去离子过滤柱

⑴ 急求~离子交换柱清洗方法

离子交换层析
Tina 发表于 2006-2-21 12:21:00
材料与仪器

DEAE-32纤维素，pH8.0 0.01 mol/L Tris-HCl，工程菌破碎离心后的上清液；

层析柱

二、 方法与步骤

1） 装柱：

用水清洗层析柱，柱内留存水距底部约1cm，加入18ml介质（凝胶溶液）。

2） 平衡：

加0.01M,PH8.0,tris-HCl缓冲液，直至流出液PH与缓冲液一致。

3） 上样：

用量筒量出上清液体积，再加入等体积缓冲液混合，取EP管留1.5ml。待柱中水流出，至刚好覆盖凝胶表面，靠璧缓慢加样。

4) 用50ml缓冲液洗涤，用EP管随机收集样品穿出液和洗涤穿出液。

5) 洗脱：

将梯度洗涤仪和层析柱连接，洗脱瓶A（混合器）加200µl缓冲液，开口打开至两瓶液面相平，相通管道出无气泡，关闭连接，A中加入6gNaCl溶解，把装置放在梯度混合仪上，开动搅拌器开关，打开A和B的连接通道，层析柱下端连收集器，收集洗脱流出液。

6） 控制流速，约4min/管，2-3ml/管。

分子筛的是凝胶层析
Sephadex G-100凝胶层析
Tina 发表于 2006-2-21 12:27:00
材料与仪器

Sephadex G-100，0.5 mol/L pH8.0 Tris-HCl，浓缩液

层析柱

二、 方法与步骤

1） Sephadex G-100 凝胶预处理

a) 100ml烧杯，称取5克sephadex G-100,加入50ml去离子水，浸泡溶胀24小时。

b) 倾去sephadex G-100溶胀后凝胶上层的水，加入凝胶等体积的1.0 mol/L NaOH液处理，用搅棒轻轻搅动，并浸泡1小时处理后倾去。用去离子水洗涤。洗涤过程中，用倾去法除去细颗粒。其方法是用搅棒将凝胶搅匀（注意不要过分用力搅拌，以防止颗粒破碎），放置数分钟，将未沉淀的细颗粒随上层水倒掉。浮选3-5次，直至上层没有细颗粒为止，再浸泡水洗至PH中性。

c) 将Sephadex G-100凝胶水溶液盛放于抽滤瓶中，用洗耳球塞住杯口，减压抽气30分钟，除去凝胶溶液内的气泡，将脱气后的凝胶溶液轻轻倒入烧杯中，其中盛有1/2去离子水。

2) 装柱

a) 层析柱(1.0Î50cm)用水清洗干净，柱的上、下端联接塑料管接上小乳胶管，装上螺旋夹。将层析柱垂直装好。校直过程用下端绑有钥匙的绳子挂于铁架的不同位置，从多角度校正使柱垂直。打开柱上端口，从柱底下出口管朝柱内注入水，使柱底全部充满水而不留气泡，关闭柱出口。最终柱内留存有2 cm的水。从出口处接上一根直径2 mm细塑管，塑管另一端固定在柱的上端部位。

b) 搅动凝胶溶液（切勿搅动太快，以免空气再逸入），使形成均一的薄胶浆，并立即沿玻棒倒入层析管内，让加入的凝胶在柱内自然沉降，待柱底面上积起约1-2 cm的凝胶床后，打开柱出口水流。随着柱内水的流出，上面不断加入凝胶液，使形成的凝胶床面上有凝胶连续下降（如果凝胶床面上不再有凝胶颗粒下降，应该用搅棒均匀地将凝胶床搅起数厘米高，然后再加凝胶，不然就会形成界面，影响层析效果）。

c) 凝胶沉积到柱内凝胶是否均匀，有否“纹路”或气泡。若层析柱不均一，必须重新装柱。

3） 平衡

柱装好后，使层析床稳定15-20分钟，然后连接洗脱瓶出口和层析柱顶端，用3-5倍体积地缓冲液平衡层析柱。平衡过程中控制上柱缓冲液地进柱操作压保持恒定。保持流速每滴/10秒。直至流出液的PH与上柱缓冲液完全相同。

4） 样品洗脱

a) 上样准备：

i) 上样前打开层析柱上端，先检查凝胶床界面是否平整，如果倾斜不平整，可用玻棒将凝胶床界面轻轻搅起后，再使凝胶自然沉降，形成平整状态的凝胶床界面。用毛细吸管小心吸去大部分清液，然后让液面自然下降，直至几乎露出凝胶床界面。

ii) 样品放入高速离心机，12000r/min、离心5 min。

iii) 上样前吸取50µl样品于EP管中，以备走电泳。

b) 样品上样：

i) 将样品由玻棒引流沿管壁加入到凝胶床面上，注意不要将床面凝胶冲起。同时打开层析柱下面流出液开关（控制流速1滴/20秒），保持层析柱下面流出滴速与上样的滴速一致，控制凝胶床界面不能脱水，并控制样品区带尽量狭窄。

