⑴ 同一個超濾濃縮管可以用來純化不同的蛋白嗎
不可以的
不管是哪個公司生產超濾濃縮管使用後都會有蛋白殘留在濾膜上,而不管是使回用氯化鈉或答者氫氧化鈉清洗都不能確保可以完全清理掉殘留在膜上的蛋白。
如果不同的蛋白間混合使用,可能前一個蛋白會污染到後一個蛋白,甚至有些某些高活性的酶殘留在上面會造成後一個蛋白被酶切降解,造成不必要的損失。
⑵ 蛋白丟失會出現哪些症狀及其防治方法
蛋白丟失是造成腎病綜合征一系列臨床症狀的根源,其中白蛋白佔75%~90%,白蛋白是血漿中主要的鋅轉運蛋白,白蛋白丟失會導致水腫、體腔積液、高脂血症、動脈硬化和代謝性鹼中毒;轉鐵蛋白、銅藍蛋白和維生素D結合蛋白等,以及B因子和其他補體成分的丟失不僅可造成微量元素的缺乏、骨礦代謝紊亂,還會導致免疫力低下、易感染。
大量蛋白尿和血漿膠體滲透壓的改變也導致了脂蛋白代謝紊亂,腎病綜合征的高脂血症以低密度脂蛋白(LDL)水平升高和高密度脂蛋白(HDL)水平下降為特徵,可導致動脈粥樣硬化的脂蛋白(a)即Lp(a)也同樣升高。脂質代謝紊亂可能促進動脈粥樣硬化和腎小球硬化。
因為有大量尿蛋白丟失、低蛋白血症及水腫,既往的觀點認為高蛋白飲食有助於彌補尿中丟失的蛋白,並糾正機體負氮平衡,減輕水腫。目前的研究認為,高蛋白飲食不能降低尿蛋白排泄,反而增加蛋白從尿中丟失,並且會通過對腎小球內血液動力學的影響,引起腎功能損傷。不僅如此,高蛋白飲食對改善患者的蛋白質代謝並無益處,給予高蛋白飲食並未增加患者血漿白蛋白濃度。
相比較而言,低蛋白飲食可能更被認同。腎病綜合征患者能通過抑制氨基酸氧化的代償方式來適應低蛋白飲食,而且能夠刺激機體的蛋白質合成,同時抑制蛋白質降解,氨基酸氧化與尿蛋白丟失。最近的研究認為,改善攝入蛋白質的種類,如低蛋白飲食輔以「開同」,不僅可以維持腎病綜合征患者的正氮平衡,還能降低尿中白蛋白排泄,提高血白蛋白濃度,改善腎功能。
⑶ 使用超濾管濃縮蛋白需要再脫鹽嗎
是否脫鹽,是根據您要達到的最終效果!
⑷ 如何用蛋白濃縮管
選擇合適的超濾管,主要考慮MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應回截留分子量答不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同。
新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
(4)超濾管濃縮蛋白丟失擴展閱讀:
超濾濃縮離心管,最新推出專利產品Hydrosart膜2K型,具有極低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白濃縮和脫鹽的理想用膜。
備有四種材質的超濾膜:聚醚碸、三醋酸纖維素、再生纖維素和Hydrosart,可根據不同要求靈活選用;兩種回收濃縮液的方法:既可用吸管直接吸取並回收,又可將離心管放入離心機反甩,將濃縮液甩入回收帽中,加蓋保存。這兩種方法都可使濃縮液達到近乎完全回收;
⑸ 蛋白在超濾管濃縮過程中出現沉澱怎麼辦
1、選擇合抄適的超濾管,主要考慮襲MWCO和濃縮體積,最常見的是Ultra-15(10kD)。
通常應截留分子量不應大於目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量為35kDa,就可以選擇10kDa截留分子量的超濾管。
若目的蛋白分子量為10kD左右,則可以用截留分子量3kD的超濾管。認真閱讀使用說明書,注意超濾膜對各種化學物質的耐受程度有所不同,表格中有。
2、新買來的超濾是乾燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全過膜,冰浴或冰箱里預冷幾分鍾。然後將水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超過管頂的白線為准。操作要輕,加入蛋白液前,超濾管需要插在冰上預冷。
3、平衡。質量和重心二者都要達到平衡。注意轉速和加速度不可太快,否則直接損壞超濾膜。
注意,一定要等離心機達到目的轉速之後,方可離開
離心機,否則離心機出問題時,無法第一時間處理,後果不可預測!膜與轉軸的方向根據說明書調整(角轉離心機的情況是膜與軸垂直)。在實際使用中,一般轉速開的比說明書里的要低,這樣可以延長離心管的使用壽命。
⑹ 如果蛋白輸進去過幾天又丟失了那是什麼原因
指導意見:
如果蛋白輸進去過幾天又丟失了一般來說要考慮那是肝功能原因
⑺ 超濾離心管濃縮蛋白會損失嗎
會有少量損失。取決於緩沖液,濾網的網眼大小和蛋白質的分子量
⑻ 蛋白用超濾管濃縮容易沉澱怎麼辦
可能是抄這個蛋白的水溶性較差,也就是只能保持在一定濃度不能太高
另外就和這個蛋白的穩定性有關了,超濾時保持低溫,體積縮小一點後就把濾液混勻避免局部濃度過高,選擇更合適的緩沖液,添加一點甘油等小分子物質等都可以增加蛋白的穩定性。