㈠ 生物缓冲剂HEPES和PIPES的区别是什么
PIPES的pH缓冲范围是6.1-7.5，不溶于水，溶于NaOH水溶液。PIPES不同于含二（2-羟乙基）氨基基团的缓冲剂（如Bis-tris，Bicine），与多数金属离子不能形成稳定配合物，适用于含有金属离子的溶液体系中的缓冲剂。根据已有的研究结果，PIPES可被应用于使用磷酸纤维素色谱纯化微管蛋白，用于凝胶过滤法纯化重组GTP结合蛋白ARF1和ARF2，作为缓冲液从大肠杆菌中结晶转酮酶。另外，由于PIPES能形成自由基，因此不适合应用于氧化还原体系。在阳离子交换色谱法，应当使用低浓度的PIPES缓冲液，这是因为PIPES具有相对较大的离子强度，而且其pKa值具有浓度依赖性。
HEPES
HEPES的pH缓冲范围是6.8-8.2，溶于水，不与金属离子形成稳定的配合物，多数情况下，不会干扰生物化学过程，HEPES常用于各种类型生物体的细胞培养基中；在蛋白质研究中，PIPES常用作阳离子交换色谱法中结合缓冲液的组分和洗脱液；在DNA研究中，PIPES用作磷酸钙和DNA沉淀物形成体系的缓冲液，AFM以及电穿孔实验中的缓冲液。另外，HEPES对DNA和限制酶之间的反应有一定干扰，也不适合用于Lowry氏法测定蛋白质含量。 综上所述，PIPES和HEPS均属于Good’s缓冲剂，都不能和金属离子形成稳定的配合物，适合于含有金属离子的溶液体系。但它们之间也具有一定的差异性，溶解性方面，PIPES不溶于水，而HEPES具有良好的水溶性；缓冲范围方面，PIPES偏酸性到中性，HEPES偏中性到碱性，这主要是由于两者的结构差异决定的，PIPES有两个磺酸基，HEPES含有一个磺酸基和羟基。另外，PIPES和HEPES在某些体系应用中有一定限制。因此，我们在选择上述缓冲剂的时候，需要综合考虑实验体系的适合性以及两者性质的差异性。这样您在采购这个Good’s缓冲剂的时候是不是能更好的找准您所需要的产品。德晟也会给您一个准确的定位。
㈡ 如何选择离子交换层析的离子交换剂和缓冲液
这个就要看你要纯化的样品的具体性质来定啦，如果是处于摸索条件的间断，可以尝试最常用的Tris缓冲液。。
㈢ 过离子交换柱时，pH梯度洗脱缓冲液一般用什么缓冲液
如果不限定纯化方法，可以考虑亲和层析或离子交换，但根据你问题的意思，是选定离子交内换。
此时就容要考虑你蛋白的等电点了，如果等电点在你稳定pH之上，就用阳离子交换柱：
设计阳离子交换层析：将你的样品置换到你所指的稳定pH的running buffer。同时装柱，平衡，然后上样，平衡，洗脱（因为你的pH不稳定，建议盐洗脱），收峰。得你的蛋白；
如果你的等电点在稳定pH之下，就用阴离子交换柱，其步骤如上，只是改变柱子类型。
㈣ 在经离子交换器处理后的水测硬度须不须要加氨缓冲液
缓冲溶液的特点是：在缓冲溶液中加入少量的酸、碱，溶液的pH几乎不发生变化。使用缓冲溶液，当然是为了维持溶液的pH在一定的范围内，不使其发生很大的变化。测定水硬度时，需要用氨性缓冲溶液调节pH值。
㈤ 简述离子交换色谱法
离子交换色谱法(ion exchange chromatography,IEC)
离子色谱分析法出现在20世纪70年代，80年代迅速发展起来，以无机、特别是无机阴离子混合物为主要分析对象。
离子交换色谱利用被分离组分与固定相之间发生离子交换的能力差异来实现分离。离子交换色谱的固定相一般为离子交换树脂，树脂分子结构中存在许多可以电离的活性中心，待分离组分中的离子会与这些活性中心发生离子交换，形成离子交换平衡，从而在流动相与固定相之间形成分配。固定相的固有离子与待分离组分中的离子之间相互争夺固定相中的离子交换中心，并随着流动相的运动而运动，最终实现分离。
表达式
离子交换色谱的分配系数又叫做选择系数，其表达式为：
K_s=\frac{[RX^+]}{[X^+]}
其中[RX + ]表示与离子交换树脂活性中心结合的离子浓度，[X + ]表示游离于流动相中的离子浓度
分离原理
