过滤柱提取dna

❶ DNA提取试剂盒的使用方法

以下是BIODAI离心法提取，需自行准备的材料：无水乙醇、生理盐水、1M NaOH、无RNA酶1.5mL离心管。
1. 取出析出液和洗涤液，按以下操作：
a) 析出液：4.5mL加入25.5mL无水乙醇；9mL加入51mL无水乙醇。
b) 洗涤液：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇。
c) 配制好的析出液如出现沉淀，可在37溶解，摇匀后使用。
2.样本处理：a) 拭子：向无RNA酶的1.5mL离心管中加入800μL生理盐水，将拭子收集的样本置于生理盐水中，涮洗20秒，使细胞完全脱落，贴离心管壁挤干拭子上的液体，12,000 rpm 离心5 min，弃700μL上清，剩余100μL上清，充分振荡混匀。
b) 痰液：向收集的痰液中加入4倍体积1M NaOH，室温放置30分钟，每10分钟振荡混匀一次，12,000 rpm离心5 min，弃上清，加入0.5mL生理盐水，混匀，12,000 rpm离心5 min，弃400 μL上清，剩余100μL上清，充分振荡混匀。
3.加入200μL 裂解液和20μL 消化液，振荡混匀，56水浴10 分钟。
4.加入500μL析出液，轻轻颠倒混匀，如有半透明悬浮物，不影响RNA的提取与后续实验。
5. 将吸附柱放入收集管内，将上述溶液吸入吸附柱内，静置2 min，12,000 rpm 4离心1 min，弃收集管内废液。
6.将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液至吸附柱内，12,000 rpm 4离心1 min，弃收集管内废液。
7. 将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 4离心2 min，离去残留的洗涤液。
8.取出吸附柱，放入新的1.5 mL 离心管内，加入30-50 μL 洗脱液，静置3 min，12,000 rpm 4 离心2 min，收集RNA溶液。
9.-70保存，或直接用于下一步实验。

❷ 全血DNA的提取能不能更简便的方法

你可以使用全血DNA试剂盒
可以无需事先分离去除红细胞
无需蛋白酶K消化步骤,适用于从全血中分离纯化最多达15 μg总DNA.·15分钟内即可完成血液总DNA的制备.
无须事先分离去除红细胞及蛋白酶K消化步骤.
可从新鲜或者是冷冻的全血、溶血的全血、唾液、 细胞悬浮液等标本中分离纯化总DNA.
核酸纯化柱可最大吸附15μg 总DNA.
起始样品体积：200 μl- 400 μl全血.
彻底清除血样中的PCR抑制物,可使用多至1/2反应体系体积的模板进行扩增.
所需仪器：可适合2 ml离心管使用的离心机.
原理：全血样品经裂解液溶解后,用沉淀液沉淀血红蛋白.柱纯化核酸技术过滤除去残留的血红蛋白,吸附在纯化柱上的总DNA经Buffer WA和Buffer WB洗涤后,可彻底清除残留在纯化柱上的杂质及PCR抑制物.纯化柱上的总DNA可直接用BufferTE或水洗脱,并可立即用于各种分子生物学实验.
步骤：在400 μl全血中加入300 μl Buffer L1溶解全血释放DNA,再加入300μl Buffer L2沉淀血红蛋白,离心取上清加入纯化柱中,经过结合、清洗步骤去除残留的杂质后,DNA即可被TE溶液洗脱下来.

