A. 病毒濃縮，除了低溫超離心還有沒有別的方法
沒有了，你是沒有超速離心機吧！這就沒辦法了
B. 如何使用超速離心機濃縮慢病毒
你好，慢病毒轉染細胞的操作步驟如下：
1、慢病毒轉染前18-24小時，將貼壁細胞以1×10^5/孔鋪到24孔板中。使細胞在慢病毒轉染時的數量為2×10^5/孔左右。
2、第二天，用含有6 μg/ml polybrene的2ml新鮮培養基替換原培養基，加入適量病毒懸液。37℃孵育。
3、(對polybrene毒性敏感的細胞選作此步驟)4小時後加入2ml新鮮培養基以稀釋polybrene。
4、繼續培養24小時，用新鮮培養基替換含有病毒的培養基。
5、繼續培養。如果慢病毒含有熒光蛋白，一般轉染48小時後可見明顯熒光表達，72小時後更加明顯。如需FACS檢測轉染效率，可在轉染後72-96小時進行。如果慢病毒含有抗性基因並且需要加葯篩選，可以在轉染3-4天後開始加葯。
二、慢病毒轉染懸浮細胞實驗方法
1、在2×10^5/ml懸浮細胞中加入polybrene至6 μg/ml和適量病毒，充分混勻。37℃孵育。或者150g室溫離心4小時(選作，部分難轉染的細胞系採用此步驟可以提高轉染效率)。
2、(對polybrene毒性敏感的細胞選作此步驟)4小時後(或離心結束後)加入等體積新鮮培養基以稀釋polybrene。
3、繼續培養3-4天。中間視細胞生長情況可傳代或換液。
C. 超濾濃縮離心管使用前要怎麼處理
可能不來同廠家的產品保存運輸條源件不一樣。
如果有甘油等保護劑，那就一定要洗干凈再加樣品。
乾的超濾管也要先潤濕再用，否則可能不能完全利用膜面積。
最好，用樣品buffer潤洗下再加樣，最大程度保證蛋白活性。尤其是用過後保存在NaOH或乙醇中後。
一般還是離心機甩一下好，使膜充分浸潤。
降低吸附的辦法有：
1，蛋白濃度不要過低
2，盡量選用纖維素的低吸附超濾管
3，用前可以用Tween 80等去垢劑潤洗（不影響蛋白活性的前提下）
4，加入保護蛋白，如BSA(不影響蛋白後續使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止長菌，依不同樣品可以重復使用不同的次數。
D. 超濾膜能過濾掉水中的細菌和病毒嗎
超濾膜能過濾掉水中的細菌和病毒
超濾膜是一種孔徑規格一致，額定孔徑范圍為0.001-0.02微米版（即權1——20納米）的微孔過濾膜。在膜的一側施以適當壓力，就能篩出小於孔徑的溶質分子，以分離分子量大於500道爾頓、粒徑大於2～20納米的顆粒。
細菌的大小因種類而差別很大，球菌大小以直徑表示；桿菌、螺菌用長度和寬度表示。螺菌的長度一般以菌體兩端的距離計算，但按螺旋的直徑和圈數計算才是螺菌的真正長度。測量細菌大小一般用顯微鏡測微尺，常用的單位是微米（micrometer，μm，1μm＝10-3mm）。最小的細菌只有0.2微米，最大的可長達80微米，但最常見的多數細菌為：球菌0.5～1微米，桿菌0.2～1.0×0.7～3微米，螺菌0.3～10×1.0～50微米。
病毒比細菌小得多。直徑在20～40納米之間。大的如痘病毒，大小為200×250-350納米，與小的細菌相近；小的如口啼疫病毒，直徑只有22納米
E. 超濾的工作原理是什麼
超濾的工作抄原理
超濾屬於襲一種分離技術，將壓力專為動力膜分離的過程，過濾的精度在0.01-0.005um的范圍之內。它可高效的去除水中的細菌、病毒、懸浮物、膠體等顆粒狀物質，已經廣泛應用於物質的分離、濃縮、提純等，效果非常好。同時在PH值為2-11的條件下能夠連續的使用。