离子交换色谱（ion exchange chromatography，IEC）以离子交换树脂作为固定相，树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时，组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。
阳离子交换:
阴离子交换:
式中"－－"表示在固定相上，Kxy和Kzm是交换反应的平衡常数，Z+和X-代表被分析的组分离子。M+和Y-表示树脂上可交换的离子团。
离子交换反应的平衡常数分别为：
阳离子交换：
阴离子交换：
平衡常数K值越大，表示组分的离子与离子交换树脂的相互作用越强。由于不同的物质在溶剂中离解后，对离子交换中心具有不同的亲合力，因此具有不同的平衡常数。亲合力大的，在柱中的停留时间长，具有高的保留值。
固定相
离子交换色谱常用的固定相为离子交换树脂。目前常用的离子交换树脂分为三种形式，一是常见的纯离子交换树脂。第二种是玻璃珠等硬芯子表面涂一层树脂薄层构成的表面层离子交换树脂，第三种为大孔径网络型树脂。它们各有特点，例如第二种树脂有很高的柱效，但它的柱容量不大；第三种树脂适用于非水溶液中物质的分离，因为它们的孔径和内表面积大，不需要用水溶胀，便可满意地使用。
典型的离子交换树脂是由苯乙烯和二乙烯基苯交联共聚而成：
其中，二乙烯基苯起了交联和加牢整个构型的作用，其含量决定了树脂交联度大小。交联度一般控制在4％～16％范围内，高度交联的树脂较硬而且脆，也较渗透，但选择性较好。在基体网状结构上引入各种不同酸碱基团作为可交换的离于基团。
按结合的基团不同，离子交换树脂可分为阳离子交换树脂和阴离子交换树脂。阳离子交换树脂上具有与样品中阳离子交换的基团。阳离子交换树脂又可分为强酸性和弱酸性树脂。强酸性阳离子交换树脂所带的基团为磷酸基（一），其中和有机聚合物牢固结合形成固定部分，是可流动的能为其他阳离子所交换的离子。
阴离子交换树脂具有与样品中阴离子交换的基团。阴离子交换树脂也可分为强碱性和弱碱性树脂。
阴离子交换树脂属强碱性，它是由有机聚合物骨架和一季胺碱基团所组成，它带有正电荷。而与相反的是可以移动的部分，它能被其它阴离子所交换
流动相
离子交换色谱的流动相最常使用水缓冲溶液，有时也使用有机溶剂如甲醇，或乙醇同水缓冲溶液混合使用，以提供特殊的选择性，并改善样品的溶解度。
离子交换色谱所用的缓冲液，通常用下列化合物配制：钠、钾、被的柠檬酸盐，磷酸盐，甲酸盐与其相应的酸混合成酸性缓冲液或氢氧化钠混合成碱性缓冲液等。
㈥ 离子交换树脂用缓冲液平衡，为什么又用缓冲液冲洗
恢复树脂的原来的存在状态，使树脂再生利用。
㈦ 离子交换法等电点7.4抗体用什么缓冲液
离子交换法等电点7.4抗体用。
㈧ 某蛋白质等电点为8.14,如采用离子交换色谱法来纯化,如何选择填料和缓冲体系
我的话，第一步会选择pH7.0-7.4左右过阴离子交换，让大多数杂蛋白（大多数杂蛋白pI在6左右）、核酸、色素等杂质结合，收集流穿液，此时蛋白溶液的纯度和澄清度会大大提高，再校pH7.0或更低pH过阳离子交换进行纯化。讲究一点的话，在缓冲选择上可以区分一下阴阳离子缓冲，多数情况影响不大，不必纠结。
㈨ 用离子交换法纯化蛋白如何选定缓冲液
也可以用AEC，主要以流穿模式做。sspxiaoji(站内联系TA)用阳离子交换柱，可以考虑pH6.0-7.0的缓冲液，因内为容大部分蛋白质的等电点在这附近，带电荷少，这样容易穿透除去其他杂蛋白。而你的目的蛋白PI在11，挂柱应该比较牢固。但是有个问题需要注意，PH离你的目标蛋白PI太远，有可能导致挂柱后难以洗脱。
㈩ 蛋白纯化阴离子交换，缓冲液带什么电荷
既然是阴离子交换，就要让目标蛋白带负电，那么缓冲液PH就要大于等电点。缓冲体系的选择也很重要，一般用TRIS-HCl，特别是弱阴离子柱不可选用带负电强的磷酸盐缓冲液，否则上样液中被交换的将是磷酸根而不是目标蛋白。一般用NaCl平衡后上样进行离子交换，然后再用较强的阴离子洗脱。