糖化血紅蛋白離子交換層析法

A. 什麼是糖化血紅蛋白

糖化血紅蛋白測定（glycosylated hemoglobin A，GHb） 成人紅細胞中的血紅蛋白有HbA（佔95％～97％以上），HbA2（佔2.5％），HbF（佔0.2％）。當HbA中的部分血紅蛋白被糖基化後，其中由於HbA的β鏈N末端的纈氨酸分子與葡萄糖等己糖分子相結合而使其在血紅蛋白電泳中成為HbA之前的快泳、HbA1組分，在離子交換柱層析中亦在HbA之前首先被洗脫，糖化Hb可分為HbA1a（其中與1，6-二磷酸果糖結合的為HbA1a1；與6-磷酸葡萄糖結合的為HbA1a2），HbA1b（尚無明確定義，包括HbA1b1，HbA1b2，HbA1b3），HbA1e（與葡萄糖結合）和HbA1d（α鏈和β鏈內氨基以及α鏈的N末端基團上的烯化血紅蛋白；包括HbA1d1，HbA1d2，HbA1d3）共九種。最重要的是HbA1c.HbA1e的生成量取決於血糖的濃度，正常人約佔4％～6％。由於紅細胞的半壽期是60天，所以GHb的測定可以反映測定前8周左右病人的平均血糖水平。

B. 糖化血紅蛋白分析儀的檢測方法

臨床實驗室中應用的GHB測定方法主要分為兩類：
一是基於GHB與非GHB的電荷不同，如離子交換層析、電泳和等電聚集方法
二是基於血紅蛋白上糖化基團的結構特點，如親和層析和免疫實驗
（1）親和層析法：該方法特異性強，不受異常血畿蛋白的干擾。適合於臨床科室使用，尤其對小兒患者而言更有優勢。其檢測結果也完全達到並超過臨床要求，CV值5%以內。以中興科儀（北京）貿易公司的挪威小旋風糖化血紅蛋白儀NycoCard READER II為代表。
（2）高壓液相方法(HPLC)，可全自動分離測定糖化血紅蛋白及血蛋白的變異體和亞型，但儀器的操作保養要求較高，CV值1%以內。以北京執信醫療公司的HLC-723 G7為代表。
（3）免疫凝集法：原理是糖化血紅蛋白與相應的單抗結合進而發生凝集反應，通過測定吸光度來表示凝集量，可用於全自動生化分析儀上進行測定。每次試驗均應使用一個新試劑盒，操作前應注意混勻試劑。指出的是免疫凝集法測定糖化血紅蛋白，精密度較差，CV值一般不大小5%。以中儀康輝（北京）貿易有限公司的DCA Vantage為代表。
（4）離子捕獲法，其原理是糖化血紅蛋白與相應抗體結合後，聯以熒游標記物，而在IMX反應孔中的玻璃纖維預先包被了高分子的四胺合物，使纖維表面帶正電，使前述的反應復合物吸附在纖維表面，經過一系列的清洗後測定其熒光強度，從而得到糖化血紅蛋白的濃度，該方法適用於成批糖化血紅蛋白標本的檢測。以北京東南化學的IMX為代表
（5）電泳方法：毛細管電泳也能分離檢測糖化血紅蛋白和血紅蛋白質的變異體，但目前尚無商品化，具有批量樣本通過能力的儀器面世，相當程度地限制了該方法的臨床應用。

C. 如何糖化篩檢

那位網友（ 我信內經）混淆概念了，葡萄糖耐量試驗和糖化血紅蛋白完全不是一回事！

空腹血糖和餐後血糖是反映某一具體時間的血糖水平，容易受到進食和糖代謝等相關因素的影響。糖化血紅蛋白可以穩定可靠地反映出檢測前120天內的平均血糖水平，且受抽血時間，是否空腹，是否使用胰島素等因素干擾不大。因此，國際糖尿病聯盟推出了新版的亞太糖尿病防治指南，明確規定糖化血紅蛋白是國際公認的糖尿病監控「金標准」。如果空腹血糖或餐後血糖控制不好，糖化血紅蛋白就不可能達標。

