血清超滤系统

1. 超滤设备的超滤设备用途

rightleder◆莱特.莱德 矿泉水：在矿泉水制造中，应用超滤技术，在工程设计中，将根据矿泉回水的水源水质分析报答告，针对性地选择膜的孔径和膜的类型，设计超滤设计。◆食品：乳制品、果汁、酒、调味品等食品的生产中逐步采用超滤技术，如牛奶或乳清中蛋白和低分子量的乳糖与水的分离，果汁澄清和去菌消毒，酒中有色蛋白、多糖及其它胶体杂质的去除等，酱油、醋中细菌的脱除，较传统方法显示出经济、可靠、保证质量等优点。◆医药：在医药和生物化工生产中，常需要对热敏性物质进行分离提纯，超滤技术对此显示其突出的优点。用超滤来分离浓缩生物活性物(如酶、病毒、核酸、特殊蛋白等)是相当合适的从动、植物中提取的药物(如生物碱、荷尔蒙等)，其提取液中常有大分子或固体物质，很多情况下可以用超滤来分离，使产品质量得到提高。◆纯水、超纯水：工业用水的初级纯化，纯水超纯水制备RO预处理，纯水、超纯水终端处理。◆环保：工业废水深度处理，城市中水回用系统，电泳漆、油品的回收。◆发酵：生化发酵液分离与精制、酶的浓缩与精制、糖及木糖醇澄清过滤。

2. 超滤系统的透膜压差怎么计算

跨膜压差=（进膜压力+出膜压力）/2-透过液侧压力
一般，透过液侧压力=0（表压强）

3. 全血分离获得血清的方法及步骤 谢谢

材料与方法

1.1 血清采集 MG患者全血来自～2005年就诊于辽宁中医学院附属医院的门诊患者。根据典型临床表现、新斯的明试验、低频重复电刺激及单纤维肌电图等确诊，无其他自身免疫性疾病，未经其他免疫抑制治疗，并参照1994年版《中医病证诊断疗效标准》辨证为脾肾虚型。正常人血清取自同时期健康志愿者。-70 ℃冰箱冷冻保存备用。

1.2 主要试剂 固相pH梯度干胶条IPG strip（Amersham公司产品， 非线性pH 3～10， 7 cm）。3-〔3-（胆酰胺基丙基）二甲氨基〕丙磺酸盐｛3-〔（3-cholamidopropyl） dimethylamino〕-1-propanesul-fonate， CHAPS｝，二硫苏糖醇（DL-dithiothreitol， DTT），三丁基膦（tributyl phosphine， TBP），尿素，硫脲，碘乙酰胺（iodoacetamide， IAA），丙烯酰胺（acrylamide）、甲双丙烯酰胺（N， N'-methylenebi-sacrylamide），四甲基乙二胺（N， N， N， N-tetram-ethyl-ethylenediamine， TEMED），过硫酰胺（am-monium persulfate， APS），三羟甲基氨基甲烷〔tris （hydroxymethyl） aminomethane〕、甘氨酸（glycine， Gly）和十二烷基磺酸钠（sodium dodecyl sulfate， SDS）均为Bio-Rad公司产品。琼脂糖为华美生物公司产品。其他试剂均使用国产分析纯试剂。所有溶液均用MilliQ水配制。

1.3 主要仪器 高速冷冻离心机，德国Eppendorf公司产品;EttanTMIPGphorⅡ，Amersham Biosci-ences公司产品;P-2000分光光度仪，Hitachi公司产品;SE-600电泳仪，Amersham公司产品;纯水装置，Millipore公司产品;GS-710光密度扫描仪，Bio-Rad公司产品;冷却水循环系统，Cole-Parmer公司产品;Bruker-Daltonics AutoFlex TOF-TOF LIFTMass Spectrometer，美国Bruker-Daltonics公司产品;LCQ Deca XP Plus，美国Thermo Finnigan公司产品。

