凝胶过滤hplc流动相

1. HPLC的常用术语解释

高效液相色谱法(HPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。接下来我为大家整理了HPLC的常用术语解释，希望对你有帮助哦!

第一部分色谱曲线

1、色谱图(chromatogram)：色谱柱流出物通过检测器系统时所产生的响应信号对时间或流动相流出体积的曲线图，或者通过适当的 方法 观察到的纸色谱或薄层色谱斑点、谱带的分布图。

2、(色谱)峰(chromatographic peak)：色谱柱流出

3、峰底(peak base)：峰的起点与终点之间的连接的直线

4、峰高(h ，peak height)：色谱峰最大值点到峰底的距离(图1 中的BE)。

5、峰宽(W ，peak width)：在峰两侧拐点(图1 中的F ，G)处所作切线与峰底相交两点的距离

6、半高峰宽(W h/2 ，peak withd at half height)：通过峰高的中点作平行于峰底的直线，此直线与峰两侧相交两点之间的距离(图1 中的HJ)。

7、峰面积(A ，peak area)：峰与峰底之间的面积

8、拖尾峰(tailing peak)：后沿较前沿平缓的不对称的峰。

9、前伸峰(leading peak)：前沿较后沿平缓的不对称的峰。(又叫伸舌峰、前延峰)

10、假峰(ghost peak)：除组分正常产生的色谱峰外，由于仪器条件的变化等原因而在谱图上出现的色谱峰，即并非由试样所产生的峰。这种色谱峰并不代表具体某一组分，容易给定性、定量带来误差。(又叫鬼峰)

11、畸峰(distrorted peak)：形状不对称的色谱峰， 前伸峰、拖尾峰都属于这类。

12、反峰(negative peak)：也称倒峰、负峰，即出峰的方向与通常的方向相反的色谱峰。

13、原点(origin)：纸或薄层板上滴加试样部位的中心点

14、斑点(spot)：平面色谱法中，组分在展开和显谱后呈现近似圆形或椭圆形的色区

15、区带(zone)：在色谱柱、纸或薄层板上被分离组分所占的区域。

16、复斑(multiple spot)：一种组分展开后形成两个或多个清晰斑点。

17、区带拖尾(zone tailing)：由于物理、化学等作用的影响，一种组分在展开后形成的彗星形状斑点。

18、基线(base line)：在正常操作条件下，仅有流动相通过检测器系统时所产生的响应信号曲线。

19、基线漂移(baseline drift)：基线随时间定向的缓慢变化。

20、基线噪声(N，baseline noise)：由于各种原因而引起的基线波动。

21、统计矩(moment)：色谱流出曲线是组分在检测器中浓度或质量依时间的统计分布曲线，响应值对应于分布密度。组分在柱内迁移时间r次幂的数学期望称为流出曲线的r阶原点矩。而组分在柱内迁移时间与平均迁移时间差的r次幂的数学期望称为流出曲线的r阶中点矩。

22、一阶原点矩(first origin moment)：组分在柱内迁移时间的数学期望。当流出曲线为对称峰时，即为组分的保留时间。

23、二阶中心矩( μ2 ，second central moment)：二阶中心矩为流出曲线的方差。定义为：μ2=E(t-Et)2 式中，E代表平均。

24、三阶中心矩(μ3 ，third central moment)：定义为：μ3=E(t-Et)3

可以表示流出曲线的不对称程度。峰形对称时μ3=0，前伸峰μ3<0，拖尾峰μ3>0.

第二部分分离模式

1、液相色谱法(liquid chromatography ，LC)：用液体作流动相的色谱法。

2、液液色谱法(liquid liquid chromatography，LLC )：将固定液涂渍在载体上作为固定相的液相色谱法。

3、液固色谱法(liquid solid chromatography，LSC )：用固体(一般指吸附剂)作为流动相的液相色谱法。

4、正相液相色谱法(normal phase liquid chromatography ，NPLC)：固定相的极性较流动相的极性强的液相色谱法。

5、反相液相色谱法(reversed phase liquid chromatography，RPLC )：固定相的极性较流动相的极性弱的液相色谱法。

6、柱液相色谱法(liquid column chromatography )：在柱管内进行组分分离的液相色谱法。

7、高效液相色谱法(high performance liquid chromatography，HPLC )：具有高分离效能的柱液相色谱法。

8、尺寸排除色谱法(size exclusion chromatography，SEC )：用化学惰性的多孔性物质作为固定相，试样组分按分子体积(严格来讲是流体力学体积)进行分离的液相色谱法。