❸ DNA提取过程中的关键步骤及注意事项有哪些

质粒抽提流程详解——沉淀菌体
检查细菌培养情况，将明显浑浊的菌液倒在已经编号的2ml的沉菌用离心管里，在约12000转/min的速度下离心沉淀1分钟，保证无悬浮物后取出；将离心管倒扣在卫生纸上，用力敲击，至液体培养基完全去除；如发现菌体沉淀的少，可多加2ml菌液重复沉菌一次。
在离心管中加入250µl 加过RNaseA1酶的Buffer S1，用振荡器震荡，直到沉淀完全充分悬浮。
1. Buffer S1是什么？主要组分是什么？
50 mM葡萄糖 / 25 mM Tris-Cl / 10 mM EDTA，pH 8.0

2. Buffer S1的功能是什么？
50 mM葡萄糖：加了葡萄糖后最大的好处只是悬浮后的大肠杆菌不会快速沉积到管子的底部。因此，如果Buffer S1中缺了葡萄糖其实对质粒的抽提本身而言，几乎没有任何影响。
EDTA ：大家知道EDTA是Ca2+和Mg2+等二价金属离子的螯合剂，配在分子生物学试剂中的主要作用是：抑制DNase的活性，和抑制微生物生长。在Buffer S1中加入高达 10 mM 的EDTA，无非就是要把大肠杆菌细胞中的所有二价金属离子都螯合掉。如果不加EDTA，只要是在不太长的时间里完成质粒抽提，就不用怕DNA会迅速被降解，因为最终溶解质粒的TE缓冲液中有EDTA。 ——但是对于测序而言，我们是用水溶解质粒，所以EDTA是必须的。

3.如果抽提质粒恰好Buffer S1用完了，可不可以用水代替？
只要用等体积的水，或LB培养基来悬浮菌体就可以了。有一点不能忘的是，菌体一定要悬浮均匀，不能有结块。

质粒抽提流程详解——裂解
在离心管中加入250µl Buffer S2，上下缓慢颠倒7~8次至混旋液澄清（这步的操作时间不得超过4分钟）；
☆ 注意：颠倒时不能太剧烈，否则会有核DNA污染；如果Buffer S2因温度过低有SDS沉淀析出，可将其放置55~60C水溶锅中适当加热至澄清后再用。
1.抽提质粒的原理是什么？
碱裂解法

2. Buffer S2是什么？主要组分是什么？
0.2 N NaOH / 1% SDS
SDS：十二烷基磺酸钠（Sodium dodecyl sulfate，SDS），是洗洁精的主要成分。常用于DNA提取过程中使蛋白质变性后与DNA分开。

3.Buffer S2的功能是什么？
NaOH：NaOH是最佳的溶解细胞的试剂，不管是大肠杆菌还是哺乳动物细胞，碰到了碱都会几乎在瞬间就溶解。用了不新鲜的NaOH，即便是有SDS也无法有效溶解大肠杆菌，自然就难高效率抽提得到质粒。如果只用SDS当然也能抽提得到少量质粒，因为SDS也是碱性的，只是弱了点而已。
4.加入Buffer S2为何时间不能太久，动作要轻柔？
第一，时间不能过长，千万不要这时候去接电话，因为在这样的碱性条件下基因组DNA片断会慢慢断裂；第二，必须温柔混合，不然基因组DNA也会断裂。

质粒抽提流程详解——中和
加入400ul Buffer S3，剧烈颠倒5~10次，使之充分中和，同时将大块白色沉淀振成小块，便于离心。
在约13600转/min的速度下离心沉淀12分钟，如有因沉淀不完全引起的白色絮状物质，可重复振荡离心直至沉淀完全。
1. Buffer S3是什么？主要组分是什么？
3 M 醋酸钾 / 2 M 醋酸

