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离子交换柱赶走气泡

发布时间:2023-01-11 16:43:18

离子交换柱有气泡对纯化有影响吗

有影响,会导致复蛋白纯化的纯度可能制产生影响。
因为离子柱中有气泡,液体会直接通过这部分高度的离子柱,既含气泡的离子柱没有起到交换作用,如果全部的离子柱高度不够,就有可能使杂质离子吸收不彻底,既会对最终产物的纯度产生影响。

② 为什么离子交换树脂中不允许引进气泡

如果离子交换树脂中有气泡,则气泡所在位置的树脂就不可能再与水或溶液接触了,这部分树脂就失去了交换能力,总交换容量就下降了.
所以,防止气泡进入离子交换柱的目的是提高交换容量.

③ 装好的离子交换柱因没有气泡为什么

这部分树脂就失去了交换能力,总交换容量就下降了。装好的离子交换柱因没有气泡是因为这部分树脂就失去了交换能力,总交换容量就下降了,离子交换柱是指用来进行离子交换反应的柱状压力容器,是管柱法离子交换的交换设备。在实验室、工业中常被使用。按再生方式分可分为体内再生混床、体外再生混床、阴树脂外移再生混床三种,在使用范围上可分为实验室用离子交换柱、工业用离子交换柱。

④ 急求~离子交换柱清洗方法

离子交换层析
Tina 发表于 2006-2-21 12:21:00
材料与仪器

DEAE-32纤维素,pH8.0 0.01 mol/L Tris-HCl,工程菌破碎离心后的上清液;

层析柱

二、 方法与步骤

1) 装柱:

用水清洗层析柱,柱内留存水距底部约1cm,加入18ml介质(凝胶溶液)。

2) 平衡:

加0.01M,PH8.0,tris-HCl缓冲液,直至流出液PH与缓冲液一致。

3) 上样:

用量筒量出上清液体积,再加入等体积缓冲液混合,取EP管留1.5ml。待柱中水流出,至刚好覆盖凝胶表面,靠璧缓慢加样。

4) 用50ml缓冲液洗涤,用EP管随机收集样品穿出液和洗涤穿出液。

5) 洗脱:

将梯度洗涤仪和层析柱连接,洗脱瓶A(混合器)加200µl缓冲液,开口打开至两瓶液面相平,相通管道出无气泡,关闭连接,A中加入6gNaCl溶解,把装置放在梯度混合仪上,开动搅拌器开关,打开A和B的连接通道,层析柱下端连收集器,收集洗脱流出液。

6) 控制流速,约4min/管,2-3ml/管。

分子筛的是凝胶层析
Sephadex G-100凝胶层析
Tina 发表于 2006-2-21 12:27:00
材料与仪器

Sephadex G-100,0.5 mol/L pH8.0 Tris-HCl,浓缩液

层析柱

二、 方法与步骤

1) Sephadex G-100 凝胶预处理

a) 100ml烧杯,称取5克sephadex G-100,加入50ml去离子水,浸泡溶胀24小时。

b) 倾去sephadex G-100溶胀后凝胶上层的水,加入凝胶等体积的1.0 mol/L NaOH液处理,用搅棒轻轻搅动,并浸泡1小时处理后倾去。用去离子水洗涤。洗涤过程中,用倾去法除去细颗粒。其方法是用搅棒将凝胶搅匀(注意不要过分用力搅拌,以防止颗粒破碎),放置数分钟,将未沉淀的细颗粒随上层水倒掉。浮选3-5次,直至上层没有细颗粒为止,再浸泡水洗至PH中性。

c) 将Sephadex G-100凝胶水溶液盛放于抽滤瓶中,用洗耳球塞住杯口,减压抽气30分钟,除去凝胶溶液内的气泡,将脱气后的凝胶溶液轻轻倒入烧杯中,其中盛有1/2去离子水。

2) 装柱

a) 层析柱(1.0Î50cm)用水清洗干净,柱的上、下端联接塑料管接上小乳胶管,装上螺旋夹。将层析柱垂直装好。校直过程用下端绑有钥匙的绳子挂于铁架的不同位置,从多角度校正使柱垂直。打开柱上端口,从柱底下出口管朝柱内注入水,使柱底全部充满水而不留气泡,关闭柱出口。最终柱内留存有2 cm的水。从出口处接上一根直径2 mm细塑管,塑管另一端固定在柱的上端部位。

b) 搅动凝胶溶液(切勿搅动太快,以免空气再逸入),使形成均一的薄胶浆,并立即沿玻棒倒入层析管内,让加入的凝胶在柱内自然沉降,待柱底面上积起约1-2 cm的凝胶床后,打开柱出口水流。随着柱内水的流出,上面不断加入凝胶液,使形成的凝胶床面上有凝胶连续下降(如果凝胶床面上不再有凝胶颗粒下降,应该用搅棒均匀地将凝胶床搅起数厘米高,然后再加凝胶,不然就会形成界面,影响层析效果)。

c) 凝胶沉积到柱内凝胶是否均匀,有否“纹路”或气泡。若层析柱不均一,必须重新装柱。

3) 平衡

柱装好后,使层析床稳定15-20分钟,然后连接洗脱瓶出口和层析柱顶端,用3-5倍体积地缓冲液平衡层析柱。平衡过程中控制上柱缓冲液地进柱操作压保持恒定。保持流速每滴/10秒。直至流出液的PH与上柱缓冲液完全相同。

