❶ 超滤离心管怎么使用
蛋白浓缩和换Buffer通常使用的超滤管，常用Millipore的Amicon-Ultra-15超滤管（MWCO10kD）。也有其它型号的、不同体积大小和MWCO超滤管可选，视目的蛋白的分子量与浓缩前体积、浓缩目标体积而定。可重复使用。
1、选择合适的超滤管，主要考虑MWCO和浓缩体积，通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。
2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。
3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。开始离心超滤（离心机预冷至4度）。膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。
4、当浓缩到剩下1ml时，【取50ul国产Bradford溶液，加入10ul流穿，看有没变蓝色，以此判断超滤管是否漏掉蛋白。如果管漏了，将上层和流穿重新倒入新管中开始超滤。要精确判断是否漏管，用5mg/ml的BSA离心10min，再取流穿，跑蛋白胶或Bradford粗测】，继续加入剩下的蛋白液浓缩（在冰上操作，防止蛋白受热），直到所有浓缩液都加完为止。离心过程中注意是否发生蛋白沉淀，导致堵管。若发生沉淀，要确定沉淀的具体原因，是蛋白浓度过高还是Buffer不合适；前者可用多根超滤管同时超滤，降低浓度的办法解决，后者的方法是换不同的Buffer，直到蛋白不发生沉淀为止。
5、前面几步用以浓缩蛋白，如果要换Buffer，在总蛋白液浓缩至1ml左右的时候，轻轻加入新的Buffer（经0.22um超滤膜超滤），再浓缩至1ml左右，连续三次，最后一次的浓缩终体积根据需要的蛋白浓度而定，一般不多于500ul，也有浓缩至200ul以内的情况。按照每次至少10倍左右的体积浓缩算，三次达到1000倍以上，基本上可以达到换buffer的目的。
6、取出最终蛋白浓缩液的操作在冰上操作，用黄枪头（200ul）取，轻轻顺着边缘插入枪头，轻轻吹打、混匀蛋白液，注意不要碰到超滤膜，然后吸取浓缩液，每次吸接近200ul，直到吸完。管底剩下的最后一点浓缩液不必吸取，否则难度太大，有可能损坏超滤膜。最后加入MilliQ水到超滤管中，没过超滤膜，防止膜失水变干。
7、以下是处理超滤管，重复利用超滤管的步骤。
8、倒出超滤管里的水，用milliQ水轻轻润洗几次，【若管底有可见的蛋白沉淀，可以先加入水，然后用枪头吹打，注意不要碰到膜，吹打至沉淀悬起，然后倒掉，不可用自来水猛冲】然后加入0.2M的NaOH溶液，室温放置20min，期间平衡超滤管。再离心10min。倒出残留的NaOH溶液，将管芯浸入MilliQ水的烧杯(1或2L)中,放置几个小时,再换新的水,放置几个小时，不断稀释NaOH浓度。50ml管和盖子用自来水洗，内壁再用MilliQ水洗干净。
9、取出浸没的管芯，加至接近满的MilliQ水，50ml管也加满MilliQ水，将管芯慢慢放入50ml
离心管，排出部分水，然后盖上盖子，放4度保存，直到下次使用。一般来说，按照上述步骤和注意事项，每根管用三四年不会坏。
❷ 怎样使用Miliphore的超滤管
根据超滤膜的截留分子量和蛋白分子量比较才能定，一般采用错流过滤
❸ 想问一下超滤离心管怎么使用啊还有它能不能重复使用
可以的,先用超声波洗干净,再用高压灭菌锅灭菌后,备用即可
❹ 大家用过的超滤管怎么保存
超滤膜组件的维护（四川禹华环保）要点：
一、短期停机的情况下：停机2-3天以内，请内在膜组件内部充水容的状态下停机；如果达一周左右时，请注入浓度为50mg/L的次氯酸钠溶液；
二、 长期停机的情况下：膜组件要先经过次氯酸钠药洗后，再注入浓度为1.5%的亚硫酸氢钠溶液。
三、置于阴凉处，不能脱水存放；低于零度时要加甘油防冻；
❺ 合肥格云流体超滤膜该如何保养
超滤膜的清洗其实很简单，物理清洗时是非常的简单的，对于一般膜孔不是特别小的可拆式超滤膜，一般情况可以直接拆开用柔软物质进行擦拭和冲洗;根据膜管径的大小可选用适合的海绵球利用专用设备来进行擦拭和冲洗，而且这种方法可以反复使用;用30-40℃的热水清洗超滤膜，可以将一些粘稠物或者热熔性的杂质去除。
超滤膜在使用完后要保存起来，一般是保存在保护液中，这样做的目的主要是防止超滤膜脱水后产生收缩，使膜结构遭到破坏，通透量下降。超滤膜的保存一般分为短期保存和长期保存，短期保存一般是超滤膜在暂停使用后，一般少于10天，就应该对超滤膜进行一次杀菌和消毒，清洗的药剂一般为15ppm(ml/L)的HY-240杀菌剂，然后将超滤膜的进水阀、排水阀和调节阀关闭，以保持超滤膜的密封性和灭菌作用;长期保存一般是超滤膜停止使用超过10天以上，先要对超滤膜进行杀菌和反冲洗，然后在超滤膜内注入HY-310保护液密封保存。
❻ 蛋白用超滤管浓缩容易沉淀怎么办
可能是抄这个蛋白的水溶性较差，也就是只能保持在一定浓度不能太高
另外就和这个蛋白的稳定性有关了，超滤时保持低温，体积缩小一点后就把滤液混匀避免局部浓度过高，选择更合适的缓冲液，添加一点甘油等小分子物质等都可以增加蛋白的稳定性。
❼ 超滤离心管可以灭菌吗
1、可以用70%的酒精消毒
2、如果是高温高压灭菌,要注意灭完菌后,管里面的超滤膜是处于湿润的状态,所以需要立即使用,因为膜湿润后就不能干
❽ 离心超滤管 millipore 滤膜上好像有孔,离心后发现有大分子蛋白过来,怎么回事该怎么办
离心超滤管是一次性的，原则上不能反复用的，所以滤膜上有孔就要更换了
❾ 求助：第一次使用超滤离心管应该怎么处理
可能不同厂家的产品保存运输条件不一样。
如果有甘油等保护剂，那就一定要洗干净再加样品。版权
干的超滤管也要先润湿再用，否则可能不能完全利用膜面积。
最好，用样品buffer润洗下再加样，最大程度保证蛋白活性。尤其是用过后保存在NaOH或乙醇中后。
一般还是离心机甩一下好，使膜充分浸润。
降低吸附的办法有：
1，蛋白浓度不要过低
2，尽量选用纤维素的低吸附超滤管
3，用前可以用Tween 80等去垢剂润洗（不影响蛋白活性的前提下）
4，加入保护蛋白，如BSA(不影响蛋白后续使用的前提下)
用完保存在20% EtOH中，4C保存，防止长菌，依不同样品可以重复使用不同的次数。
❿ millipore 超滤管区别
1、装量：0.5ML 4ML 15ML
2、截留分子量3K 10K 30K 50K 100K