2.加入Buffer S3后出现的白色沉淀是什么？&3.Buffer S3的功能是什么？
每个人都知道，溶液III加入后就会有大量的沉淀，但大部分人却不明白这沉淀的本质。
最容易产生的误解是，当SDS碰到酸性后发生的沉淀。如果你这样怀疑，往1%的SDS溶液中加如2M的醋酸溶液看看就知道不是这么回事了。大量沉淀的出现，显然与SDS的加入有关系。如果在溶液II中不加SDS会怎样呢，也会有少量的沉淀，但量上要少得多，显然是盐析和酸变性沉淀出来的蛋白质。既然SDS不是遇酸发生的沉淀，那会不会是遇盐发生的沉淀呢？在1％的SDS溶液中慢慢加入5 N的NaCl，你会发现SDS在高盐浓度下是会产生沉淀的。因此高浓度的盐导致了SDS的沉淀。但如果你加入的不是NaCl而是KCl，你会发现沉淀的量要多的多。这其实是十二烷基硫酸钠（sodium dodecylsulfate）遇到钾离子后变成了十二烷基硫酸钾（potassium dodecylsulfate, PDS），而PDS是水不溶的，因此发生了沉淀。如此看来，溶液III加入后的沉淀实际上是钾离子置换了SDS中的钠离子形成了不溶性的PDS，而高浓度的盐，使得沉淀更完全。大家知道SDS专门喜欢和蛋白质结合，平均两个氨基酸上结合一个SDS分子，钾钠离子置换所产生的大量沉淀自然就将绝大部分蛋白质沉淀了，与此同时大肠杆菌的基因组DNA也一起被共沉淀了。这个过程不难想象，因为基因组DNA太长了，长长的DNA自然容易被PDS给共沉淀了，尽管SDS并不与DNA分子结合。

2 M的醋酸的作用是什么？
是为了中和NaOH，因为长时间的碱性条件会打断DNA，所以要中和。基因组DNA一旦发生断裂，只要是50－100 kb大小的片断，就没有办法再被PDS共沉淀了。所以碱处理的时间要短，而且不得激烈振荡，不然最后得到的质粒上总会有大量的基因组DNA混入，琼脂糖电泳可以观察到一条浓浓的总DNA条带。

质粒抽提流程详解——纯化
将上步离心上清液用移液器转移到吸附柱上，在约10500转/min的速度下离心1分钟。
注意：不要把沉淀物转移到吸附柱里，1个样品使用1个枪头。

为何离心上清液经离心后，质粒DNA就被吸附到膜上？
在高盐状态下，硅胶膜专一性地吸附DNA；而在低盐或水溶液状态下，DNA被洗脱下来。

质粒抽提流程详解——洗涤脱盐
取出DNA吸附柱，弃掉废液收集管中的液体，将柱子放回这个离心管中，加入500ul Wash Solution到柱子中，高速离心（10,000rpm)30秒。
重复上述步骤一次。
取出DNA吸附柱，弃掉废液收集管中的液体，将柱子放回这个离心管中，最大速度离心2分钟
使用Wash Solution要进行两次洗涤，目的是使残留的蛋白、盐离子等杂质更充分的被去除，保证硅胶膜上吸附的DNA尽量纯。

质粒抽提流程详解——产物回收
将DNA吸附柱移入新的1.5ml离心管中，在DNA吸附柱的膜中央加入30-40ul 预热无菌双蒸水，室温放置2分钟后12，000rpm离心1分钟，离心管底即为质粒DNA。

❹ 过柱法提取dna可以过滤细菌么

完全可以。
对数期的细菌生长速度快，生命力旺盛，比较健康。
在室温下，细菌依然在生长，只是生长速度较慢而已。换句话说，细菌依然处于有活力状态，对DNA提取没有影响。
如果是提取质粒DNA，细菌摇床培养后，可以放至4度，在4度条件下放一夜，提取质粒不受影响，个人亲身经验。