9、凝胶过滤色谱法：(gel filtration chromatography )：水或水溶液作为流动相的体积排除色谱法。

10、凝胶渗透色谱法：(gel permeation chromatography ，GPC)：有机溶剂作为流动相的体积排除色谱法。

11、亲和色谱法(affinity chromatography )：用连接在基体上的配位体做固定相，使其与蛋白质或其他大分子发生可逆的高选择性的相互作用，利用不同亲和力进行分离的液相色谱法。

12、离子交换色谱法(ion exchange chromatography ，IEC)：以离子交换作用分离离子型化合物的液相色谱法。

13、离子色谱法(ion chromatography )：以含有某种特定离子的水溶液作为流动相，流出液通过抑制柱(或不通过抑制柱)，在降低流动相背景信号的条件下用于分离离子的液相色谱法。

14、离子抑制色谱法(ion suppression chromatography )：通过调节流动相的PH值来抑制试样组分的电离，以分离离子型化合物的液相色谱法。

15、离子对色谱法(ion pair chromatography )：用形成离子对化合物进行分离的液相色谱法。16、疏水作用色谱法(hydrophobic interation chromatography )：用适度疏水性的固定相，以含盐的水溶液作为流动相，借疏水作用分离生物大分子化合物的液相色谱法。

17、制备液相色谱法(preparative liquid chromatography)：用能处理较大量试样的色谱系统，进行分离、切割和收集组分，以提纯化合物的液相色谱法。

18、平面色谱法(planar chronatography)：在平面介质上进行组分分离的色谱法，也叫平板色谱法。

第三部分 常用术语

M：分子量

MC：二氯甲烷(methylene chloride)

MeOH：甲醇(methanol)

MS：质谱

h：峰高

HPLC：高效液相色谱

ID：内径，dC

A：吸收度(式3.1，3.2);也作面积

ACN：乙腈(acetonitrile)

B(%B)：二元流动相中的强溶剂(% v/v)

C8，C18：烷基键合相的键长度(八烷基或十八烷基)

CD：环糊精(cyclodextrin)

CV：变异系数(通常以%表示);式15.3

dC：色谱柱内径(cm)

dP：颗粒直径(μm)

DAD：二极管阵列检测器

EC：电化学(检测器)

F：流速(ml/min)

FL：荧光(检测器)

GS：梯度斜度参数(式8.2a);k*=20/GS

IEC：离子交换色谱(ion-exchange chromatography)

IPC：离子对色谱 (ion-paire chromatography)

k：保留因子(式2.4)

k*：梯度洗脱中，k的有效值或平均值(式8.1)

ka，kZ：色谱图中，首峰(a)和末峰(z)的k值

L：色谱柱长度(cm)

LC-MS：液相色谱-质谱

MTBE：甲基-叔-丁醚(methyl-t-butyl ether)

N：色谱柱塔板数(式2.82.8b)

N：噪音(式3.3，图3.3)

NARP：非水反相HPLC

NPC：正相色谱

P：色谱柱压力降(通常以psi表示)(式2.9)

pKa：酸或供质子碱的酸性常数

PAH：多环芳烃(polyaromatic hydrocarbon)

RS：分离度(式2.1)

RI：折光指数

RPC：反相色谱

S：信号;式3.3;图3.3;以及由式6.1定义的参数

tD：延迟或滞留时间(min，用于梯度洗脱中);等于VD/F

tG：梯度时间(min)

tR：保留时间(min)(图2.2);等于tO(1+k)

tRa，tRz：色谱图中首峰(a)与末峰(z)的保留时间，tR(min)(图8.6a)

tO：色谱柱死时间(min)(式2.5)

t1，t2：相邻谱峰1与谱峰2的保留时间(min)

TEA：三乙胺(triethylamine)

THF：四氢呋喃(tetrahydrofuran)