超濾膜一種孔徑規格一致，額定孔徑范圍為0.001-0.02微米的微孔過濾膜。採用超濾膜以壓力差為推動動力的膜過濾方法為超濾膜過濾。超濾膜大多由醋酯纖維或與其性能類似的高分子材料製得。最適於處理溶液中溶質的分離和增濃，也常用於其他分離技術難以完成的膠狀懸浮液的分離，其應用領域在不斷擴大。
F. 超濾膜可以阻擋病毒嗎
超濾膜是一種抄孔徑規格一致，額定孔徑范圍為0.001-0.02微米（即1——20納米）的微孔過濾膜。在膜的一側施以適當壓力，就能篩出小於孔徑的溶質分子，以分離分子量大於500道爾頓、粒徑大於2～20納米的顆粒。
細菌的大小因種類而差別很大，球菌大小以直徑表示；桿菌、螺菌用長度和寬度表示。螺菌的長度一般以菌體兩端的距離計算，但按螺旋的直徑和圈數計算才是螺菌的真正長度。測量細菌大小一般用顯微鏡測微尺，常用的單位是微米（micrometer，μm，1μm＝10-3mm）。最小的細菌只有0.2微米，最大的可長達80微米，但最常見的多數細菌為：球菌0.5～1微米，桿菌0.2～1.0×0.7～3微米，螺菌0.3～10×1.0～50微米。
病毒比細菌小得多。直徑在20～40納米之間。大的如痘病毒，大小為200×250-350納米，與小的細菌相近；小的如口啼疫病毒，直徑只有22納米，所以，超濾膜能過濾掉水中的細菌和病毒
G. 超濾膜能過濾掉水中的細菌和病毒嗎
一般現在抄採用超濾膜或襲RO膜作為過濾介質的比較多。當然，這兩樣過濾膜出來的水都是可以達到無菌的，因為他們的過濾孔徑都是比細菌小10倍以上，細菌經過膜的時候，是沒辦法鑽過過濾孔的，這個原理就跟家裡的蚊帳一樣，因為蚊帳的孔一般都小於蚊子，這樣蚊子就沒辦法進入裡面，
H. 如何獲得濃縮的細菌病毒
細菌可以以無性或者遺傳重組兩種方式繁殖,最主要的方式是以二分裂法這種無性繁殖的方式：一個細菌細胞細胞壁橫向分裂,形成兩個子代細胞.並且單個細胞也會通過如下幾種方式發生遺傳變異：突變（細胞自身的遺傳密碼發生隨機改變）,轉化（無修飾的DNA從一個細菌轉移到溶液中另一個細菌中）,轉染（病毒的或細菌的DNA,或者兩者的DNA,通過噬菌體轉移到另一個細菌中）,細菌接合（一個細菌的DNA通過兩細菌間形成的特殊的蛋白質結構,接合菌毛,轉移到另一個細菌）.細菌可以通過這些方式獲得DNA,然後進行分裂,將重組的基因組傳給後代.許多細菌都含有包含染色體外DNA的質粒.
處於有利環境中時,細菌可以形成肉眼可見的集合體,例如菌簇.
細菌以二分裂的方式繁殖,某些細菌處於不利的環境,或耗盡營養時,形成內生孢子,又稱芽孢,是對不良環境有強抵抗力的休眠體,由於芽胞在細菌細胞內形成,故常稱為內生孢子.
芽孢的生命力非常頑強,有些湖底沉積土中的芽抱桿菌經500-1000年後仍有活力,肉毒梭菌的芽孢在pH 7.0時能耐受100℃煮沸5-9.5小時.芽孢由內及外有以下幾部分組成：
1．芽孢原生質（spore protoplast,核心core）：含濃縮的原生質.
2．內膜（inner membrane）：由原來繁殖型細菌的細胞膜形成,包圍芽孢原生質.
3．芽孢壁（spore wall）：由繁殖型細菌的肽聚糖組成,包圍內膜.發芽後成為細菌的細胞壁.
4．皮質（cortex）：是芽孢包膜中最厚的一層,由肽聚糖組成,但結構不同於細胞壁的肽聚糖,交聯少,多糖支架中為胞壁酐而不是胞壁酸,四肽側鏈由L-Ala組成.