❺ DNA提取过程中的关键步骤及注意事项有哪些

DNA的粗提取
①准备材料
将新鲜菜花和体积分数为95%的酒精溶液放入冰箱冷冻室,至少24
h。
②取材
称取30
g菜花,去梗取花,切碎。
③研磨
将碎菜花放入研钵中,倒入10
mL研磨液,充分研磨10
min
。
④过滤
在漏斗中垫上尼龙纱布,将菜花研磨液滤入烧杯中(有条件的学校可将滤液倒入塑料离心管中进行离心,用1
000r/min的旋转频率,离心25
min,取上清液放入烧杯中)。在4
℃冰箱中放置几分后,再取上清液。
⑤加冷酒精
将一倍体积的上清液倒入两倍体积的体积分数为95%的冷酒精溶液中,并用玻璃棒缓缓地轻轻搅拌溶液(玻璃棒不要直插烧杯底部)。沉淀35
min后,可见白色的DNA絮状物出现。用玻璃棒缓缓旋转,絮状物会缠在玻璃棒上。
(2)DNA的鉴定
①配制二苯胺试剂
取0.1
mL
B液,滴入到10
mL
A液中,混匀。
②鉴定
取4
mL
DNA提取液放入试管中,加入4
mL
二苯胺试剂,混匀后观察溶液颜色(不变蓝)。用沸水浴(100
℃)加热10
min
。在加热过程中,随时注意试管中溶液颜色的变化(逐渐出现浅蓝色)。
研磨液的配制方法
Tris：10.1
g(相对分子质量为121.14),先加50
mL
蒸馏水溶解,用物质的量浓度为2
moL/L
的盐酸调至pH8.0,再加下述药品。
NaCl：8.76
g(相对分子质量58.44)
EDTA：37.2
g(相对分子质量372.24)
SDS：20
g(相对分子质量288.3)
待上述药品全部溶解后,再用蒸馏水定容至1
000
mL。
若在室温低于20
℃时配制药液,SDS呈沉淀析出,此时需要加温,才能将SDS溶解。如果提前配制的研磨液出现了沉淀,则应加温使沉淀溶解后再使用。
研磨液中几种药品的作用
SDS(十二烷基磺酸钠):可使蛋白质变性,与DNA分离。
EDTA(乙二胺四乙酸二钠):为DNA酶的抑制剂,可以防止细胞破碎后DNA酶降解DNA。
物质的量浓度为0.15
moL/L的氯化钠溶液：能很好地溶解DNA。
Tris/HCl：提供缓冲体系,DNA在这个缓冲体系中呈稳定状态。(Tris为三羟甲基氨基甲烷)
鉴定DNA的其他方法
用紫外灯照射法鉴定DNA效果很好。具体鉴定方法如下。
1.配制染色剂。用蒸馏水配制万分之五的溴化乙锭(EB)溶液。
2.将玻璃棒上缠绕的白色絮状物抹于蜡纸上,再滴1滴EB溶液染色。
3.将蜡纸放在紫外灯(260
nm)下照射(暗室中),可见橙红色的萤光(DNA的紫外吸收高峰在280
nm处)。
O(∩_∩)O~

❻ 如何鉴定提取质粒DNA的质量和含量

用琼脂糖凝胶电泳鉴定质粒DNA。

琼脂糖凝胶电泳是分离鉴定和纯化DNA片段的常用方法。DNA分子在琼脂糖凝胶中泳动时有电荷效应和分子筛效应，DNA分子在高于等电点的pH溶液中带负电荷，在电场中向正极移动。

由于糖磷酸骨架在结构上的重复性质，相同数量的双链DNA几乎具有等量的净电荷，因此它们能以同样的速度向正极方向移动。

不同浓度琼脂糖凝胶可以分离从200bp至50kb的DNA片段。在琼脂糖溶液中加入低浓度的溴化乙锭(ethim bromide ,EB)，在紫外光下可以检出 10ng的DNA条带，在电场中，pH8.0条件下，凝胶中带负电荷的DNA向阳极迁移。