UV：紫外光谱

VD：延迟或滞留体积(mL);为梯度混合器与色谱柱人口之间的体积(包括混合器的体积)

Vm：色谱柱死体积(mL)(式2.6);Vm为色谱柱内部的流动相体积，不包括附于固定相上的溶剂

Vmax：最大样品体积(mL)(式13.1)

Va：样品体积(mL)

w：重量(mg);也作半峰高处的峰宽(min)

wmax：不超载色谱柱的最大进样量(mg)(式2.17)

wS：色谱柱的饱和容量(mg)(式13.4)

W：峰底宽(min)(图2.2)

Wth：大进样量对峰底宽的贡献(min)(式13.2)

WO：小进样量的峰底宽(min)

W1/2：半峰高处的峰宽(min)(图1.1)

a：分离因子，等于k2/k1，其中k2与k1分别为相邻谱峰2和谱峰1的k值

△tR：tRz-tR(min)

△%B：梯度洗脱期间，%B的变化

ε：摩尔吸收系数

εo：正相HPLC 中溶剂或溶剂混合液的强度

η：粘度(CP)

<<不常有符号>>

A，B，C：式2.11中的常数;数值A，B与C随k值而变化，但改变 其它 条件或溶质时基本不变

A，B，C：式2.10中的常数;数值A，B与C随条件和样品而变化

A，B，C：式2.10a中的常数;数值A，B与C随条件和样品而变化

C：谱峰最大值处的浓度(mol/L)

CO：注入样品中溶质的浓度(mol/L)

GI：化学电离(MS)

DGA：N，N-二甲基-1-萘酰胺;(也作二甲基苯胺dimethylaniline)

EI：电子电离(MS)

ELS：蒸发光散 射击 (Evaporative light scattering)

EtOAc：乙酸乙酯(ethyl acetate)

FAB：快速原子轰击(MS)

FD：场解吸附(MS)

h：折合板高，等于H/dP(式2.11)

HB：羟基苯甲酸(hydrxybenzoic acid)(图7.8，7.17与7.19)

HFBA：七氟丁酸(hyptafluorobutyric acid)

IPA：异丙醇(isopropanol)

kW：以水作为流动相的k值(式6.1)

LCEC：液相色谱电化学检测器

LD：激光解吸(MS)

LSIMS：液态二级离子质谱

MALDI：基质辅助激光解吸电离

MP：对羟苯甲酸甲酯

[P-]m：流动相中离子对试剂P-的浓度(mmol/L)

PAD：脉冲电流分析检测器

PBP：极性键合相

PD：等离子解吸(MS)

PP：对羟苯甲酸丙酯

PTH：乙内酰苯硫脲

R+，R-：分别为阴离子与阳离子离子交换色谱柱中的荷电功能基困(式7.4和7.5[如-N(CH3)3+和-SO3-]

RF：响应因子

TBA+：四丁基铵离子

tBME：见MTBE

TMS：三甲基硅烷(trimethylsilyl;也为C1)

TNB：1，3，5-三硝基苯(1，3，5-trinitrobenzene)

TOF MS：时间飞行质谱

TSP：热喷雾(MS)

u：流动相通过色谱柱的速度(cm/s);等于L/to

V：峰底宽(mL)

Vc：色谱柱内峰展宽对V的贡献;也作小样品量峰底宽(mL)(式2.16)

VR：保留体积(mL)

W：峰宽(min)(式2.12)

Wc，WS，：分别为色谱柱，进样器，连续管和流通池对W的贡献(min)

Wlc，Wfc：(式2.12)

X，X1，：无特征结构的溶质(图7.8，7.17和7.19)

X2，X3

XB：流动相中的B溶剂的摩尔分数

V：折合速度，等于udp/Dm(式2.11)

б：高斯曲线的标准偏差;等于峰底的1/4

ι：检测器响应时间常数(S)

φ：流动相中B溶剂的体积分数;等于0.0

2. 凝胶过滤色谱出峰少怎么办我用的流动相是0.02mold的醋酸钠溶液，pH5.0.