糖化血紅蛋白檢測方法很多，常用的有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫凝集、離子捕獲法、電泳法等。主要生產廠家包括美國Bio-Rad的SD10、Primus、日本TOSOH的G7、英國DREWSCIENTIFIC、德國SIEMENS公司的DCA Vantage，挪威小旋風糖化Nycocard Reader II等等。 准確率最好的是高壓液相法(HPLC),最適於普及的是挪威小旋風糖化Nycocard Reader II。

D. 糖化血紅蛋白儀的檢測方法

糖化血紅蛋白檢測方法很多，常用的有微柱法離子交換層析、親和層析、高壓液相、免疫凝集、離子捕獲法、電泳法等。 如毛細管電泳也能分離檢測糖化血紅蛋白和血紅蛋白質的變異體，但目前尚無商品化，具有批量樣本通過能力的儀器面世，相當程度地限制了該方法的臨床應用。
金標法的糖化血紅蛋白儀,CV值小於5%。
綜上所述，糖化血紅蛋白是糖尿病患者疾病控製程度一項良好的指標，糖尿病患者應定期檢測糖化血紅蛋白，並據此制定，修正相關治療方案。各醫院可根據自身標本的多少，選擇使用有關糖化血紅蛋白的檢測儀器，開展該項目的檢測。

E. 糖化血紅蛋白分析儀的工作原理

【檢測原理】
血樣與配套的糖化血紅蛋白(HbA1c)(硼酸親和色譜層析法)檢測試劑反應後，剩下藍色糖基化血紅蛋白與紅色血紅蛋白沉積於層析卡上。糖化血紅蛋分析儀再運用干化學光電比色法分別收集紅色(總血紅蛋白)和藍色(HbA1c)的光學反射值，結合標准曲線計算出對應的濃度值，從而計算出血液樣本中糖化血紅蛋白的含量占總血紅蛋白的比例含量。

F. mq2000糖化血紅蛋白儀做出結果為0怎麼解決

糖化血紅蛋白測定（glycosylated hemoglobin A，GHb）

成人紅細胞中的血紅蛋白有HbA（佔95％～97％以上），HbA2（佔2.5％），HbF（佔0.2％）。當HbA中的部分血紅蛋白被糖基化後，其中由於HbA的β鏈N末端的纈氨酸分子與葡萄糖等己糖分子相結合而使其在血紅蛋白電泳中成為HbA之前的快泳、HbA1組分，在離子交換柱層析中亦在HbA之前首先被洗脫，糖化Hb可分為HbA1a（其中與1，6-二磷酸果糖結合的為HbA1a1；與6-磷酸葡萄糖結合的為HbA1a2），HbA1b（尚無明確定義，包括HbA1b1，HbA1b2，HbA1b3），HbA1e（與葡萄糖結合）和HbA1d（α鏈和β鏈內氨基以及α鏈的N末端基團上的烯化血紅蛋白；包括HbA1d1，HbA1d2，HbA1d3）共九種。最重要的是HbA1c.HbA1e的生成量取決於血糖的濃度，正常人約佔4％～6％。由於紅細胞的半壽期是60天，所以GHb的測定可以反映測定前8周左右病人的平均血糖水平。