(6)过滤柱提取dna扩展阅读：

质粒DNA提取方法

1，碱裂解法

2，煮沸裂解

3，羟基磷灰石柱层析法

4，质粒DNA释放法

5，酸酚法等。

选择哪一种方法取决于以下几个因素

1，质粒的大小

2，大肠杆菌菌株

3，裂解后用于纯化的技术和实验要求

❼ 不用试剂盒如何纯化DNA

那要看你用什么方法测定DNA和RNA：
（1）紫外吸收法也就是测量OD（260）和OD（280）的吸收值，这样的方法其它的杂质对测量结果影响大一点，因为其它杂质在这两个吸收波长也有吸收。
（2）荧光法，用PicoGreen荧光染料，测定DNA，RNA浓度比较灵敏，并且适合测量低浓度和微量DNA和RNA，并且受其它杂质的影响不大，缺点要有专门的荧光检测仪器，试剂比较昂贵。
纯化DNA可以买试剂盒，主要有膜吸附法，磁珠分离法，都很方便。

酶解法(纤维素酶,果胶酶)去除细胞壁;然后至于蒸馏水中,使其吸水胀破,
加热后冷却,用玻璃棒搅拌,会慢慢析出.

PUREGENE DNA提取试剂盒常见问题及解答
方法：
Q PUREGENE DNA提取试剂盒是建立在什么方法基础上的？
A PUREGENE DNA提取试剂盒是建立在一个改良的盐沉淀方法之上的。
Q 预期的A260／A280？
A 预期的A260／A280为1.7-2.0。

Q 提取的基因组DNA的预期长度为多少？
A 一般来说，提取的长度大于100kb，通常为100-200kb。

Q 有无试剂盒内溶液成分的说明？
A 除DNA溶解液外未向客户提供盒内溶液成分具体说明。

Q DNA溶解液的成分是什么？
A DNA溶解液的成分为100mM Tris，1mM EDTA，pH值为7.0-8.0。

保存：
Q PUREGENE试剂盒应在何种温度下保存？
A 所有成分室温下保存，但诸如RNase A溶液和溶菌酶（Lytic Enzyme Solution）之类的酶除外，需4
℃保存。

Q 细胞裂解液中有沉淀，还能使用吗？
A 如果在较冷的天气下或在低温下保存，细胞裂解液中的SDS可能形成沉淀，可将裂解液在37-65℃水
浴中加热直到沉淀溶解，混匀再使用。

Q RNase A在室温下可保存多久？
A RNase A在室温下至少可保存8周。

Q PUREGENE DNA提取试剂盒保质期为多长时间？
A 三年以上。

Q 提取的DNA可保存供以后使用吗？
A 可以的，PUREGENE DNA在4℃可稳定保存5年以上，在-20℃可长期保存。但应注意避免反复冻融
以减少DNA片段受损。

标本处理和操作方法：
Q Gentra公司推荐的血液标本收集管为何种类型？
A Gentra公司推荐使用EDTA管对血液标本进行收集，也可用ACD管。但是建议您不要使用含抗凝剂肝素
的收集管，因为肝素在PCR中可抑制Taq酶的活性。

Q 可以从冻存的血液标本中提取DNA吗？
A 可以的。Gentra建议将冻存的血样在37℃水浴中迅速解冻，使用前一直置于冰上以减少内源性DNase的
活性。然后，按全血中提取DNA的方法进行RBC裂解，将血样冻结后分成几部分提取是有效的措施。

Q 研究者可以用PUREGENE DNA提取试剂盒从血凝块中提取DNA吗？
A 可以。Gentra可提供从血凝块中提取DNA的操作方法。

Q 在开始的孵育过程中如果红细胞裂解不完全，可以重复红细胞裂解步骤吗？
A 可以。当标本中红细胞的含量过多时，可能会发生红细胞不完全裂解，这时可以重复红细胞裂解步
骤。

Q 当加入细胞裂解液后，在标本中有细胞凝集块，该怎么办？
A 凝集块的出现很可能是因为在加入细胞裂解液之前细胞未能彻底悬浮。解决方法：标本在细胞裂解液
中孵育，不时地振荡直至在37℃室温下将溶液混匀，或在标本中加入蛋白酶K（终浓度为100礸/ml），
55℃孵育直到细胞彻底地被裂解。