看看是不是柱子堵上了，用色谱异丙醇冲洗，我们这有卖的

3. 高效液相色谱仪的流动相和固体相哪个极性大

根据流动相和固定相相对极性不同，液相色谱分为正相色谱和反相色谱。流动相极性大于固定相极性的，称为反相色谱。固定相极性大于流动相极性的，称之为正相色谱。
高效液相色谱仪的系统由储液器、泵、进样器、色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。储液器中的流动相被高压泵打入系统，样品溶液经进样器进入流动相，被流动相载入色谱柱(固定相) 内，由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数，在两相中做相对运动时，经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程，各组分在移动速度上产生较大的差别，被分离成单个组分依次从柱内流出，通过检测器时，样品浓度被转换成电信号传送到记录仪，数据以图谱形式打印出来。
原理：分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关，也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中，K有不同的概念：吸附色谱法为吸附系数，离子交换色谱法为选择性系数（或称交换系数），凝胶色谱法为渗透参数。但一般情况可用分配系数来表示。
在条件（流动相、固定相、温度和压力等）一定，样品浓度很低时（Cs、Cm很小）时，K只取决于组分的性质，而与浓度无关。这只是理想状态下的色谱条件，在这种条件下，得到的色谱峰为正常峰；在许多情况下，随着浓度的增大，K减小，这时色谱峰为拖尾峰；而有时随着溶质浓度增大，K也增大，这时色谱峰为前延峰。因此，只有尽可能减少进样量，使组分在柱内浓度降低，K恒定时，才能获得正常峰。
色谱：（high performance liquid chromatography,HPLC）也叫高压液相色谱（high pressure liquid chromatography）、高速液相色谱（high speed liquid chromatography）、高分离度液相色谱（high resolution liquid chromatography）等或Efficient liquid chromatographyspectrometry。是在经典液相色谱法的基础上，于60年代后期引入了气相色谱理论而迅速发展起来的。它与经典液相色谱法的区别是填料颗粒小而均匀，小颗粒具有高柱效，但会引起高阻力，需用高压输送流动相，故又称高压液相色谱。又因分析速度快而称为高速液相色谱。
高效液相色谱是目前应用最多的色谱分析方法，高效液相色谱系统由流动相储液体瓶、输液泵、进样器、色谱柱、检测器和记录器组成，其整体组成类似于气相色谱，但是针对其流动相为液体的特点作出很多调整。HPLC的输液泵要求输液量恒定平稳；进样系统要求进样便利切换严密；由于液体流动相粘度远远高于气体，为了减低柱压高效液相色谱的色谱柱一般比较粗，长度也远小于气相色谱柱。HPLC应用非常广泛，几乎遍及定量定性分析的各个领域。
使用高效液相色谱时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。高效液相色谱作为一种重要的分析方法，广泛的应用于化学和生化分析中。高效液相色谱从原理上与经典的液相色谱没有本质的差别，它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相，适于分析高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机化合物。
主要类型：

液固吸附色谱：
分离原理 液固色谱是基于各组分吸附能力的差异进行混合物分离的，其固定相是固体吸附剂。
固定相 ；吸附色谱固定相可以分为极性和非极性两大类。
流动相 ；流动相要求：选用的溶剂应当与固定相互不相溶，并能保持色谱柱的稳定性。选用的溶剂应有高纯度，以防所含微量杂质在柱中积累，引起柱性能的改变。选用的溶剂性能应与所使用的检测器相匹配，如果使用紫外吸收检测器，就不能选用在检测波长下有紫外吸收的溶剂；若使用示差折光检测器，就不能用梯度洗脱。选用的溶剂应对样品有足够的溶解能力，以提高测定的灵敏度。选用的溶剂应具有低的黏度和适当低的沸点。应尽量避免使用具有显著毒性的溶剂，以保证工作人员的安全
应用：液固色谱是以表面吸附性能力为依据的，所以它常用于分离极性不同低的化合物，也能分离那些具有相同极性基团，但数量不同的样品。

液液分配色谱：
分离原理 ；分配色谱法的原理与液液萃取相同，都是分配定律。
固定相 ；分配色谱固定相由两部分组成，一部分是惰性载体，另一部分是涂渍在惰性载体上的固定液。
流动相 ；分内色谱中，要求流动相尽可能不与固定液互溶。
应用 ；既能分离极性化合物，又能分离非极性化合物。由于不同极性键合固定相的出现，分离的选择性可得到很好的控制。

