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阳离子交换柱层析谁先被洗脱

发布时间:2023-01-19 22:12:11

❶ 蛋白质水解产物阳离子交换柱层析时的洗脱顺序

pI 10.76的那个应该带正电荷。阳离子交换柱本身带负电荷。

❷ 离子交换层析中流出物质顺序是什么

若用离子交换层析分离物质,以蛋白质为例,离子交换层析中,基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂;而带有负电荷的称之阳离子树脂。离子交换层析同样可以用于蛋白质的分离纯化。

由于蛋白质也有等电点,当蛋白质处于不同的pH条件下,其带电状况也不同。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质,所以这类蛋白质被留在柱子上,然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施,将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。

反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质,结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。

(2)阳离子交换柱层析谁先被洗脱扩展阅读:

对于离子交换纤维素要用流水洗去少量碎的不易沉淀的颗粒,以保证有较好的均匀度,对于已溶胀好的产品则不必经这一步骤。

溶胀的交换剂使用前要用稀酸或稀碱处理,使之成为带H+或OH-的交换剂型。阴离子交换剂常用“碱-酸-碱”处理,使最终转为-OH-型或盐型交换剂;对于阳离子交换剂则用“酸-碱-酸”处理,使最终转为-H-型交换剂。

梯度不要上升太快,要恰好使移动的区带在快到柱末端时达到解吸状态。目的物的过早解吸,会引起区带扩散;而目的物的过晚解吸会使峰形过宽。

❸ 在强酸性阳离子交换柱上asp,his及leu等几种氨基酸的洗脱顺序如何为什么

依次是:精氨酸Asp,赖氨酸Leu,组氨酸His
因为他们的碱性,也就是携带正电荷的能力,或者说电离成阳离子的能力,由强到弱是这个顺序。

❹ 在阳离子交换柱中为什么极性强的先洗脱下来

杂阳离子交换柱上我们一般用的是苯乙烯和二乙烯苯组成的聚合物,是非极性的;根据相似相溶,自然极性强的先洗脱下来

❺ 用阳离子交换层析洗脱氨基酸

首先得知道待分离氨基酸的等电点,洗脱液也分为几种,一种洗脱液的pH对应一种氨基酸的pI,用某一洗脱液洗脱时,对应的氨基酸不带电

❻ 在PH3左右,氨基酸混合液(酸性,碱性,中性三类),经阳离子交换树脂被洗脱分离,这三类氨基酸的洗脱顺序

原因:氨基酸与阳离子交换树脂的静电引力大小依次是 碱性氨基酸>中性氨回基酸>酸性氨基酸,所以答洗脱的顺序就
先是酸性氨基酸(负电荷最多),然后是中性氨基酸,最后是碱性氨基酸(带正电荷最多)。
详见《生物化学》王镜岩 第三版 上册 153页

❼ 离子交换柱的阳,阴离子交换树脂顺序,哪个前哪个后

广州华膜--树脂产品的贮存:
离子交换树脂内含一定量的水份,在运输及贮存过程中应尽量保持这部分水份,如贮存过
程中树脂脱了水应先用浓食盐水(10%)浸泡,再逐渐稀释不得直接放入水中,以免树脂急剧
膨胀而破碎。在长期贮存中,强型树脂应转成盐型,弱型树脂可转变成相应的氢型或游离型,
也可转变成盐型,然后浸泡在洁净的水中。树脂在贮存或运输过程中,应保持在5-40℃的温度
环境中避免过冷过热,影响质量。
新树脂的预处理:
新树脂常含有溶剂、未参加聚合反应的物质和少量低聚合物,还可能吸着铁、铝、钢等重
金属离子。当树脂与水、酸、碱或其他溶液相接触时,上述可溶性杂质就会转入溶液中,在使
用初期污染出水水质。所以,新树脂在投运前要进行预处理。
1、 阳树脂预处理步骤如下:
首先使用饱和的食盐水。取其量约等于被处理树脂体积的两倍,将树脂置于10%食盐溶液
中浸泡18-20小时,然后放出食盐水,用清水漂洗净,使排出水不带黄色;其次再用
2%-4%NaOH溶液,其量与上相同,在其中浸泡2-4小时(或作小流量清洗),放出碱液后,重洗
树脂直至排出水接近中性为止;最后用5%HCI溶液,其量亦与上述相同,浸泡4-8小时后放出酸
液,用清水洗至中性待用。
2、 阴树脂的预处理
其预处理方法中的第一步与阳树脂预处理方法中的第一步相同;而后用5%HCI浸泡4-8小时,然后放出酸液,用水清洗至中性;而后用2%-4%NaOH溶液浸泡4-8小时后,放碱液用清水漂洗至
中性待用。

❽ 在本次柱层析条件下,天冬氨酸、甘氨酸、组氨酸洗脱时那个最先洗

在本次柱层析条件下,天冬氨酸,甘氨酸,组氨酸洗脱时组氨酸最先洗,其次是甘氨酸,最后是天冬氨酸。根据查询相关公开信息显示,在苯酚硫酸钠溶液中,天冬氨酸的电荷比较小,它的迁移速率较快,因此它会在纸上向下迁移在最下面。脯氨酸的电荷比较大,它的迁移速率较慢,因此它会在纸上向上迁移,在最上面。而甘氨酸的电荷介于两者之间,它的迁移速率也在两者之间,因此它会在中间。

❾ 利用阳离子交换层析分离下列每一对氨基酸,哪一种氨基酸首先被PH7缓冲液从离子交换柱上洗脱出来。

氨基酸与粒子抄交换树脂的吸附力袭大小取决于它们之间的电荷引力和疏水作用。第一组中甘氨酸和亮氨酸均为非极性氨基酸,但是相比之下甘氨酸的极性要更强,也就是疏水性更弱,它会先被洗脱。第二组中,丝氨酸是中性条件下不带电荷的极性氨基酸,丙氨酸是非极性氨基酸,所以丝氨酸疏水性差,先被洗脱。

❿ 在强酸型阳离子交换柱上天冬氨酸,组氨酸,亮氨酸等几种氨基酸的洗脱顺序及原因。

洗脱顺序先后依次是:天冬氨酸、亮氨酸、组氨酸。
原因:氨基酸与阳离子交换树回脂的静电引力大小答依次是 碱性氨基酸>中性氨基酸>酸性氨基酸,所以洗脱的顺序就先是酸性氨基酸,然后是中性氨基酸,最后是碱性氨基酸。
天冬氨酸属于酸性氨基酸,组氨酸属于碱性氨基酸,亮氨酸属于中性氨基酸。
详见《生物化学》王镜岩 第三版 上册 153页

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