1.4 双向电泳

1.4.1 血清总蛋白质的提取及定量 血清-70 ℃反复冻融4次后，用Agilent Multiple Affinity Re-moval Column处理去除高丰度蛋白。使用Agilent 5K超滤管进行浓缩除盐，冻干回收的样品，-70 ℃保存。用裂解液（9 mol/L 尿素、4% CHAPS、 65 mmol/L DTT和cocktail酶抑制剂）进行复溶，并采用考马斯亮蓝法进行蛋白质定量。

1.4.2 等电聚焦 自-20 ℃取出的胶条，室温下平衡10 min，以500 μg上样量在每份样本中加入上样缓冲液（8 mol/L尿素、2% CHAPS、1% Bio-lyte和1% TBP）以及标准蛋白质分子，上样于泡胀槽中，加入矿物油覆盖。程序设置如下:30 V 12 h，500 V 1 h，1 000 V 1 h，8 000 V 6 h。恒温20 ℃。等电聚焦电泳后IPG胶条在平衡液1（Tris-base 50 mol/L 、尿素 6 mol/L、甘油 30%、SDS 2%、溴酚蓝0.002%和DTT 100 mg）中于振荡器上振荡 15 min; 然后置入平衡液2（成分同平衡液1，用 400 mg 碘乙酰胺代替100 mg DTT）同样于振荡器上振荡15 min。

1.4.3 SDS-PAGE垂直电泳 采用12.5%的均匀SDS2聚丙烯酰胺凝胶（水23.2 ml，30%丙烯酰胺溶液32.46 ml，1.5 mol/L Tris-HCl缓冲液pH 8.8 20 ml，10% SDS 0.8 ml，10% APS 0.4 ml，TEMED 3.76 μl，胶总体积80 ml）。将平衡后的IPG胶条移至凝胶的上方，胶条一端放入低分子量蛋白质标准，0.5%的琼脂糖封胶。上下槽加入电极缓冲液（Tris 5 mmol/L，Gly 192 mmol/L和SDS 0.1%）。初始电流为每块胶40 mA，电泳20 min，然后以每块胶60 mA电流，直至溴酚蓝前沿。

1.4.4 银染色 电泳结束后，采用硝酸银染色法，通过固定，硝酸银染色，显影，停显及脱色，至背景清晰。

1.5 图像分析 每个样品常规进行3次二维电泳，用GS-710光密度扫描仪对电泳后的胶图分别进行扫描，所得扫描图像输入计算机，采用Image-master软件对图像进行背景消减、蛋白质点检测和校正，获取蛋白质点的位置坐标和表达量等分析。选取 Ratio ≥1.5的蛋白质点认为有差异。所有数据的统计分析均采用SPSS 12.0软件，统计学分析采用 t 检验。

1.6 基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱分析 用手术刀片切下胶上目标条带，进行切胶、胶上胰蛋白酶酶解 20 h ，抽提酶解肽段，Zip Tip脱盐后点样，行基质辅助激光解吸电离-飞行时间质谱（matrix assisted laser desorption/ionization time of flight mass spectrometry， MALDI-TOF-MS）分析（飞行管长2.7 m，加速电压 20 kV ，反射电压23 kV）。将第1级质谱得到的肽片段质量指纹图谱、肽质量指纹图谱与第2级质谱得到的肽序列信息一起用来检索蛋白质数据库，找出匹配的蛋白质。

1.7 数据库检索 将质谱鉴定所得的肽质量指纹谱（peptide mass fingerprinting， PMF）数据于Bio-Works（Thermo Finnigan， San Jose， CA）软件搜索相应的库。搜索使用的数据库为IPI human蛋白库（SEQUEST结果过滤参数为:当Charge+1，Xcorr≥1.9;当Charge+2，Xcorr≥2.2;当Charge+3，Xcorr≥3.75;其中DelCN≥0.1）以及NCBI上 Homo sapiens的非冗余蛋白库（rendant data-base）。检索参数为胰蛋白酶解;氨基酸固定修饰方式为脲甲基半胱氨酸;模式为单同位素峰;肽片断最大误差控制在100 ppm;肽片断最大分子量误差为±0.5 Da;每个肽允许有1个不完全裂解位点。