键合相色谱：
分离原理 ：正键合相色谱分离远离：使用的是极性键和固定性，溶质在此类固定相上的分离机理属于分配色谱。
反键合相色谱分离原理：使用的是极性较小的键合固定相，其分离机理可用疏溶剂作用理论来解释。
固定相 ；按极性大小可分为非极性、弱极性、极性化学键合固定相三种。
流动相：正键合相色谱中，采用和反相液液分配色谱相似的流动相，流动相的主体成分为己烷或庚烷。反相键合相色谱中，流动相采用和反相液液分配色谱相似的流动相，主题为水。
应用：正键合相色谱法的应用：多用于分离各类极性化合物如染料、炸药、多巴胺、氨基酸等；反键合相色谱法的应用：由于操作简单，稳定性和重复性好，该方法已成为一种通用型液相色谱分析方法。在生物化学、医药研究、食品分析和环境污染分析等多个领域有了很大的应用和发展。

凝胶色谱：凝胶色谱又称分子排阻色谱，它是按照分子尺寸大小顺序进行分离的一种色谱方法。凝胶色谱法的固定相凝胶是一种多孔性的聚合材料，有一定的形状和稳定性。根据所用流动相的不同，凝胶色谱法可以分为两类：即用水溶剂做流动相的凝胶过滤色谱法（GFC）与用有机溶剂如四氢呋喃做流动相的凝胶渗透色谱法（GPC）。