Q 在蛋白沉淀步骤中，如果离心后仍未见到蛋白沉淀，或蛋白沉淀很松散，该怎么办？
A 建议您在离心前将标本再次振荡20秒，并置于冰上5分钟。如果标本在加入蛋白沉淀液之前没有冷却
至室温或充分振荡20秒钟使得蛋白沉淀液和细胞裂解液未能充分混合，蛋白沉淀松散的情况就会出现。

Q 在蛋白沉淀步骤中振荡样品20秒钟会使DNA片段断裂吗？
A 不会的。PUREGENE方法是一种非常温和的改良的盐沉淀方法，与使用有害化学物质的有机溶解和柱式
方法相比，PUREGENE方法振荡引起断裂的DNA片段最少。

Q 可以从比说明书中所提及的标本更小或更大的标本中提取DNA吗？
A 可以的。因为PUREGENE可以根据标本量大小来升级、降级操作。

Q 可以通过真空离心法（speed-vac）干燥DNA吗？
A 不可以的。因为使用这种方法干燥DNA，标本很容易过度干燥而造成溶解困难。建议您将DNA在室
温下风干10-15分钟，使乙醇完全挥发，仅有水滴留在管壁，从而不会干扰下一步的DNA分析。

Q 怎样测定从标本中提取的DNA量 ？
A 分光光度测定法。Gentra可提供紫外定量的方法，具体方法参见说明书。

Q 如果A260／A280小于1.6，也就是DNA样本被蛋白质污染，该如何纯化DNA？
A 为了去除蛋白污染，DNA标本可按标准方法进一步纯化。蛋白质污染往往是由于起始标本量过多造成
的，因此需注意说明书中规定的起始标本量的范围。

Q 如果A260／A280大于2.0即存在RNA污染，该怎么办？
A 重复进行RNase A处理，对DNA重新沉淀，对含有大量RNA的标本，延长RNase A的处理时间（15
分钟到30-60分钟）直至RNA完全被去除。

Q 使用PUREGENE DNA提取试剂盒对DNA进行提取时，好的终止方法是什么？
A 好的终止方法为：
1. 当加入细胞裂解液后，大多数标本在室温下至少18个月内保持稳定。
2. 加入100％异丙醇的标本在室温下可长期保存。

Q 为什么实际提取的DNA产量比预期值低？
A 如果细胞未被完全裂解，会导致产量的降低。根据操作方法中的起始标本量进行加样非常重要。细胞量过少可能会使DNA提取的化学试剂产生不平衡，并抑制DNA的沉淀，细胞量过多使细胞不能完全裂解。在任一情况下，均会使DNA产量偏低。

Q 标本中细胞含量太低，估计会得到较低产量的DNA，获得最大量DNA的最佳方法是什么？
A 当从少于2×105万个细胞的标本中提取DNA或预期产量较低时，可将糖原加入异丙醇中作为DNA的载体。Gentra建议每600祃异丙醇中加入1祃糖原（20mg/ml）。

扩增：
Q 为什么通过PCR扩增无产物？
A 通过这种方法提取的DNA产量往往很高。但是，当过量的DNA加入PCR系统中可能使反应抑制。建议每50祃反应体积中加入25-1,000ngDNA，DNA体积不宜大于PCR反应体积的1／10。除此之外，可增加PCR体系中的MgCl2浓度。