GHb測定方法很多，兩種最基本的方法是：測定HbA1組分和僅測定HbA1c.高壓液相色譜（HPLC）法可精確分離HbA1各組分；並分別得出HbA1a、HbA1b、HbA1c、HbA1d的百分比，CV3％，是參考方法，其次還有低壓液相色譜（LPLC），目前二者均有高精度的自動化儀器，作為常規方法用於臨床；硼酸親和柱層析法CV（1％～4.7％），陽離子交換柱層析法CV（2％～16％），測定的血紅蛋白類型為HbA1.前者在樣本量不大的實驗室仍可使用；後者在分離過程中對pH和溫度的要求極高，HbF是其干擾因素。電泳法CV（4％～10％），分離Hb類型和干擾因素與陽離子交換柱層析法相同；比色法可用於自動生化儀，無血紅蛋白分離步驟，干擾因素小，具特異性和敏感性，但CV較大（4％～18％），且樣品用量大，用濃度單位報告的方式還未被廣大臨床醫師接受。

G. 糖化血紅蛋白的檢測方法

1、陽離子交換色譜法
原理：糖化導致血紅蛋白分子表面陽離子丟失。在弱的陽離子交換劑中，例如Biorex70，伴有增加的離子濃度和（或）pH下降，糖化血紅蛋白在非糖化血紅蛋白前先洗脫。這現象產生了糖化血紅蛋白最初的術語「快速血紅蛋白」。陽離子交換色譜法可用於小型、微型或大型柱層析方法或部分或全自動的PHLC/FPLC方法。因為，其他翻譯後修飾血紅蛋白，例如醛亞胺型、甲醯化、乙醯化、乙醛加合物、降解物、老化人工物品和異常血紅蛋白電荷交換也不同於正常的HbA0，所以已經列出了許多陽離子交換層析法的干擾因素。使用常規HPLC的方法。分離糖化血紅蛋白亞組分是能達到滿足需求的臨床精密度。然而，已知HbA1c的峰不是均一的而是包含一重要的非糖化血紅蛋白部分。少數糖化血紅蛋白也整合到HbA0主峰中。通過使用特殊的柱原料（poly-CATA）和30～40 min分離時間可以改善分離效果。這些方法可以作為參考步驟但不適合常規使用。所有的陽離子交換色譜法對pH和溫度的變化敏感，因此要控制pH和溫度。
說明：根據紅細胞代謝動力學推測初始HbA1c值大約每日破壞1/120（≈0.83%）。因為糖化在合適的治療下甚至健康人也產生，故這個理論值在體外不能達到。控制不理想的糖尿病患者通過加強治療而達到血糖量正常，可以發現HbA1c值最大下降率以大約每10 d下降正常血糖的1%（絕對的）。由於測定糖化血紅蛋白方法的精確性，兩次測定值HbA1c的差異大約1%就可認為具有臨床相關性。因為這些原因，在HbA1c兩次測定間至少有2周的時間，推薦4～6周的間隔。
因為升高的糖化血紅蛋白值是長期高糖血症的糖尿病患者相當可靠的指示劑，因而是可能診斷糖尿病的。在未治療的個體，正常的糖化血紅蛋白值臨床上可以排除明顯的糖尿病。但由於它不能檢測糖耐量受損，所以作為診斷和（或）篩選目的唯一的參數，使用糖化血紅蛋白是存在問題的。
2、電泳法
原理：相比於非糖化血紅蛋白，因糖化而變化的總電荷和糖化血紅蛋白的等電點變化是瓊脂糖凝膠或者pH梯度5.0～6.5的凝膠等電聚焦電泳分離的基礎。瓊脂糖凝膠電泳的血紅蛋白亞組分解析度很小，而等電聚焦可以更好地使亞組分分離。可能由於試驗的自動化程度不足，重要性已經下降。
3、親和層析法