2 结果

2.1 脾肾虚型重症肌无力患者血清双向电泳图谱 的建立及分析 经2-DE技术及银染色后，得到了两组血清的双向凝胶电泳图，并于相同的条件下重复实验3次。在正常对照组细胞蛋白质组双向电泳图谱上可观察到1 463±179个蛋白点，而脾肾虚型重症肌无力组可见到1 508±89个蛋白点

4. 什么是 超滤系统的跨膜压差

跨膜压差，TMP（Trans － Membrane Pressure Drop），膜设备运行参数，跨膜压差被定义为驱动水透过膜所需的压力，为进水压力和过滤压力的差值，孔径较小的膜所需的跨膜压差也较大，在水温较低、通量较高以及发生污染时，跨膜压差也较高。

跨膜压差=进水压力-过滤压力。

超滤为一种加压膜分离技术，即在一定的压力下，使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制的薄膜，而使大分子溶质不能透过，留在膜的一边，从而使大分子物质得到了部分的纯化。

(4)血清超滤系统扩展阅读-

与传统工艺设备相比，该设备运行成本低，能有效降低生产成本，提高企业经济效益。

超滤技术具有操作简单，成本低，无需添加任何化学试剂等优点，特别是超滤技术实验条件温和，与蒸发，冷冻干燥相比无相变，温度，pH值无变化，可防止变性，失活和自溶生物大分子。

在生物大分子的制备技术中，超滤主要用于生物大分子的脱盐，脱水和浓缩，超滤也有一定的局限性，它不能直接得到干粉制剂，对于蛋白质溶液，只能得到10－50％的浓度。

5. 抗血清纯化都需要些什么设备阿

给你提供一个马血清制备过程，专利CN200510026317.3

1、一种马抗血清的制备纯化工艺，该工艺包括下述步骤： (1)消化步骤：用免疫血浆消化工艺将免疫血浆消化； (2)第一次沉淀过滤处理步骤：将上述处理的消化液中加入硫酸铵形成混悬液，并调节pH值为4.8-5.2，然后将混悬液加温并保持，再降温，过滤收集上清液，废弃沉淀； (3)第二次沉淀过滤处理步骤：将上述(2)步的上述清液pH值调整为7.0-7.4，加入硫酸铵进行第二次沉淀，静置后过滤取沉淀物，弃上清液； (4)明矾沉淀：即将上述(3)步的沉淀物稀释至蛋白含量不超过2g/L，再调整稀释液pH值为7.7-7.9，加明矾进行沉淀，静置后过滤取上清液，沉淀物废弃； (5)将上述上清液用硫酸铵沉淀法或超滤法浓缩制得抗血清原液； (6)离子交换剂吸附纯化： 1)用阴离子交换剂装柱，用pH值为7.0±0.2，0.15MNaCl，10mM磷酸盐缓冲液进行平衡； 2)将用0.45μm的膜进行澄清过滤的抗血清原液通过上样泵加入柱体上部，用 pH值为7.0±0.2，0.15MNaCl，10mM磷酸盐缓冲液洗柱，流速为3ml/min，收集穿透液，酸性杂质被吸附在层析介质上，F(ab)2流穿； 3)用2MNaCl清洗柱体后，用20％乙醇洗柱，使介质浸泡其中保存； 4)将穿透液超滤浓缩调整抗血清浓度，调整蛋白含量不超过170g/L，按调整后制品总量，加氯化钠使最终含量为750-950g/L，加三氯甲烷使最终含量不超过5g/L 或硫柳汞0.1g/L或间甲酚2.5g/L为防腐剂，调节pH至6.0-7.0，用0.22um滤膜除菌过滤。