5．外膜（outer membrane）：也是由細菌細胞膜形成的.
6．外殼（coat）：芽孢殼,質地堅韌緻密,由類角蛋白組成(keratinlike protein),含有大量二硫鍵,具疏水性特徵.
7．外壁（exosporium）：芽孢外衣,是芽孢的最外層,由脂蛋白及碳水化合物(糖類)組成,結構疏鬆.
I. 【求助】超濾能否脫鹽和濃縮一步完成啊
昨天有個millipore的技術人員就是這樣說的~HarveyWang(站內聯系TA)本人主要是從發酵液中提取酶,文獻上一般的步驟是先用硫酸銨沉澱,然後透析,再用超濾濃縮,最後冷凍乾燥, 這要看你需要做多大的體積了。:) (1)硫酸銨沉澱法：我的觀點是，如果你1000 mL的發酵液的話，硫酸銨沉澱可以用，但是這浪費多少硫酸銨啊？！做學術研究可以，如果你的課題是計劃做提取酶的工藝和中試的話，這種硫酸銨沉澱並不有太大的實用性。 （2）超濾步驟的選用要看你的酶溶液有多大的體積。 如果發酵液的酶的量並不是很濃的話，例如50 mL 10 mg/L的酶量，用這種超濾膜會損失掉大部分你的目地酶，都粘到膜上去了，很難洗下來（稀的NaOH可以）。不能輕信某品牌銷售說的話，用用就知道了。如果你的濃縮液體積比較大，例如100-500 mL，酶的濃度也很高，這是可以用超濾膜的。 （3）對於小體積的脫鹽透析，透析袋很好用的。這里是指10 mL-100 mL。從操作方便性上看，這個在小型試驗中我最喜歡用。好簡單啊。。。。 自己頂一個,解答的詳細的有重獎!(金幣可以再加) （1）發酵液的酶蛋白濃度大約是多少，純度是多少？發個SDS-PAGE看看，註明上樣量。 （2）硫酸銨沉澱後和透析後可上離子交換，這可以濃縮10-1000倍，還可以有純化效果，然後再冷凍濃縮啊。HarveyWang(站內聯系TA)哈哈哈哈，回帖就有金幣拿:Ddaidai0124(站內聯系TA)本人現在只是小規模的提取酶,馬上要上發酵罐,需要大規模的提取酶液,不是做酶學性質,所以酶的純度要求不高,和工業用酶的純度差不多就可以了!希望大家推薦個適合工業化提取酶液的工藝,主要考慮成本問題.請版主幫忙在增加懸賞金幣20個lvgl158(站內聯系TA)起碼知道 它的分子量 才能知道是否可以用同一個膜 如果小於一萬可能就有點難度 可以先用少量的硫酸銨澄清 離心後 進行超濾 在超濾前 必須的保證液體 清澈hezhao999(站內聯系TA)體積的在200ml以上用超濾儀，200ml以下可以用超濾離心管，如果不知分子量選用1000的膜完全可以了，如果知道分子量，則選擇酶分子量1/5的超濾膜。zhaocy8903(站內聯系TA)多大規模的發酵 多大規模的發酵
J. 什麼是超濾，超濾是如何工作的
超濾是一種膜分離技術，(UItrafil-tration 簡稱UF)。能夠將溶液凈化，分離或者濃縮。超濾是介於微專濾與納濾之間，屬且三者之間無明顯的分界線。一般來說，超濾膜的孔徑在0.05 um–1 nm之間，操作壓力為0.1–0.5 Mpa。主要用於截留去除水中的懸浮物、膠體、微粒、細菌和病毒等大分子物質。超濾膜根據膜材料，可分為有機膜和無機膜。按膜的外型，又可分為：平板式、管式、毛細管式、中空纖維和多孔式。
超濾是如何工作的？
超濾膜的工作以篩分機理為主，以工作壓力和膜的孔徑大小來進行水的凈化處理。以中空纖維為例，以進水方式可分為外壓式：原水從膜絲外進入，凈水從膜絲內製取。反之則為內壓式。內壓式的工作壓力較外壓式要低。超濾膜在飲用水深度處理，工業用超純水和溶液濃縮分離等許多領域中，得到了廣泛應用。