DMEM完全培养基血清未过滤

『壹』 细胞培养基加了血清后还可以过滤么

1、血清要做灭活处理；
2、灭活后的血清要经过.45和.22虑膜过滤；
3、培养基是不可以紫回外照射的。
还要答注意一点的是血清一般不推荐直接过滤除菌的，如果怀疑血清染菌，过滤时要把血清按比例加入到培养液中，然后才可以过滤除菌！！

『贰』 10%新生牛血清的DMEM完全培养配置方法

你培养基买的液体的还是粉状的？如果液体的加10%血清不就行了，如果粉状的要用ddH2O配，配好调PH值，然后0.22uM滤膜过滤除菌，再加10%血清就行了

如果你什么都没有买准备自己配，我就无语了……

『叁』 如何配DMEM培养基

这里是一份GIBCO的低糖DMEM粉剂配制说明（普通高糖的DMEM培养基配法是一样的）：
TO PREPARE 1*LIQUID
1. Measrue out 5% less distilled water than desired total volume of medium using a mixing container that is as close to the final volume as possible.
2. Add powdered medium to 15 to 30℃ (room temperature)water with gentle stirring. (Do not heat water)
3. Rinse out inside of package to remove all traces of powder.
4. Add 3.7g of NaHCO3 per liter of medium.
5. Dilute to a desired volume with water. Stir until dissolved. (Do not over-mix)
6. Adjust pH of medium to 0.20.3 below desired final working pH* use of IN NaOH or IN HCl is recommended. (Add slowly with stirring) After pH has been adjuste keep container closed until medium is filtered.
7. Sterilize immediately by membrane filtration. (Positive pressure recommended) *pH unite will usually rise 0.1-0.3upon filtration.
另外，在李玲、李雪峰编著的《细胞生物学实验》中配制方法如下：
1 制备新鲜三蒸水或Millipore超纯水。
2 称取所需量的干粉培养基，加入约终体积一半的三蒸水中；若配制一个包装的培养液，在将整个包装的干粉倒入三蒸水后，需用水洗包装袋内面2次，倒入培养液中，以保证所有干粉都溶解成培养液。磁力搅拌或人工搅拌使之完全溶解。
3 根据包装袋上的要求补加所需量的碳酸氢钠；根据实验需要，添HEPES（5-20mmol/L）、谷氨酰胺和其他特殊物质。
4 加水定容到终体积。
5 必要时用1 mol/L 盐酸和1 mol/L 氢氧化钠调节pH。
6 用无菌0.22um滤膜过滤除菌，分装于无菌血清瓶中，4℃冰箱保存。 配制好的培养液用前加入100U/mL青霉素和100U/mL链霉素，并根据需要加入血清（5%-20%）。

『肆』 DMEM培养基为什么要通过0.2um微膜过滤

DMEM培养基中含有大量的不耐高压高温的有机物，无法通过温度来灭菌，只能通过过滤除菌，而过滤除菌通常采用0.2微米孔径的过滤膜过滤。

『伍』 小牛血清和胎牛血清有何区别呢，完全培养基DMEM到底加哪种

完全培养基DMEM加胎牛血清。

小牛血清和胎牛血清的区别：

1、来源不同：

（1）小牛血清取自出生10－30天的小牛，出生三月龄小牛动脉采血分离血清。

（2）胎牛血清是在屠宰怀孕母牛的时候,通过心脏穿刺采血获取的胎牛的血清。

2、品质不同：

（1）小牛血清品质不如胎牛血清。

（2）胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。

3、用途与用法不同：

（1）小牛血清而有些细胞只需小牛血清即可。

（2）胎牛血清某些细胞必需胎牛血清才能生长。

4、外观不同：

（1）小牛血清外观黄色澄清，微溶血，有异物稍粘稠液体。

（2）胎牛血清是一种性状，外观浅黄色澄清，无溶血，无异物稍粘稠液体。

(5)DMEM完全培养基血清未过滤扩展阅读

1、牛血清的功能：

牛血清是细胞培养中用量最大的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。

（1）提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

（2）提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

（3）有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

（4）是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

（5）起酸碱度缓冲液作用。

（6）提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

2、解冻血清注意事项：避免产生沉淀物

（1）解冻血清时，请按照所建议的逐步解冻法(-2℃至4℃至室温)，若血清解冻时改变的温度太大(如-20℃至37℃，实验显示非常容易产生沉淀物。

（2）解冻血清时，请随时将之摇晃均匀，使温度及成分均一，减少沉淀的发生

（3）请勿将血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清会变得混浊，同时血清中许多较不稳定的成分也会因此受到损害，而影响血清的质量。