Q 为什么DNA不被限制性内切酶完全消化？
A 常见原因是反应体系中加入的DNA过量，建议每微克DNA使用2U的限制性内切酶。

Q 纯化的DNA可以作PCR、Southerns或测序吗？
A 完全可以的。

❽ DNA提取的原理

原理:
1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA。
2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。
3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。
方法步骤:
1.提取细胞核物质:顺时针方向搅拌，稍快，稍重。
5
min
2.溶解DNA:
3.析出含DNA的黏稠物:蒸馏水300mL，逆时针方向搅拌，缓慢
4.过滤:取黏稠物
5.再溶解:顺时针方向搅拌，较慢。3
min
6.过滤:取滤液。
7.提取出含杂质较少的DNA，逆时针方向搅拌，稍慢。5
min
8.DNA的鉴定:沸水浴5min
大学:
DNA提取分为三个基本步骤，每个步骤的具体方法可根据样品种类、影响提取的物质以及后续步骤的不同而有区别。
利用研磨或者超声破碎细胞，并通过加入去污剂以除掉膜脂。
加入蛋白酶，醋酸盐沉淀，或者酚/氯仿抽提，以除掉细胞内的蛋白，如与DNA结合的组蛋白。
将DNA在冷乙醇或异丙醇中沉淀，因为DNA在醇中不可溶而黏在一起，这一步也能除掉盐分。
另外，目前也有利用吸附过柱的方法提取DNA的商业化试剂盒。
2.细胞的破碎
细菌有坚硬的细胞壁，首先要破碎经胞。方法有三种;①机械方法:超声波处理法、研磨法、匀浆法;②化学试剂法:用SDS处理细胞;③酶解法:加入溶菌酶或蜗牛酶，都可使细胞壁破碎。
3.DNA提取的几种方法
(1).浓盐法
A.
利用RNA和DNA在电解溶液中溶解度不同，将二者分离，常用的方法是用1M
氯
纳提取化钠抽提,得到的DNP粘液与含有少量辛醇的
氯仿一起摇荡,使乳化,再离心除去蛋白质,此时蛋白质凝胶停留在水相及氯仿相中间，而DNA位于上层水相中,用2倍体积95%乙醇可将DNA
钠盐沉淀出来.
B.
也可用0.15
MNaCL液反复洗涤细胞破碎液除去RNP,再以1MNaCL提取脱氧核糖蛋白,再按氯仿---异醇法除去蛋白.
两种方法比较,后种方法使核酸降解可能少一些.
C.以稀盐酸溶液提取DNA
时,加入适量去污剂,如SDS可有助于蛋白质与DNA
的分离。在提取过程中为抑制组织中的DNase对DNA
的降解作用,在氯化钠溶液中加入柠檬酸钠作为金属离子的烙合剂.通常用.15MNaCL,0.015M柠檬钠,并称SSC溶液,提取DNA.
(2).阴离子去污剂法;
用SDS或二甲苯酸钠等去污剂使蛋白质变性,可以直接从生物材料中提取DNA
.由于细胞中DNA与蛋白质之间常借静电引力或配位键结合,因为阴离子去污剂能够破坏这种价键,所以常用阴离子去污剂提取DNA
(3).苯酚抽提法:苯酚作为蛋白变性剂,同时抑制了DNase的降解作用.用苯酚处理匀浆液时,由于蛋白与DNA
联结键已断,蛋白分子表面又含有很多极性基团与苯酚相似相溶。蛋白分子溶于酚相，而DNA溶于水相。离心分层后取出水层，多次重复操作，再合并含DNA
的水相，利用核酸不溶于醇的性质，用乙醇沉淀DNA
。此时DNA是十分粘稠的物质，可用玻璃漫漫绕成一团，取出。此法的特点是使提取的DNA保持天然状态
(4).水抽提法:利用核酸溶解于水的性质,将组织细胞破碎后,用低盐溶液除去RNA，然后将沉淀溶于水中，使DNA充分溶解于水中,离心后收集上清液.在上清中加入固体氯化钠调节至2.6M.加入2倍体积95%乙醇,立即用搅拌法搅出.然后分别用66%
，80%和95%乙醇以及丙铜洗涤,最后在空气中干燥,既得DNA样品.此法提取的DNA中蛋白质含量较高,故一般不用.为除蛋白可将此法加以改良,在提取过程中加入SDS.
结果就是得到DNA