城鎮污水酶底物法

① 酶底物法測定水質糞大腸菌群是國標方法嗎

酶底物法測定水質糞大腸菌群是還不是我國現行的國標方法.

但酶底物法科立得回TM(Colilert)試劑檢測中糞大腸菌群是ISO9308-2:2012和美答國EPA標准,

我單位是社會檢測機構,這兩個標准也是可以使用的.

② 酶底物法

大腸埃希氏菌酶底物法 (enzyme substrate technique for escher) 是指在選擇性培養基上能產生 β-半乳糖苷酶 (β-D-galactosidase) 分解色原底物釋放出色原體培養基呈現顏色變化，並能產生 β-葡萄糖醛酸酶 (β-glucuronidase) 分解熒光底物釋放出熒光產物，使菌落能夠在紫外光下產生特徵性熒光，以此技術來檢測大腸埃希氏菌的方法為大腸埃希氏菌酶底物法。

本法可在 24h 判斷水樣中是否含有的大腸埃希氏菌的最可能數 (MPN) 值。可同時檢測總大腸菌群，方法見 82.6.3。

儀器和裝置

紫外光燈 6W、波長 366nm 的紫外燈，用於觀測熒光反應。

其他儀器同 82.6.3。

培養基與試劑

培養基與試劑同 82.6.3。

檢驗步驟

檢驗步驟同 82.6.3。

結果觀察與報告

1) 結果判讀。結果判讀同 82.6.1，對照表82.5 與表82.6。水樣變黃色同時有藍色熒光判斷為大腸埃希氏菌陽性，水樣未變成黃色而有熒光產生不判定為大腸埃希氏菌陽性。

2) 定性反應。將經過 24h 培養顏色變成黃色的水樣在暗處用波長為 366nm 的紫外光燈照射，如果有藍色熒光產生判斷為陽性反應，表示水中含有大腸埃希氏菌。水樣未產生藍色熒光判斷為陰性反應。結果以大腸埃希氏菌檢出或未檢出報告。

a.10 管法。將培養 24h 顏色變成黃色的水樣的試管在暗處用波長為 366nm 的紫外光燈照射，如果有藍色熒光產生則表示有大腸埃希氏菌存在。

計算有熒光反應的試管數，對照表82.4 查出其代表的大腸希氏菌最可能數。結果以MPN /100mL 表示。如所有管未產生熒光，則可報告為大腸埃希氏菌未檢出。

b.51 孔定量盤法。將培養 24h 顏色變成黃色的水樣的定量盤在暗處用波長為 366nm的紫外光燈照射，如果有藍色的熒光產生則表示該定量盤穴中含有大腸埃希氏菌。

計算有熒光反應的孔穴數，對照表82.5 查出其代表的大腸埃希氏菌最可能數。結果以 MPN/100mL 表示。如所有孔未產生熒光，則可報告為大腸埃希氏菌未檢出。

③ 酶底物法總大腸菌群超過24小時結果有影響嗎

mpn
為最大可能數(most
probable
number)的簡稱。這種方法，對樣品進行連續系列進行稀釋，加入培養基進行培養，從規定的反應呈陽性管數的出現率，用概率論來推算樣品中菌數最近似的數值。

④ 糞大腸菌群檢測為什麼不能用酶底物法

請參考：
http://wenku..com/link?url=jdeu85jJFDFu2kROJdmQk2Y-RZ9ZvSooIK_pqzFCeULgv2ACjqkaMFLV-7uLq__tk8n84z-4m

⑤ 糞大腸菌群固定底物酶底物法需要無菌環境操作嗎

如果使用酶底物法檢測水中的大腸菌群， 是可以在一般潔凈環境中操作的 因為：1.糞大腸菌群不易在空氣中傳播 2.酶底物法檢測操作步驟少 時間短 不易污染！5.12汶川地震和雅安地震中帳篷實驗室使用很多，在ISO和EPA中對酶底物法科立得（Colilert )無需無菌室有詳細的說明和驗證，上海環監也有對「HJ酶底物法的行標」徵求意見稿說明和驗證了在一般潔凈環境中酶底物法數據不影響，我們公司是社會檢測機構，在今年使用酶底物法科立得（Colilert )順利擴項成功4項微生物檢測，提供的就是是以上資料，供參考！