（4）血清的热灭活非常容易造成沉淀物的增多，若非必要，可以无须做此步骤。

（5）若必须做血清的热灭活，请遵守56℃，30分钟的原则，并且随时摇晃均匀。温度过高，时间过久或摇晃不均匀，都会造成沉淀物的增多。

血清解冻后发现有絮状沉淀物出现，该如何处理。欲去除这些絮状沉淀物，可以将血清分装至无菌离心管内，以400g稍微离心，上清液即可接着加入培养基内一起过滤。但不建议以过滤的方法去除这些絮状沉淀物，因为它可能会阻塞过滤膜。

参考资料来源：网络-胎牛血清

网络-血清

『陆』 什么是DMEM（H）细胞培养基，有什么作用，必须跟疫苗一起用吗

DMEM就是Dulbecco's Modified Eagle Medium 的缩写吧，是一种用途广泛的细胞培养基。一般的细胞系比如HeLa，293T，3T3等都可以用这种培养基培养。H的意思应该是 High Glucose的意思吧，不同的细胞对glucose的需求不太一样因此DMEM也分High Glucose和Low Glucose。至于疫苗什么的我不太明白，一般的细胞培养只需要DMEM和血清就可以了。
希望可以帮到您。

『柒』 DMEM培养液中加血清时过膜的目的是什么

除去污染和杂质，同时过滤膜后可以除菌，因为DMEM不能高压灭菌，对于不能经过高压蒸汽灭菌法灭菌的试剂都需要采用滤膜除菌方法。滤膜分0.22和0.45的，0.45除颗粒和大多数细菌微生物，0.22可以达到GMP或者药典规定的除菌99.99%的要求，希望对你有帮助，望采纳。

『捌』 DMEM培养基中含血清吗

根据实验需要自己加，比如完全培养基，饥饿培养基等

『玖』 什么是DMEM培养基

DMEM/F12培养基说明书
产品代号：MD207-050
一．【组成成分】
成分 mg/L 成分 mg/L 成分 mg/L
无水氯化钙 116.6 L-亮氨酸 59.05 亚油酸 0.042
五水硫酸铜 0.0013 L-赖氨酸盐酸盐 91.25 硫辛酸 0.105
九水硝酸铁 0.05 L-蛋氨酸 17.24 酚红 8.1
七水硫酸亚铁 0.417 L-苯丙氨酸 35.48 1,4-丁二胺二盐酸盐 0.081
氯化钾 311.8 L-丝氨酸 26.25 丙酮酸钠 55
氯化镁 28.64 L-苏氨酸 53.45 维生素H 0.0035
无水硫酸镁 48.84 L-丙氨酸 4.45 D-泛酸钙 2.24
氯化钠 6999.5 L-天门冬酰胺 7.5 氯化胆碱 8.98
无水磷酸二氢钠 54.35 L-天门冬氨酸 6.65 叶酸 2.65
磷酸氢二钠 71.02 L-半胱氨酸盐酸盐 17.56 i-肌醇 12.6
七水硫酸锌 0.432 L-谷氨酸 7.35 烟酰胺 2.02
L-精氨酸盐酸盐 147.5 L-脯氨酸 17.25 盐酸吡哆醛 2
L-胱氨酸盐酸盐 31.29 L-色氨酸 9.02 盐酸吡哆醇 0.031
L-谷氨酰胺 365 L-酪氨酸 38.4 核黄素 0.219
甘氨酸 18.75 L-缬氨酸 52.85 盐酸硫胺 2.17
L-组氨酸盐酸盐 31.48 D-葡萄糖 3151 胸苷 0.365
L-异亮氨酸 54.47 次黄嘌呤 2 维生素B12 0.68

二．【产品指标】

外观 粉红色固体粉末
溶解性 完全溶解，溶液澄明。
pH值
①加NaHCO3 6.60～7.20
②不加NaHCO3 5.50～6.10
水分（%） ≤5.0
渗透压（mOsm/kgH2O）
①加NaHCO3 274～302
②不加NaHCO3 238～263
细菌内毒素（EU/ml） ≤10
微生物检查（CFU/g） ≤1000
细胞生长试验 细胞形态 与标准细胞形态相似

细胞数量 加10％小牛血清培养4天，细胞密度从104细胞/ml增加到105细胞/ml。
三.【配制方法】
⑴ 将一袋培养基全部倒入一容器中，用少量注射用水将袋内残留培养基洗下，并入容器。加注射用水（水温20℃～30℃）到950毫升，轻微搅拌溶解。
⑵ 加入2.438克碳酸氢钠。
⑶ 轻微搅拌溶解，加注射用水至1升。
⑷ 用1mol / L 氢氧化钠溶液或 1mol / L盐酸溶液调pH至所需值。
⑸ 用0.2μm滤膜正压过滤除菌。
⑹ 溶液应在2℃－8℃下避光保存。
四．【贮藏】 2℃－8℃冷藏，干燥、密封、避光贮藏。

『拾』 dmem培养基含血清吗

一般不含，因此细胞培养需要加入FBS(胎牛血清)