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流动相为什么需要过滤和超声波脱气

发布时间:2023-08-07 01:36:51

⑴ 液相色谱仪的流动相为什么要脱气常用的脱气方法有哪几种

气泡会影响柱的分离效果,影响检测器的灵敏度、基线的稳定,甚至无法工作

1.如果不排气,容易在系统内逸出气泡,影响泵的工作

2.溶解气体会引起溶剂pH的变化,给分析或分离带来误差

3.溶解在流动相的氧还可能与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)反应。

4.溶解氧能与某些溶剂(如甲醇、四氢呋喃)形成有紫外吸收的配合物,会提高背景吸收,并导致检测灵敏度的轻微降低。

5.在梯度洗脱时会造成基线漂移或形成鬼峰(假峰)

6.在荧光检测中,溶解氧在一定条件下还会引起猝灭现象,特别是对芳香烃、脂肪醛、酮等

常用的脱气方法有超声波震动脱气、抽真空脱气、加热回流脱气、吹氦气脱气以及在线真空脱气。

最简单的脱气方法是超声震动脱气,脱气效果最佳的是在线真空脱气。

⑵ 为什么高效液相色谱仪的流动相在使用前必须过滤,脱气

用于高效液相色谱的流动相必须事先除气,否则容易在系统中逸出气泡,影响泵的工作。气泡还会影响色谱柱的分离效率、检测器的灵敏度、基线的稳定性,甚至使其无法检测。

噪音增加,基线不稳定,突然跳跃。此外,溶解在流动相中的氧可以与样品、流动相甚至固定相(如烷基胺)发生反应。溶解气体也会引起溶剂ph值的变化,从而导致分离或分析结果的误差。

常用的除气方法有加热沸腾、抽真空、超声波、吹氦等。

高效液相色谱(hplc)是色谱的一个重要分支。以液体为流动相,高压输液系统,将不同极性的单溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入固定相色谱柱。分离柱中的组分后,用检测器检测。实现了样品的分析。

(2)流动相为什么需要过滤和超声波脱气扩展阅读:

液相色谱-质谱联用(LC-MS)可增加额外的分析能力,准确识别和量化细胞和组织裂解物、血液、血浆、尿液和口服液等复杂样品基质中的微量化合物。

流动相和固定相都是液体。流动相与固定相应不相容(极性不同,避免固定液流失),界面清晰。当样品进入色谱柱时,溶质分布在两相之间。达到平衡后,遵循高效液相色谱的计算公式。

公式中cs溶质在固定相的浓度、cm溶质在流动相的浓度、vs固定相的体积和vm流动相的体积。llpc与gpc有相似之处,即分离顺序取决于k值较大的组分的保留值,但也存在差异。在gpc中,流量对k的影响较小,而llpc流量对k的影响较大。

⑶ 液相色谱仪的流动相为什么要脱气常用的脱气方法有哪几种

一、液相色谱仪的流动相脱气的必要性

流动相脱气是HPLC 系统能得到可靠数据的一个很有效的措施。HPLC 泵在输送液体时要产生很大的力量,由于气体的压缩比与液体相比大的多,因而当气泡存在时,我们发现瞬间的流速降低和系统压力下降。如果这个气泡足够大,液相泵将不能输送任何溶剂,而且如果压力低于预先设定的压力低限,泵将停止工作。当一个气泡通过输液泵时,由于系统压力大,气泡通常会溶解在流动相溶液中,随流动相通过柱子。但是到达检测器流通池时系统压力又恢复到了大气压,因而气泡可能在检测器流通池中又显现,在色谱图上会出现不规律的毛刺。

二、脱气方法
1. 吹氦脱气法。
利用氦气在液体中溶解度比空气低的特性,在0.1MPa 压力下,以约60 mL/min 流速通入流动相储液容器中10~15min,可以很有效地从流动相中排除溶解的空气,能排除接近80%的氧气。采用一个分布式喷射流装置,一体积的氦气可从流动相中将等体积的几乎全部气体排除。这意味着1L 氦气通过1L 流动相就可完成排气这个工作。这种脱气方法虽然好,但氦气价格较高,很少使用。
2. 加热回流法。
此法的脱气效果较好。在操作时要注意冷凝塔的冷却效率,否则溶剂会丢失,混合流动相的比例会有变化。
3. 抽真空脱气法。
此法可使用真空泵,降压至0.05~0.07MPa ,即可除去溶解的气体。但是由于真空脱气会使混合溶剂组成发生变化,从而影响到实验的重现性,因此多用于单溶剂体系的简单分析。
4. 超声波脱气法。
欲脱气的流动相置于超声波清洗器中,用超声波震荡10~20min。此法的脱气效果zui差。
5. 在线脱气法。
HPLC 仪器均可配我公司研制的在线脱气机。在线脱气使用简单,低故障,有效。
为了保证液相色谱结果的准确性,脱气是一个当要的环节。

⑷ 液相色谱使用前为什么要过滤和脱气

一般抄流动相在上仪器前必须经过两个袭步骤:减压抽滤和超声
减压抽滤有两个目的,
一个是过滤掉气体,尤其是有机相和水相混合的时候,会产生大量的气泡。这些气泡进入仪器就会堵住仪器和色谱柱,所以要除掉。
一个是过滤掉不溶性微粒。你看一般的过滤膜是4.5um孔径的,这个是针对你的色谱柱而定的。色谱柱一般是5um的粒径,保证过滤的流动相里面小的毛絮啊,颗粒啊都不会进入色谱柱。

超声的主要目的也是为了脱气,另外还有助溶和令溶液混合均匀等作用。不过超声主要是为了去掉溶剂瓶瓶壁和瓶底的气泡,所以没必要超声太久的时间,3-5min足够了。

总而言之,都是为了保护仪器和色谱柱,防止气泡和杂质进入。

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