⑥ 糞大腸菌群的測定可以使用針頭過濾器嗎

最新有標準的:CJ/T-2018 城鎮污水水質標准檢測方法 中有新增酶底物法檢測糞大腸菌群

⑦ 水中糞大腸菌群的測定

化妝品檢測項目中糞大腸菌群的檢測流程：
10g/mL樣品+90mL滅菌生理鹽水 →10mL+10mL雙倍乳糖膽（含中和劑）培養基→糞大腸菌群 44.5℃，48h培養
註：在化妝品檢測項目中，如果樣品含有油脂性的成分，如精油，在樣品前處理中需加入液體石蠟、吐溫80、生理鹽水進行均質，使樣品能夠均勻分散開來。
糞大腸菌群又是一個什麼樣的微生物呢？下面我們來詳細介紹下：
大腸菌群：大腸菌群並非細菌學分類命名，而是衛生細菌領域的用語，它不代表某一個或某一屬細菌，而指的是具有某些特性的一組與糞便污染有關的細菌，這些細菌在生化及血清學方面並非完全一致。
定義（GB2010）：在一定培養條件下能發酵乳糖、產酸產氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽孢桿菌。
糞大腸菌群：大腸菌群的一種，又稱耐熱大腸菌群，培養溫度：44.5±0.5℃，糞大腸菌群是化妝品檢測項目中必檢的微生物項目。
大腸埃希氏菌：（(Escherichia. coli )通常稱為大腸桿菌。根據不同的生物學特性將致病性大腸桿菌分為5類：
致病性大腸桿菌(EPEC)、
腸產毒性大腸桿菌(ETEC)、
腸侵襲性大腸桿菌(EIEC)、
腸出血性大腸桿菌(EHEC)、
腸黏附性大腸桿菌(EAEC)。
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⑧ 水中微生物檢測，酶底物法好還是濾膜法好

酶底物法要好很多。ISO國際標准上規定，濾膜法僅適用於干凈水體，酶底物法適用於所有水體。而且由於方法本身限制，濾膜法結果一般偏低

⑨ 酶底物法

總大腸菌群酶底物法()是指在選擇性培養基上能產生β-半乳糖苷酶(β-D-galactosidase)的細菌群組，該細菌群組能分解色原底物釋放出色原體使培養基呈現顏色變化，以此技術來檢測水中大腸菌群的方法。

本法可在24h判斷水樣中是否含有總大腸菌群及含有的總大腸菌群的最可能數(MPN)。

可同時檢測大腸埃希氏菌，見大腸埃希氏菌檢測。

儀器和裝置

量筒100mL、500mL、1000mL。

吸管1mL、5mL及10mL的無菌玻璃吸管或塑料一次性吸管。

稀釋瓶100mL、250mL、500mL及1000mL能耐高壓的滅菌玻璃瓶。

試管可高壓滅菌的玻璃或塑料試管，大小約15mm×10cm。

培養箱(36±1)℃。

高壓蒸汽滅菌器。

乾熱滅菌器(烤箱)。

定量盤定量培養用無菌塑料盤，含51個孔穴，每一孔穴可容納2mL水樣。

程式控制定量封口機用於51孔或97孔法(MPN法，最可能數法)定量盤的封口。

培養基與試劑

1)培養基。在此酶底物法採用固定底物技術(ddfinedsubstratetechnology，DST)，本方法採用Mini-malMdeiumONPG-MUG(MMO-MUG)培養基，可選用市售商品化製品。