ii) 当1.5ml样品全部加入后，用 1-2 ml的0.5mol/L PH8.0 Tris-HCl洗脱液同上样时一样地保持层析柱下面流出滴速与上样的滴速一致以控制凝胶床界面不能脱水，小心清洗凝胶床界面表面，使黏附着的样品全部洗入凝胶床。

iii) 然后开始控制上样的滴速大于层析柱下面流出滴速，使几乎与凝胶床界面相平的洗脱液液面慢慢提高至凝胶床界面高出2cm左右，封闭层析柱上端。

iv) 保持层析柱上柱洗脱液入口处与层析柱下面流出处有一定势压。控制上柱缓冲液的进柱操作压保持恒定。

c) 洗脱：

用0.1 mol/L PH8.0 Tris-HCl 缓冲液洗脱，用部分收集器收集，4分钟/管（约2-3ml/管），收集约1-30管。

5） 酶活、酶浓度测定，参见2.6.2，2.6.3

6） 最高酶活收集管洗脱液留50µl，以备走电泳。

7） 将酶活较高的收集液10~14管合并，测定总体积为7.1 ml，精确测定酶活性。并用考马思亮蓝测定蛋白浓度。测酶活时体系稀释了200倍，定蛋白时无稀释。

⑵ 化学实验中使用的去离子水可以用纯净水代替吗

不可以！因为所谓的纯净水是经过多层过滤的水，只是去除了水中的微生物、泥沙等杂物，过滤并不能除去水中离子。
如果是蒸馏水是可以的，多次蒸馏水最接近纯水，但纯水不等同于饮用的纯净水。

⑶ 过滤50到100公斤的去离子水有什么简易的方法

弄个不锈钢水槽，就像家里洗碗槽一样，大小和那个差不多就行，然后去买一袋离子交换树脂，现在在市面上很好买，装进去，上面盖上纱布，然后把水浇上纱布，从下方接住。基本出来的就是你要的了。

水不多，你又不想去买，可以用最简单的方法，用锅煮，然后锅上面盖个玻璃盖子，水沸腾后凝在玻璃盖子上的水你想办法收集起来，最好的去离子水 。

⑷ 去离子水机的工作原理

通过多级前处理过滤芯，如：PP纤维过滤芯、CTO、PPF去除大颗粒的杂质、胶体、悬浮物，经过高压泵加压透过去离子膜，去除水中95%以上的离子杂质，达到初级去离子水，剩下5%的杂质离子，利用无数级阴阳树脂混合的核子级抛光去离子树脂（称去离子柱），吸附交换去除。或用EDI电去离子装置去除剩下的5%的离子。再通过一些复杂的控制电路，控制水机的缺水保护、压力控制、在线水质检测、细菌微粒去除、冲洗系统、以及人性化的介面操作设置，达到使用方面、安全、易操作维护、低成本的目的。
小型的去离子水机工艺流程如下： 原水——第一级纤维过滤器——第二级CTO活性炭过滤器——第三级保安过滤机——超净高压水泵——RO逆渗透膜过滤——多级纯水柱——去离子水
去离子方法对比传统的去离子设备方法是：蒸馏，离子交换，电渗析等。倍尔净去离子水设备是结合电渗析，离子交换手段，全新的去离子方法。与传统的去离子方法相比，耗电量少，设备占地小，投资省，使用方便，安装简单，不需专人安装。只需接个进出水口及排水口。设备的配置齐全，基本不需要另购配置，就可与自来水龙头连接。
技术特点：
BK系列去离子水设备的适用范围广，可以是地下水，自来水，纯水，蒸馏水均可，不像传统去离子水机需要用蒸馏水作为原水。最重要的是每公斤的去离子水成本不超过4分钱。真正为您省钱。
应用范围：
去离子水机的应用范围很广，可以被广泛应用在化工，生产科技，实验室，学校实验，动物饮水，标准液配置，产品清洗，小型实验用水等行业。去离子水机的未来发展是无限的。

⑸ 去离子水，和阳离子怎么制做

距离自费也就是蒸馏水，可以直接通过加热的方式回收蒸馏水就能够将水转化，这是大多数的水的制作工艺。

⑹ 如何制得去离子水

自己制作：

1、准备自来水、带盖子的烧水壶、烧水的火，烧水。

2、水沸腾时冒出的水蒸气是很纯净的，当它们上升到较冷的水壶盖子上就会凝结成水珠，把这些水珠收集起来就是自制的去离子水。

少量生产：

使用专业制备去离子水的小型设备（又名“纯水机”），当想接水时，摁下开关，自然就有杂质含量达标的去离子水供使用。

大批量工业生产：

1、经过粗过滤、活性炭过滤处理的原水，其大部分有机物、微生物等杂质已经得到了一定程度的净化，但水中的Ca+、Mg2+、CO32-以及溶解的某些气体可不受过滤工艺影响，所以此时水中仍含有大量的正负离子。

