換柱：
設計陽離子交換層析：將你的樣品置換到你所指的穩定pH的running
buffer。同時裝柱，平衡，然後上樣，平衡，洗脫（因為你的pH不穩定，建議鹽洗脫），收峰。得你的蛋白；
如果你的等電點在穩定pH之下，就用陰離子交換柱，其步驟如上，只是改變柱子類型。

㈢ 離子交換層析法原理是什麼

離子交換層析法 （ion exchange chromatography，簡稱IEC）是從復雜的混合物中，分離性質相似大分子的方法之一，依據的原理是物質的酸鹼性、極性，也就是所帶陰陽離子的不同。電荷不同的物質，對管柱上的離子交換劑有不同的親和力，改變沖洗液的離子強度和pH值，物質就能依次從層析柱中分離出來。
離子交換層析法大致分為5個步驟：
1. 離子擴散到樹脂表面。
2. 離子通過樹脂擴散到交換位置。
3. 在交換位置進行離子交換；被交換的分子所帶電荷愈多，它與樹脂的結合愈緊密，也就愈不容易被其它離子取代。
4. 被交換的離子擴散到樹脂表面。
5. 沖洗液通過，被交換的離子擴散到外部溶液中。
離子交換樹脂的交換反應是可逆的，遵循化學平衡的規律，定量的混合物通過管柱時，離子不斷被交換，濃度逐漸降低，幾乎全部都能被吸附在樹脂上；在沖洗的過程中，由於連續添加新的交換溶液，所以會朝正反應方向移動，因而可以把樹脂上的離子沖洗下來。
如果被純化的物質是氨基酸類的分子，則分子上的凈電荷取決於氨基酸的等電點和溶液的pH值，所以當溶液的pH 值較低，氨基酸分子帶正電荷，它將結合到強酸性的陽離子交換樹脂上；隨著通過的緩沖液pH逐漸增加，氨基酸將逐漸失去正電荷，結合力減弱，最後被洗下來。由於不同的氨基酸等電點不同，這些氨基酸將依次被洗出，最先被洗出的是酸性氨基酸，如apartic acid和glutamic acid（在約pH3~4時），隨後是中性氨基酸，如glycine和alanine。鹼性氨基酸如arginine和lysine在pH值很高的緩沖液中仍帶有正電荷，因此這些在約pH值高達10~11時才出現。

㈣ PBS緩沖液的配製

配製方法：

稱取磷酸二氫鉀(KH2PO4)，磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)，氯化鈉(NaCl)，氯化鉀(KCl)，吐溫－20 ，加水。

PBS:Phosphate Buffered Saline

PBS 1L配方pH7.4：磷酸二氫鉀(KH2PO4)：0.27g，

磷酸氫二鈉(Na2HPO4)：1.42g，

氯化鈉(NaCl)：8g，

氯化鉀(KCl)0.2g，

加去離子水約800mL充分攪拌溶解，然後加入濃鹽酸調pH至7.4，最後定容到1L。

(4)離子交換層析的平衡緩沖液配方擴展閱讀

PBS緩沖液的作用：

PBS是磷酸緩沖鹽溶液的簡稱，不僅偽狂犬病毒要用它稀釋，一般的有活性的生物制劑都要用它來稀釋。

原因就是它具有鹽平衡、可調整的適宜pH緩沖作用，蒸餾水不具有鹽平衡作用，可以破壞生物蛋白的結構及生物特性；生理鹽水不具有調整pH的作用，對完整的、具有活性的物質不能保證其在最適條件下參與生物反應，所以使用PBS是首選。

PBS也不是萬能的，有的生物活性物質需要的條件比PBS還要高，就需要在平衡緩沖液中加入更多的成分，維持最佳的條件保證生物活性物質保持其最完整的特性。

㈤ western blot 轉移緩沖液的配方

轉移緩沖液中不能含有sds的，sds會嚴重影響轉印效果。

㈥ 怎麼用離子交換層析分離等電點分別為4，6，7， 9 的蛋白質

6．洗脫：用含NaCL(0.2-0.6M)的0.02M
Tris-HCL
緩沖液
pH7.4(內含0.
等電聚焦電泳
（IEF）分離蛋白及測定
蛋白質等電點
一、原理
等電點聚焦
（IEF）

㈦ 求western blot 電泳液和轉膜緩沖液的配方~~謝謝啦~~ 有的轉移緩沖液加SDS有的沒加，是為什麼呢謝謝啦

我們實驗室用的是：

5*SDS-PAGE電泳緩沖液 0.125M tris 15.1g, 1.25M glycine 94g,0.5% SDS 5.0g,加入800ml去離子水，攪拌溶解。加去離子水將溶液定容至1L後，室溫保存。用的時候稀釋成1*的就可以了。

轉膜緩沖液的配製方法：39mM glycine 2.9g,48mM tris 5.8g, SDS 0.37g 加入600ml去離子水，充分攪拌溶解。加去離子水將溶液定容至800ml後，加入200ml甲醇。室溫保存。

㈧ 索倫森緩沖液配方，急！

我個人從國外網站中檢索到所謂的索倫森緩沖液就是國內長用的磷酸鈉緩沖液。配方也很常見。
沒有回答的，我只能自己回答了。哈哈。

㈨ TAE緩沖液 配方

你好，我看了你的推斷過程，有一個地方有誤：Tris-乙酸不代表Tris與乙酸的比例是一比一，實際上配TAE時，根據所需的pH值，Tris與乙酸比例是2：1的。所以1X ：0.04mol/l Tris-乙酸=0.04mol/LTris鹼以及0.02mol/L乙酸，相應地你就能算出是57.1ml冰乙酸了。

另外，你發現沒有，按照你的1X的配方EDTA是0.001mol/L,那麼乘以50為0.05mol/L，而50×配方中是0.1mol/L。這兩種配方都是正確的：分子克隆附錄上面取的是0.05mol/L，takara的技術手冊上用的是0.1mol/L，這個影響不大，主要是鰲合Mg，抑制DNase活性。
希望能夠幫到你，有問題繼續交流！