原理：硼酸結合順式-羥基。商品化的m-氨基苯硼酸瓊脂糖共價結合的親和柱已可用於微柱分析檢測。將血樣本中的血紅蛋白加到層析柱後，所有的糖化血紅蛋白（HbA1和旁鏈糖化的血紅蛋白；總糖化血紅蛋白）與硼酸結合而非糖化血紅蛋白通過層析柱可被測量。在加入高濃度也包含順式-羥基的多羥基復合物，例如山梨醇後，糖化血紅蛋白與硼酸的結合被替換而從柱子上洗脫下來。親和層析法對經翻譯以後修飾的血紅蛋白和病理血紅蛋白的影響相對不敏感。利用親和層析法，僅能測定總糖化血紅蛋白。廣泛使用的親和層析方法，允許用經驗演算法從總糖化血紅蛋白值計算出「標準的HbA1c」。
4、免疫分析法
在纈氨酸β-N-末端糖化的血紅蛋白提供了一個容易被抗體識別的抗原表位。可以用單克隆抗體或多克隆抗體進行放射免疫分析和免疫酶學分析測定，抗體特異識別β鏈N-末端糖化的血紅蛋白最後4～8個氨基酸組成的抗原表位。異常的血紅蛋白或翻譯後經修飾的血紅蛋白無干擾。
目前的免疫化學試驗不僅檢測HbA1c，通常也同時檢測HbA2c，因為血紅蛋白A2糖化δ鏈的表位是相同的。抗體直接抗β-鏈的最後四個氨基酸的糖化表位的免疫化學試驗也可用進行檢測，例如HbS1c。在大多數情況下HbA2c意義不大，雖然鐮刀細胞病時可以准確地測定纈氨酸β-N-氨基末端糖化程度，但它仍不能100%代表HbA1c。
5、離子層析法
離子層析法精密度高、重復性好且操作簡單, 被臨床廣泛採用。檢測原理由於血紅蛋白β-鏈N 末端纈氨酸糖化後所帶電荷不同, 在偏酸溶液中總糖化血紅蛋白( GH b) 及H bA 均具有陽離子的特性, 因此經過陽離子交換層析柱時可被偏酸的緩沖液平衡過的樹脂來吸附, 但二者吸附率不同, GH b正電荷較少吸附率較低, H bA 正電荷較多吸附率較高。用不同pH 的磷酸鹽緩沖液可以分次洗脫出GH b 和H bA, 用KCN 可將H b轉化為高鐵氰化血紅蛋白, 用分光光度計測定。或者得到相應的H b層析譜, 其橫坐標是時間, 縱坐標是百分比。HbA1c值以百分率來表示。現在大部分都用全自動測定儀測定。
6、等電點聚集法
是測定GH b的新技術, 它是在聚丙烯酞凝膠中加人載體兩性介質的薄板上形成一個由陽極到陰極逐漸增加的pH 梯度, 溶血液中各個組份將移動到各自的等電點的pH 位置上, 這樣就得到比一般電泳法更好的分劃效果和比較集中的色帶, 通過解析度高的微量光密度儀掃描, 可以准確地測定出各自組份的含量。由於它能夠分辨出一級結構不同的HbA、HbAc、HbF、HbS 及HbC等, 可完全避開各種物質的干擾。
7、化學發光法
採用離子捕捉免疫分析法, 應用抗原抗體反應原理, 聯以熒游標記物, 通過連接帶負電的多陰離子復合物, 吸附到帶正電的纖維表面, 經過一系列徹底清洗等步驟後, 測定熒光強度變化率, 計算濃度。採用專用試劑包和免疫發光分析儀,其檢測系統易於規范和重復, 可減少操作技術誤差, 檢測的靈敏度和特異性高, 批內、批間變異系數小, 回收率高, 准確度高, 交叉污染率小, 影響因素少。
8、酶法
原理為用特殊蛋白酶分解Hb, 3~ 5 min內果糖基氨基酸從H b分離, 果糖基氨基酸氧化酶( FAOD )從果糖基氨基酸產生H2O2, H2O2經POD與DA- 64反應, 選擇751 nm 測吸光度改變求得GHb濃度。

H. 糖化血紅蛋白儀價格

糖化血紅蛋白儀價格報價全國代理--上海天呈上海天呈醫流專業銷售糖化血紅蛋白儀及糖化血紅蛋白試劑盒，品牌有英國Drew ds5糖化血紅蛋白儀、DS1糖化血紅蛋白儀、挪威小旋風金標檢測儀、德國拜耳糖化血紅蛋白儀等。電話：021-65532080 www.touching.cn