4. 高效液相色谱方法及应用的目录

第一章 绪论
第一节 高效液相色谱法的特点
一、与经典液相(柱)色谱法比较
二、与气相色谱法比较
三、高效液相色谱法的优点
四、高效液相色谱方法发展简介
第二节 高效液相色谱法的分类
一、按溶质在两相分离过程的物理化学原理分类
二、按溶质在色谱柱洗脱的动力学过程分类
第三节 高效液相色谱法的应用范围和局限性
一、应用范围
二、方法的局限性
参考文献
第二章 高效液相色谱仪简介
第一节 流动相及储液罐
一、储液罐
二、流动相脱气
第二节 高压输液泵及梯度洗脱装置
一、高压输液泵
二、输液系统的辅助设备
三、梯度洗脱装置
第三节 进样装置
一、停流进样装置
二、六通阀进样装置
三、自动进样器
第四节 色谱柱
一、柱材料及规格
二、柱填料
三、保护柱
四、柱连接方式
五、柱温控制
第五节 检测器
一、检测器的分类和响应特性
二、紫外吸收检测器
三、折光指数检测器
四、电导检测器
五、荧光检测器
六、蒸发光散射检测器
第六节 色谱数据处理装置
一、微处理机
二、色谱工作站
参考文献
第三章 液固色谱法和液液色谱法
第一节 分离原理
一、吸附系数
二、分配系数
第二节 固定相
一、液固色谱固定相
二、液液色谱固定相
第三节 流动相
一、表征溶剂特性的重要参数
二、液固和液液色谱的流动相
第四节 二元溶剂体系中液固和液液色谱的保留规律
一、溶质保留值的基本方程式
二、液固色谱的保留值方程式
三、液液色谱的保留值方程式
参考文献
第四章 键合相色谱法
第一节 分离原理
一、正相键合相色谱法的分离原理
二、反相键合相色谱法的分离原理
第二节 固定相
一、键合固定相的制备及分类
二、键合固定相的性质
三、使用键合固定相应注意的问题
第三节 流动相
一、溶剂的选择性分组
二、在键合相色谱中选择流动相的一般原则
三、改善色谱分离选择性的方法
四、多元混合溶剂的多重选择性
五、溶质保留值随溶剂极性变化的一般保留规律
六、用线性溶剂化自由能关系（LSER）来表征反相液相色谱中溶质的
保留值方程式
第四节 新型高效液相色谱的固定相和流动相
一、新型高效化学键合固定相
二、化学键合固定相分类方法简介
三、整体色谱柱
四、超热水流动相
第五节 离子对色谱法
一、分离原理
二、固定相、流动相和对（反）离子
三、影响离子对色谱分离选择性的因素
参考文献
第五章 梯度洗脱
第一节 基本原理
一、等度洗脱
二、梯度洗脱
第二节 影响梯度洗脱的各种因素
一、梯度洗脱时间(?t???G)对分离的影响
二、强洗脱溶剂组分B浓度变化范围的影响
三、梯度陡度对保留值的影响
四、柱温变化对保留值的影响
五、梯度洗脱程序曲线形状的影响
六、影响梯度洗脱的其他变量
第三节 优化梯度洗脱的方法
一、建立梯度洗脱方法的一般步骤
二、梯度洗脱中的实验条件
第四节 梯度洗脱的图示方法
一、二元溶剂梯度洗脱
二、三元溶剂梯度洗脱
三、四元溶剂梯度洗脱
四、用极坐标和球面坐标描述梯度洗脱
参考文献
第六章 体积排阻色谱法
第一节 分离原理
一、分布系数
二、体积排阻色谱法的特点
第二节 固定相
一、固定相的分类
二、凝胶固定相的特性参数
三、凝胶色谱柱的制备及谱图特点
第三节 流动相
一、凝胶渗透色谱的流动相
二、凝胶过滤色谱的流动相
第四节 凝胶渗透色谱法测定聚合物分子量分布
一、聚合物分子量、分子量分布及测定的意义
二、凝胶渗透色谱图的解析及数据处理
参考文献
第七章 高效液相色谱法的基本理论
第一节 表征液相色谱柱填充性能的重要参数
一、总孔率
二、柱压力降
三、柱渗透率
第二节 高效液相色谱的速率理论
一、影响色谱峰形扩展的各种因素
二、范第姆特方程式的表达及图示
第三节 诺克斯方程式
一、描述色谱柱性能的折合参数
二、诺克斯方程式
第四节 色谱柱操作参数的优化
一、三个柱操作参数的表达式
二、HPLC中实用柱操作参数的优化
三、柱操作参数优化的图示表达方法
第五节 “无限直径”效应和柱外效应
一、“无限直径”效应
二、柱外效应
第六节 超高效液相色谱
一、超高效液相色谱的理论基础
二、实现超高效液相色谱的必要条件
三、超高效液相色谱的应用
参考文献
第八章 高效液相色谱分离条件的优化
第一节 高效液相色谱中色谱参数的相关性
一、色谱参数的分类
二、色谱参数的相关性
第二节 色谱分离条件优化标准的选择
一、难分离物质对的峰对分离优化标准
二、整体色谱图的优化标准
第三节 色谱响应函数和色谱优化函数
一、Morgan和Deming提出的色谱响应函数
二、Watson和Carr提出的色谱响应函数
三、Glajch和Kirkland提出的色谱优化函数
四、Berridge提出的色谱响应函数
第四节 色谱分离条件的优化方法
一、单纯形法
二、窗图法
三、混合液设计实验法
四、重叠分离度图法
五、等强度洗脱和梯度洗脱的优化图示法
第五节 优化HPLC分离的计算机辅助方法
一、实验设计系统
二、人工智能系统
第六节 高效液相色谱专家系统简介
一、专家系统的组成
二、专家系统的使用方法
参考文献
第九章 微柱液相色谱法
第一节 方法简介
一、微型柱的分类
二、微柱液相色谱法的优点和缺点
第二节 基本理论
一、柱外效应
二、管壁效应
三、稀释效应
四、分离阻抗
第三节 仪器装置
一、输液泵系统
二、进样系统
三、柱系统
四、检测器系统
五、连接管和接头
第四节 微柱的制备
一、评价微柱性能的重要参数
二、影响微柱分离效率的相关参数
三、微柱的制备方法
第五节 微柱液相色谱的新技术
一、纳米液相色谱技术
二、超高压液相色谱技术
参考文献
第十章 二维高效液相色谱法
第一节 描述分离体系效能的参数
一、峰容量
二、信息量
第二节 二维高效液相色谱的技术功能
一、切割功能
二、反冲洗脱功能
三、痕量组分的富集功能
第三节 二维高效液相色谱的流路系统
一、多通路切换阀
二、二维高效液相色谱的流路系统
第四节 二维高效液相色谱在蛋白质组学研究中的应用
参考文献
第十一章 建立高效液相色谱分析方法的一般步骤和实验技术
第一节 样品的性质及柱分离模式的选择
一、样品的溶解度
二、样品的分子量范围
三、样品的分子结构和分析特性
第二节 分离操作条件的选择
一、容量因子和死时间的测量
二、色谱柱操作参数的选择
三、样品组分保留值和容量因子的选择
四、相邻组分的选择性系数和分离度的选择
第三节 高效液相色谱法的实验技术
一、溶剂的纯化技术
二、色谱柱的装填技术
三、色谱柱的平衡、保护与清洗、再生技术
四、梯度洗脱技术
五、色谱柱前和柱后的衍生化技术
六、样品的预处理技术
参考文献
符号表