6. 水处理超滤系统里面都包括什么

简单介绍3种水处理超滤系统:

1、选择膜+活性碳工艺

原水—格栅—调节池—膜处理—活性碳—消毒。

2、对优质杂排水、杂排水为中水水源的工艺

以物化处理为主 原水—格栅—调节池—混凝或气浮—过滤—消毒；

以物化+膜法为着眼点 原水—格栅—调节池—混凝—膜处理—消毒。

3、对杂排水和混合污水作为中水水源的工艺

以生化处理为主 原水—格栅—调节池—生物处理—沉淀—过滤—消毒；

用两段生化法工艺 原水—格栅—调节池—一段沉淀—二段沉淀—过滤—消毒。

工业超滤装置有板框式、管式、螺旋卷式，其中螺旋卷式应用较多。

超滤膜材料有醋酸纤维素(CA)、聚矾(PSF)、聚醚矾(PES)、聚碳酸盐树脂、聚丙烯腈(PAN)和聚合电解质络合物等。

超滤装置运行过程中，主要的运行维护内容是清洗滤膜，清洗方法分为物理方法和化学方法。

物理方法一般采用温水(40～50℃)冲洗。

化学方法是用化学清洗剂，如酸、碱、表面活性剂溶液等清洗。

对于不同种类的膜要慎重选择化学清洗剂，以防止化学清洗剂对膜的损害。经良好清洗的膜，透水率可恢复95 %～100％，超滤膜的使用寿命可达到一年以上。

在废水处理中，目前超滤主要用来去除污水中的淀粉、蛋白质、树胶、油漆等有机物，以及黏土、微生物等，此外在废水处理中还可用于污泥脱水，代替澄清池等，以及用于纯化甘醇。

7. 超滤系统用户为何出水浊度不断升高 原因何在

超滤膜作为全膜法水处理工艺的一个重要环节，其过滤效果的好坏，直接影响到反渗透设备是否能正常稳定的运行，那么超滤在设计时就需要考虑超滤前的预处理工艺和超滤的运行方式，一些超滤膜厂家在超滤膜设计进水导则中只体现进水浊度（例如：浊度小于200NTU）的要求，没有详细的描述颗粒性物质的进水指标，致使有些工程公司在设计包含超滤装置的工艺流程时，认为超滤是“万能的”，而淡化了超滤的预处理（通常超滤前只配置盘滤），在超滤进水颗粒性物质含量较多时，超滤前期运行出水浊度虽然基本能达到超滤设计的要求，但运行一个阶段后，由于超滤组件通水能力过负荷或其他的颗粒划伤而导致超滤断丝现象时有发生，从而发生超滤系统进水、产水间出现短路现象，进而引发超滤产水量升高、出水浊度增加。 直接导致反渗透装置出现颗粒污堵等污染，这是由于超滤的预处理设计不当导致的出水浊度升高。另一种情况是运行方式的控制不当，其中又包含两种情况，一是超滤反洗和加药反洗的周期设置不当，导致超滤出现污染，严重情况下超滤出现断丝现象，从而导致超滤产水浊度升高，二是超滤前投加的药剂与超滤材质不相匹配，出现化学反应，破坏了超滤的分离层（过滤层），使悬浮物、胶体等物质直接从聚砜层泄露过去，导致超滤产水品质变差，最常见的问题就是出水浊度升高很快。出现上述情况后，首先根据实际情况判断是哪种原因造成的。