產品介紹：
名稱 規格 價格
SS48DS1糖化血紅蛋白儀 親和層析法 35000元
DS5糖化血紅蛋白分析儀 離子交換層析法 100000元
Bayer DCA2000+糖化血紅蛋白及微量白蛋白尿分析儀 免疫法 60000元
NycoCard Reader II多功能全定量特種蛋白金標檢測儀 全定量金標檢測儀 30000元

I. 糖化血紅蛋白儀器，哪個品牌的好用些，操作簡單，耗材低，價位適中，知道的給介紹一下，謝謝

奧迪康糖化血蛋白分析儀，操作簡單，價格適中。具體可電話聯系0511-88880053

AC6600詳細參數

●准確的方法學原理

採用經典准確的方法學原理--離子交換液相層析法，HbA1C分析的金標准，現有測試方法中唯一真正直接分離出HbA1C並通過在線連續測出逐點吸光度，通過積分得出准確面積百分比的分析方法。

●精準分離的4梯度洗脫法

獨創的HbA1C四梯度洗脫法，不採用常規的高低濃度混和產生梯度的洗脫方法，而是針對HbA1C採用四種對應濃度試劑梯度洗脫，精準分離糖化血紅蛋白。

●高分離度液相層析柱

高分離度液相層析柱，體積為Φ 9mm x 45mm重達2.5克進口樹脂，是普通微型層析柱的15-20倍，高達300個測試的高柱效確保測試結果准確。

●高靈敏度415nmLED一體化光度計

高靈敏度415nm LED一體化光度計，波長准確，光源穩定，全鋁合金結構，抗干擾能力強，多鏡片聚焦，微量比色池，靈敏度高，精確記錄分析曲線。

●配套原廠校準品

採用國際規范的量值溯源方法，採用權威的標准質控物質進行數值傳遞，每套試劑均配2組校準品，可適時校準確保測試結果准確可靠，徹底避免僅靠因數校準帶來的儀器個體誤差。

●精密的層析柱恆溫裝置

精準的層析柱及試劑恆溫控制裝置，確保層析柱及試劑不受環境溫度變化的影響，有效保證測試結果的重復性、准確性。

●實時層析圖譜，智能化過程監測

先進的嵌入式微處理系統+智能化控制軟體，可以實時顯示測試曲線，測試過程真實再現，可對測試結果、吸
光度、信號電位、峰值時間和試劑消耗進行監測報警，操作得心應手。
●全自動25位進樣盤，批量急診自由選擇

全自動25位盤式進樣，無需復雜的條架式進樣裝置，無需復雜的機內溶血裝置，批量自動檢測，急診隨時插入。

●全開放結構，合理的流路，低故障，易維護

全開放式結構，全電磁閥流路，無需復雜的樣品機械六通旋轉分配控制閥，可靠耐用方便維護。

●5μl全血，三步測試，實驗室及臨床門診均可使用

5μl 全血，前處理極其簡單，只需取血加入溶血劑三步簡單操作即可上機測試，靜脈全血和手指末梢血均可使用,可適用實驗室批量測試，亦可適應臨床門診即時提供檢測結果。

●採用氣體溶解及氣泡排除技術. 全面消除誤差

採用獨創的試劑溶解性氣體消除裝置和比色池氣泡自動檢測排除技術，無需復雜的脫氣裝置，將氣泡對檢測結果的影響全面消除。

●糖化濃度、面積百分比、平均血糖同時報告

測試報告同時輸出IFCC濃度值、NGSP面積百分比、ADAG平均血糖，滿足全球標准化要求，內存1 000個含測試曲線報告，配有RS232通迅介面，可與HIS/LIS系統連接。