2、可以利用电渗析技术，将水通过带有正负电极和阴阳离子交换膜的电渗析器，可以将水中的正负离子置换出来，从而使流出来的水的离子浓度大大降低，减轻了后续工艺中离子交换树脂的负担。

3、把离子交换树脂装进圆柱状容器中，谓之离子交换柱。水从交换柱上部流入，通过树脂完成离子交换后由下部流出。一个阳离子交换柱加一个阴离子交换柱串联后为一级，而串联的级数越多，显然去除杂质的效果就越好。

4、用紫外光照射方法使水中的细菌不能存活，达到杀菌的目的。然后，用微孔过滤器将水中0.5μm以上尺寸的各种颗粒过滤掉。至此，可以获得一般洁净度的去离子水。

(6)去离子过滤柱扩展阅读：

去离子水的主要用途：

1、实验室、化验室用水，一般实验室的常规试验、配置常备溶液、清洗玻璃器皿等；

2、电子工业生产，如显像管玻壳、显像管、液晶显示器、线路板、计算机硬盘、集成电路芯片、单晶硅半导体等；

3、电力锅炉，锅炉所需软化水、除盐；

4、汽车、家用电器、建材表面涂装、电镀、镀膜玻璃清洗等；

5、石油化工行业,化工反应冷却水、化学药剂、生产配液用水等；

6、工业纺织印染、钢铁清洗用水等；

7、食品、饮料、酒类、化妆品生产用水；

8、海水、苦咸水等净化。

⑺ 什么是去离子水去离子水的制作工艺是什么

去离子水的定义
去离子水是指除去了呈离子形式杂质后的纯水。国际标准化组织专ISO/TC 147规定的“去离子”属定义为：“去离子水完全或不完全地去除离子物质，主要指采用离子交换树脂处理方法。”现在的工艺主要采用RO反渗透的方法制取。应用离子交换树脂去除水中的阴离子和阳离子，但水中仍然存在可溶性的有机物，可以污染离子交换柱从而降低其功效，去离子水存放后也容易引起细菌的繁殖。 在半导体行业中，去离子水被称为“超纯水”或是“18兆欧水”。
去离子水的处理步骤
从自来水到去离子水一般要经过几步处理 ：
1、先通过石英砂过滤颗粒较粗的杂质
2、然后高压通过反渗透膜
3、最后一般还要经过一步紫外杀菌以去除水中的微生物
4、假如此时电阻率还没有达到要求的话，可以再进行一次离子交换过程最高电阻率可达到18兆。

相对而言，蒸馏水只是先气化再冷凝，其纯度如电导率一般不如纯度高的去离子水，半导体工业中用的大多数是高纯度的去离子水

⑻ 用akta prime plus上120ml的凝胶过滤柱要注意什么

检查入口管件是否插入所选方法的正确的瓶中。
检查是否有足够的洗脱液。
检查废液瓶是没有装满的，在运行中可以接受提供给其的体积。
检查泵是否已经清洗过，如无需要用液体按下述顺序清洗泵以除去流路中截留的气泡：去离子水，20%乙醇，去离子水，缓冲液。
检查在光学装置上波长设置是否正确，UV 流动池是否正确安装。
检查分部收集器是否装有足够的收集管。

如果是选择手动运行，需要注意不要设错流速，Prime应该是没有压力保护装置的，如果流速过大可能会压坏凝胶过滤柱。其余就按照说明书要求正确操作即可。

⑼ 反相硅胶柱色谱为什么不直接采用去离子水装柱

出现残留物。反相硅胶是在正相硅胶的基础上进行化学反应把OH取代为OR的硅胶。反相硅胶柱色谱因在使用离子水柱时会出现残留物，不直接采用去离子水装柱。一般色谱柱的材质不允许长时间被纯水冲洗。

⑽ 去离子水和蒸馏水的区别

蒸馏水是指用蒸馏方法制备的纯水，可分一次和多次蒸馏水。去离子水是版指除去了呈离子形式杂质后的纯权水。蒸馏水用途： 1、在生活中，一般和机器，电器相关的时候，蒸馏水的作用主要是它不导电，保证机器运行稳定，延长电器使用寿命。 2、在医药行业，蒸馏水的作用是因为低渗作用。 3、学校里的化学实验，有些需要用蒸馏水，利用的就是蒸馏水无电解质，没有游离离子，或是没有杂质。去离子水用途： 1、实验室、化验室用水，一般实验室的常规试验、配置常备溶液、清洗玻璃器皿等。 2、电子工业生产，如显像管玻壳、显像管、液晶显示器、线路板、计算机硬盘、集成电路芯片、单晶硅半导体等。 3、汽车、家用电器、建材表面涂装、电镀、镀膜玻璃清洗，石油化工行业，化工反应冷却水、化学药剂、生产配液用水。