每1000mLMMO-MUG培養基所含基本成分為:硫酸銨［(NH₄)₂SO₄］5.0g，硫酸錳(MnSO₄)0.5mg，硫酸鋅(ZnSO₄)0.5mg，硫酸鎂(MgSO₄)100mg，氯化鈉(NaCl)10g，氯化鈣(CaCl₂)50g，亞硫酸鈉(Na₂SO₃)40mg，兩性黴素B(AmphotericinB)1mg，鄰硝基苯-β-D-吡喃半乳糖苷(ONPG)500mg，4-甲基傘形酮-β-D-葡萄糖醛酸苷(MUG)75mg，茄屬植物萃取物(Solanium萃取物)500mg，N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸鈉鹽(HEPES鈉鹽)5.3g，N-2-羥乙基哌嗪-N-2-乙磺酸(HEPES)6.9g。

2)試劑

生理鹽水(8.5g/L)用於稀釋水樣。稱取8.5gNaCl，加蒸餾水至1000mL溶解後，分裝到稀釋瓶內，每瓶90mL，103.43kPa(121℃)20min高壓滅菌。

檢驗步驟

1)水樣稀釋。檢測所需水樣為100mL。若水樣污染嚴重，可對水樣進行稀釋。取10mL水樣加入到90mL滅菌生理鹽水中，必要時可加大稀釋度。

2)定性反應。用100mL無菌稀釋瓶量取100mL水樣，加入(2.7±0.5)gMMO-MUG培養基粉末，混搖均勻使之完全溶解後，放入(36±1)℃培養箱內培養24h。

a.10管法。用100mL無菌稀釋瓶量取100mL水樣，加(2.7±0.5)gMMO-MUG培養基粉末，混搖均勻使之完全溶解。准備10支15mm×10cm或適當大小的滅菌試管，用無菌吸管分別從前述稀釋瓶中吸取10mL水樣各試管中，放入(36±1)℃培養箱內培養24h。

b.51孔定量盤法。用100mL無菌稀釋瓶量取100mL水樣，加入(2.7±0.5)gMMO-MUG培養基粉末，混搖均勻使之完全溶解。將前述100mL水樣全部倒入51孔無菌定量盤內，以手撫平定量盤背面以趕除孔穴內氣泡，然後用程式控制定量封口，放入(36±1)℃的培養箱內培養24h。

結果報告

1)結果判讀。將水樣培養24h後進行結果判讀。如果結果為可疑陽性，可延長培養時間到28h進行結果判讀，超過28h之後出現的顏色反應不作為陽性結果。

2)定性反應。水樣經24h培養之後如果顏色變成黃色，判斷為陽性反應，表示水中含有總大腸菌群。水樣顏色未發生變化，判斷為陰性反應。定性反應結果以總大腸菌群檢出或未檢出報告。

a.10管法。將培養24h之後取出試管觀察，如果試管內水樣變成黃色則表示該試管含有總大腸菌群。

計算有黃色反應的試管數，對照表82.5查出其代表的總大腸菌群最可能數(MPN)。結果以MPN/100mL表示。如所有管未產生黃色，則可報告為總大腸菌群未檢出。

表82.5 10管法不同陽性結果的最可能數(MPN)及95%可信范圍

b.51孔定量盤法。將培養24h之後的定量盤取出觀察，如果孔穴內的水樣變成黃色則表示該孔穴中含有總大腸菌群。

計算有黃色反應的孔穴數，對照表82.6查出代表的總大腸菌群最可能數(MPN)。結果以MPN/100mL表示。如所有孔未產生黃色，則可報告為總大腸菌群未檢出。

表82.6 51孔定量盤法不同陽性結果的最可能數(MPN)及95%可信范圍

續表

續表

⑩ 我單位要買酶底物法檢測試劑，哪個好。

我們單位才買了不久，我比較了解可以幫你分析一下。我們單位購買的是來自美國愛德士公司的，很好用我們很多兄弟單位都的這個很不錯，很穩定。