5. 那些HPLC色谱柱可以用纯水

你问的应该是反相色谱抄柱，因为凝胶过滤用纯水相是司空见惯的。
Agilent的Bonus系列，Aichorm的Aqua系列，都是可以做纯水相的。
但你如果只是考虑梯度起点的高水相比例，那就不必了，普通的C18、C8都可以用纯水相短时间冲洗，不超过10个柱体积，是没什么问题的。

6. 液相色谱出现倒峰是怎么回事

用了非流动相或者与流动相不同酸度溶剂溶解样品，会出现倒峰现象。可以换个溶剂尝试。

液相色谱是其特点是以液体作为流动相，固定相可以有多种形式，如纸、薄板和填充床等。在色谱技术发展的过程中，为了区分各种方法，根据固定相的形式产生了各自的命名，如纸色谱、薄层色谱和柱液相色谱。

经典液相色谱的流动相是依靠重力缓慢地流过色谱柱，因此固定相的粒度不可能太小(100μm～150μm左右)。

分离后的样品是被分级收集后再进行分析的，使得经典液相色谱不仅分离效率低、分析速度慢，而且操作也比较复杂。直到20世纪60年代，发展出粒度小于10μm的高效固定相，并使用了高压输液泵和自动记录的检测器，克服了经典液相色谱的缺点，发展成高效液相色谱，也称为高压液相色谱。

(6)凝胶过滤hplc流动相扩展阅读

离子交换色谱通常用离子交换树脂作为固定相。一般是样品离子与固定相离子进行可逆交换，由于各组分离子的交换能力不同，从而达到色谱的分离。

离子交换色谱法是新发展起来的一项现代分析技术，已广泛用于氨基酸、蛋白质的分析，也适合于某些无机离子。

凝胶色谱法既适用于水溶液的体系，又适用于有机溶剂的体系。当所用的洗脱剂为水溶液时，称为凝胶过滤色谱，其在生物界的应用比较多；采用有机溶剂为洗脱剂时，称为凝胶渗透色谱，在高分子领域应用较多。

液相色谱所用基本概念：保留值、塔板数、塔板高度、分离度、选择性等与气相色谱一致。液相色谱所用基本理论：塔板理论与速率方程也与气相色谱基本一致，但由于在液相色谱中以液体代替气相色谱中气体作为流动相，而液体和气体的性质不相同。

此外，液相色谱所用的仪器设备和操作条件也与气相色谱不同，所以，液相色谱与气相色谱有一定的差别。

7. 凝胶过滤色谱 与凝胶渗透色谱的区别是什么

凝胶色谱以水为流动相的称作凝胶过滤色谱，以有机溶剂为流动相的，称作凝胶渗透色谱。

8. 用凝胶渗透色谱（GPC），其中用水作为流动相

先纠正一下，凝胶渗透色谱（GPC）是以有机溶剂为流动相的，用水做流动相的叫凝胶过滤色谱（GLC），两者都是分子排阻色谱。
用水做流动相的凝胶色谱，通常用来分析蛋白质、多肽（一般用buffer做流动相），如果你想做这方面的分析，成本可能比较高，主要是柱子很贵，比较常见的如TSK的柱子，一般都要上万，柱子比较娇气，很容易损坏。
不知道你在哪个城市，一般在生物制品研究所、血液制品研究所、比较大的防疫站、相关产品的药厂等单位有使用，可以和当地的类似单位联系，如果项目是人家现成的，检测样品批量也多的话，单价应该比较低。