❶ 如何用蛋白浓缩管
选择合适的超滤管,主要考虑MWCO和浓缩体积,最常见的是Ultra-15(10kD)。
通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3,比如目的蛋白分子量为35kDa,就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右,则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书,注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同。
新买来的超滤是干燥的,使用前加入MilliQ水,水量完全过膜,冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出,即可加入蛋白液,加入的多少,以不超过管顶的白线为准。操作要轻,加入蛋白液前,超滤管需要插在冰上预冷。
(1)超滤管离心的条件扩展阅读:
超滤浓缩离心管,最新推出专利产品Hydrosart膜2K型,具有极低的蛋白吸附特性,高流速、高通量,是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜。
备有四种材质的超滤膜:聚醚砜、三醋酸纤维素、再生纤维素和Hydrosart,可根据不同要求灵活选用;两种回收浓缩液的方法:既可用吸管直接吸取并回收,又可将离心管放入离心机反甩,将浓缩液甩入回收帽中,加盖保存。这两种方法都可使浓缩液达到近乎完全回收;
❷ 离心管和离心超滤管
离心管就来是一个简单的可自以承受高转速压力的管子,比如离一些样品,分离出上清沉淀。
离心超滤管会有一个类似于内管和外管的两个部分,内管中是带有一定分子量的膜,当高速离心时,分子量比它小的就漏到下面的管子(即外管)中了,分子量比它大的就截留在上面(即内管中),就是超滤的原理。。。。常用于浓缩样品。
❸ 超滤浓缩离心管使用前要怎么处理
可能不来同厂家的产品保存运输条源件不一样。
如果有甘油等保护剂,那就一定要洗干净再加样品。
干的超滤管也要先润湿再用,否则可能不能完全利用膜面积。
最好,用样品buffer润洗下再加样,最大程度保证蛋白活性。尤其是用过后保存在NaOH或乙醇中后。
一般还是离心机甩一下好,使膜充分浸润。
降低吸附的办法有:
1,蛋白浓度不要过低
2,尽量选用纤维素的低吸附超滤管
3,用前可以用Tween 80等去垢剂润洗(不影响蛋白活性的前提下)
4,加入保护蛋白,如BSA(不影响蛋白后续使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中,4C保存,防止长菌,依不同样品可以重复使用不同的次数。
❹ 30kd超滤管最大转速多少
30kd超滤管最大转速4000rpm。最大不能超过4000g,离心5-8分钟,即可将4ml样品浓缩至1ml以下至几十微升。一般是用来分离血浆。血浆蛋白的分离将血清加入到30kd分子量的超滤管中,将超滤管嵌套进入嵌套管中,进行高速离心,转速12000转每分钟,离心10分钟。离心结束后,将嵌套管中的液体收集,得到初步的组织液。
❺ 超滤离心管可以灭菌吗
1、可以用70%的酒精消毒
2、如果是高温高压灭菌,要注意灭完菌后,管里面的超滤膜是处于湿润的状态,所以需要立即使用,因为膜湿润后就不能干
❻ 超滤浓缩离心速度多少
5000r/min左右。超滤管的离心转速根据不同体积,不同膜孔径有些许差异,一般在5000r/min左右。
❼ 超滤管怎么放盖不会碎
超滤管的盖不会碎。超滤离心管具有快速超滤功能,能够达到较高的浓缩倍数,轻松实现从稀释和复杂的混和样本中浓缩回收目的产物。垂直设计的超滤膜以及较大的有效滤膜表面积有助于快速的样本处理,获得较高样本回收率(通常> 90%) ,并达到30倍的浓缩。
根据标称分子量限值(NMWL)的不同,典型处理时间为10-30分钟。超滤膜的垂直设计也最大程度降低了溶质极化造成的滤膜结垢;死体积设计能有效防止过度离心使样本干掉而造成样本损失。收集滤出液后,浓缩样本(截留部分)可通过一个简便的倒置(上下反转)离心步骤而实现高效回收。超滤管未经消毒,仅供一次使用。
❽ 超滤离心管能分离蛋白和聚乙二醇吗
超滤离心管可以用来分离蛋白和聚乙二醇的
聚乙二醇(PEG)是一种分子量内很小的试剂,而超滤管的容截留分子量一般是在3000道尔顿~10000道尔顿之间。绝大多数蛋白可以被截留在超滤管上层,而聚乙二醇可以穿透滤膜到达超滤管下层
所以超滤离心管可以用来分离蛋白和聚乙二醇的
❾ 超滤离心管放一般的离心机能用么
般的离心机有两种转子,一种是吊篮式的转子,一种是角转子.当然两种都可以用来转超滤管浓缩,不过角转子效率会差很多,就是你离心时间长但浓缩体积还是不大.吊篮转子效率比较高一些.