4) 样品洗脱

a) 上样准备:

i) 上样前打开层析柱上端,先检查凝胶床界面是否平整,如果倾斜不平整,可用玻棒将凝胶床界面轻轻搅起后,再使凝胶自然沉降,形成平整状态的凝胶床界面。用毛细吸管小心吸去大部分清液,然后让液面自然下降,直至几乎露出凝胶床界面。

ii) 样品放入高速离心机,12000r/min、离心5 min。

iii) 上样前吸取50µl样品于EP管中,以备走电泳。

b) 样品上样:

i) 将样品由玻棒引流沿管壁加入到凝胶床面上,注意不要将床面凝胶冲起。同时打开层析柱下面流出液开关(控制流速1滴/20秒),保持层析柱下面流出滴速与上样的滴速一致,控制凝胶床界面不能脱水,并控制样品区带尽量狭窄。

ii) 当1.5ml样品全部加入后,用 1-2 ml的0.5mol/L PH8.0 Tris-HCl洗脱液同上样时一样地保持层析柱下面流出滴速与上样的滴速一致以控制凝胶床界面不能脱水,小心清洗凝胶床界面表面,使黏附着的样品全部洗入凝胶床。

iii) 然后开始控制上样的滴速大于层析柱下面流出滴速,使几乎与凝胶床界面相平的洗脱液液面慢慢提高至凝胶床界面高出2cm左右,封闭层析柱上端。

iv) 保持层析柱上柱洗脱液入口处与层析柱下面流出处有一定势压。控制上柱缓冲液的进柱操作压保持恒定。

c) 洗脱:

用0.1 mol/L PH8.0 Tris-HCl 缓冲液洗脱,用部分收集器收集,4分钟/管(约2-3ml/管),收集约1-30管。

5) 酶活、酶浓度测定,参见2.6.2,2.6.3

6) 最高酶活收集管洗脱液留50µl,以备走电泳。

7) 将酶活较高的收集液10~14管合并,测定总体积为7.1 ml,精确测定酶活性。并用考马思亮蓝测定蛋白浓度。测酶活时体系稀释了200倍,定蛋白时无稀释。

⑤ 离子交换法测定溶度积常数实验中交换柱如何避免产生气泡

离子交换是溶液中的离子与某种离子交换剂上的离子进行交换的作用或现象,是借助于固体离子交换剂中的离子与稀溶液中的离子进行交换,以达到提取或去除溶液中某些离子的目的,是一种属于传质分离过程的单元操作。
离子交换是可逆的等当量交换反应。离子交换树脂充夹在阴阳离子交换膜之间形成单个处理单元,并构成淡水室。离子交换速度随树脂交联度的增大而降低,随颗粒的减小而增大。离子交换是一种液固相反应过程,必然涉及物质在液相和固相中的扩散过程。
离子交换主要用于水处理(软化和纯化);溶液(如糖液)的精制和脱色;从矿物浸出液中提取铀和稀有金属;从发酵液中提取抗生素以及从工业废水中回收贵金属等。

⑥ 装好的离子交换柱应没有气泡,为什么

装好的离子交换柱应没有气泡是为了提高交换容量。根据查询的相关信息显示,离子交换树脂中有气泡,则气泡所在位置的树脂就不可能再与水或溶液接触了,这部分树脂就失去了交换能力,总交换容量就下降了。

⑦ 在水的软化实验中,离子交换柱内有气泡对实验有何影响

水流来速度会慢下来,离子交换效果也自不好,使柱子的容量降低。
有了气泡以后相当于柱子的截面积小了,压降增大,流速就会降低。
离子交换要靠溶液和交换树脂相接触。气泡会占据一定的树脂的表面积,使交换不充分,同时也降低了柱子的容量。

⑧ 我在使用离子交换树脂制水时,发现装有阴离子的水柱,随着制水时间的增加,表面的气泡越来越多,慢慢往下

正常好像是先阴床,再阳床。。。即阴阳床。
应该是哪里漏气了吧。

⑨ 怎样除去阳离子交换树脂中的气泡

如果是装柱的话,可以在柱子下面留些水,然后缓缓倒入树脂,让其自然沉淀,这样就没有气泡了。如何已经有气泡的话可以尝试让树脂再“运动起来”然后沉降(如果已经使用过的树脂不建议使用)。

⑩ 硫酸钙溶度积的测定

难溶强电解质溶度抄积常数Ksp的测定一、 实验目的1、 了解极稀溶液浓度的测量方法;2、 了解测定难溶盐Ksp的方法;3、 巩固活度、活度系数、浓度的概念及相关关系。二、 实验原理 在一定温度下,一种难溶盐电解质的饱和溶液在溶液中形成一种多项离子平衡,一般表示式为:这个平衡常数Ksp称为溶度积常数,或简称溶度积,严格地讲Ksp应为相应个离子活度的乘积,因为溶液中个离子有牵制的作用,但考虑的难容电解质饱和溶液中离子强度很小,可警世的用浓度来代替活度。就AgCl而言 从上式可知,若测出难溶电解质饱和溶液中个离子的浓度,就可以计算出溶度积Ksp。因此测量最终还是测量离子浓度的问题。若设计出一种测量浓度的方法,就找到了测量Ksp的方法。具体测量浓度的方法,包括滴定法(如AgCl溶度积的测定),离子交换法(如CuSO4溶度积的测定),电导法(如AgCl溶度积的测定),离子电极法(如氯化铅溶度积的测定),电极电势法(Ksp与电极电势的关系),即分光光度法(如碘酸铜溶度积的测定)等

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