8. 超滤系统清洗方法是什么

超滤膜是超滤设备的核心元件，较早开发的高分子分离膜之一，被用于超纯水制备中的中端处理装置。由于超滤膜是多空材料，以物理截留的方式去除水中的杂质，所以超滤膜要定期清洗，以保证超滤膜的通过量延长超滤膜的使用寿命。超滤膜的清洗方法分为七个步骤：
1、配制清洗液
2、低流量输入清洗液
首先用清洗水泵混合一遍清洗液，预热清洗液时应以低流量。然后以尽可能低的清洗液压力置换元件内的原水，其压力仅需达到足以补充进水至浓水的压力损失即可，即压力必须低到不会产生明显的渗透产水。低压置换操作能够较大限度的减低污垢再次沉淀到膜表面，视情况而定，排放部分浓水以防止清洗液的稀释。
3、循环
当原水被置换掉后，浓水管路中就应该出现清洗液，让清洗液循环回清洗水箱并保证清洗液温度恒定。
4、浸泡
停止清洗泵的运行，让膜元件完全浸泡在清洗液中。有时元件浸泡大约1小时就足够了，但对于顽固的污染物，需要延长浸泡时间，如浸泡10~15小时或浸泡过夜。为了维持浸泡过程的温度，可采用很低的循环流量。
5、高流量水泵循环
高流量能冲洗掉被清洗液清洗下来的污染物，如果污染严重，请采用高于表1所规定的50%的流量将有助于清洗，在高流量条件下，将会出现过高压降的问题，单元件较大允许的压降为1bar(15psi)，对多元件压力容器较大允许压降为3.5bar(50psi)，以先超出为限。
6、冲洗
预处理的合格产水可以用于冲洗系统内的清洗液，除非存在腐蚀问题(例如，静止的海水将腐蚀不锈钢管道)。为了防止沉淀，较低冲洗温度为20oC。附注在酸洗过程中，应随时检查清洗液pH值变化，当在溶解无机盐类沉淀消耗掉酸时，如果pH的增加超过0.5个pH值单低，就应该向清洗箱内补充酸，酸性清洗液的总循环时间不应超过20分钟，超过这一时间后，清洗液可能会被清洗下来的无机盐所饱和，而污染物就会再次沉积在膜表面，此时应用合格预处理产水将膜系统及清洗系统内的第一遍清洗液排放掉，重新配置清洗液进行第第遍酸性清洗操作。如果系统必须停机24小时以上，则应将元件保存在1%(重量比)的亚硫酸氢钠水溶液中。在对大典系统清洗之前，建议从待清洗的系统内取出一支膜元件，进行单元件清洗效果试验评估。
7、清洗多段系统
在多段系统的冲洗和浸泡步骤中，可以对整个系统的所有段同时进行，但是对于高流量的循环必须分段进行，以保证循环流量对第一段不会太低而对最后一段不会太高，这可以通过一台泵每次分别清洗各段或针对每段流量要求设置不同的清洗泵来实现。

9. 超滤膜产不出水咋回事

超滤膜不出水，有太多种情况和原因，大致给您讲解，希望能采纳：
1、使用了一段时间的情况：超滤系统已经运行1年以上，突然超滤膜产水口不产水，或者产水非常的小，这种情况非常多。产生这个问题的原因有几点：
a、进水超滤的水质，和原设计的不一样，浊度，SS都比设计的时候升高，导致了膜污染堵塞。
b、超滤系统，的自动控制系统有问题，超滤膜的污染是不可逆的，如果系统的反洗压力，水量都不够，膜反洗效果不好，时间长了，膜内污染物升高之后，就会导致膜不产水，或者产水水质有问题。
c、膜运行的一直没有进行化学清洗，我估计您 的系统就没有进行化学清洗，当膜的跨膜压差达到0.1MPa时，或者产水量下降20%的时候要化学清洗膜系统。
d、检查超滤膜预处理，预处理失效了，原水直接进入超滤膜系统就会导致，系统不产水。
2、新产品不产水的情况，这种情况也会有，但比较少，检查产水阀门，进水烦阀门是否正常开启
膜组件产水口的挡片是否拆掉了。如果都检查，那就找你的供应商来解决。