蛋白超滤时产生沉淀

㈠ 蛋白质沉淀的原因

定的因素：
一、蛋白质有水化膜；
二、蛋白质是带电荷的；
所以，当破坏这两个因素时，蛋白质从溶液中析出而产生沉淀。
然后，具体讲讲盐析和变性。
----盐析：
在蛋白质水溶液中，加入了高浓度的强电解质盐如硫酸铵、氯化钠、硫酸钠等而使蛋白质从溶液中析出，称为盐析。（低浓度的盐溶液加入蛋白质溶液中，会导致蛋白质溶解度增加，称为盐溶）
[机理]：破坏了蛋白质的水化膜并且中和了表面的净电荷。
----变性：
当天然蛋白质受物理或化学因素影响后，失去原有的生物活性，并且物理化学性质均以改变的作用称为蛋白质的变性。
[机理]（本质）：分子中的次级键断裂，导致空间构象从紧密有序的变为松散无序的状态。（一级结构并无被破坏）
[表现]：
1、无生物活性；
2、溶解度下降、粘度增加、紫外线吸收增加、侧链反应增强、对酶的作用敏感，易被水解（这就是为何蛋白类食品在被加热至变性后人体对其中氨基酸的吸收能力增强）
2、再来说溶解
盐溶液（比如硫酸铜）使蛋白质沉淀的原因不是蛋白质变性而是盐析，少量的盐溶液改变了蛋白质的溶解度，所以在步骤一的时候，溶剂（水）的量相对不足，所以发生了沉淀，但是当加入足够的溶剂（硫酸铜是饱和了，但是蛋白质还能继续溶解），原来析出的蛋白质重新被溶解。这里可能有一个认识上的误区，所谓饱和硫酸铜溶液，饱和的只是硫酸铜，对于其他溶质，还是可以继续溶解的。
3、最后说下颜色反应，不知道
你指的是哪一种。
用双缩脲试剂鉴定，发生紫色反应，最终呈紫色。本质是与肽键发生络合反应
蛋白质中存在含苯环的氨基酸就会遇浓硝酸变黄色，因为苯环发生了硝化反应，蛋白质水解后也不会褪色。

㈡ 请问使蛋白质沉淀的方法有几种

使蛋白质沉淀的方法有3种。

1、盐析法

在蛋白质溶液中加入大量的中性盐以破坏蛋白质的胶体稳定性而使其析出，这种方法称为盐析。常用的中性盐有硫酸铵、硫酸钠、氯化钠等。例如用半饱和的硫酸铵来沉淀出血清中的球蛋白，饱和硫酸铵可以使血清中的白蛋白、球蛋白都沉淀出来，盐析沉淀的蛋白质，经透析除盐，仍保证蛋白质的活性。

2、重金属盐沉淀蛋白质

蛋白质可以与重金属离子如汞、铅、铜、银等结合成盐沉淀。重金属沉淀的蛋白质常是变性的，但若在低温条件下，并控制重金属离子浓度，也可用于分离制备不变性的蛋白质。如临床上利用蛋白质能与重金属盐结合的这种性质，抢救误服重金属盐中毒的病人，给病人口服大量蛋白质，然后用催吐剂将结合的重金属盐呕吐出来解毒。

3、生物碱试剂以及某些酸类沉淀蛋白质

蛋白质又可与生物碱试剂（如苦味酸、钨酸、鞣酸）以及某些酸（如三氯醋酸、过氯酸、硝酸）结合成不溶性的盐沉淀。如临床血液化学分析时常利用此原理除去血液中的蛋白质，此类沉淀反应也可用于检验尿中蛋白质。

(2)蛋白超滤时产生沉淀扩展阅读：

蛋白质的沉淀可分为两类：

1、可逆的沉淀反应：蛋白质分子的结构尚未发生显著变化，除去引起沉淀的因素后，蛋白质的沉淀仍能溶解于原来的溶剂中，并保持其天然性质而不变性。如大多数蛋白质的盐析作用或低温下用乙醇（或丙酮）短时间作用于蛋白质。

2、不可逆的沉淀反应：蛋白质分子内部结构发生重大改变，蛋白质常变性而沉淀，不再溶于原来溶剂中。如加热引起的蛋白质沉淀与凝固，蛋白质与重金属离子或某些有机酸的反应。

㈢ 蛋白质分离提纯方法

1、盐析法：

盐析法的根据是蛋白质在稀盐溶液中，溶解度会随盐浓度的增高而上升，但当盐浓度增高到一定数值时，使水活度降低，进而导致蛋白质分子表面电荷逐渐被中和，水化膜逐渐被破坏，最终引起蛋白质分子间互相凝聚并从溶液中析出。

2、有机溶剂沉淀法：

有机溶剂能降低蛋白质溶解度的原因有二：其一、与盐溶液一样具有脱水作用；其二、有机溶剂的介电常数比水小，导致溶剂的极性减小。

3、蛋白质沉淀剂：

蛋白质沉淀剂仅对一类或一种蛋白质沉淀起作用，常见的有碱性蛋白质、凝集素和重金属等。

4、聚乙二醇沉淀作用：

聚乙二醇和右旋糖酐硫酸钠等水溶性非离子型聚合物可使蛋白质发生沉淀作用。

(3)蛋白超滤时产生沉淀扩展阅读：

吸附层析

1、吸附柱层析

吸附柱层析是以固体吸附剂为固定相，以有机溶剂或缓冲液为流动相构成柱的一种层析方法。

2、薄层层析

薄层层析是以涂布于玻板或涤纶片等载体上的基质为固定相，以液体为流动相的一种层析方法。这种层析方法是把吸附剂等物质涂布于载体上形成薄层，然后按纸层析操作进行展层。

3、聚酰胺薄膜层析

聚酰胺对极性物质的吸附作用是由于它能和被分离物之间形成氢键。这种氢键的强弱就决定了被分离物与聚酰胺薄膜之间吸附能力的大小。

层析时，展层剂与被分离物在聚酰胺膜表面竞争形成氢键。因此选择适当的展层剂使分离在聚酰胺膜表面发生吸附、解吸附、再吸附、再解吸附的连续过程，就能导致分离物质达到分离目的。

㈣ 蛋白在超滤管浓缩过程中出现沉淀怎么办

1、选择合抄适的超滤管，主要考虑袭MWCO和浓缩体积，最常见的是Ultra-15（10kD）。
通常应截留分子量不应大于目的蛋白分子量的1/3，比如目的蛋白分子量为35kDa，就可以选择10kDa截留分子量的超滤管。
若目的蛋白分子量为10kD左右，则可以用截留分子量3kD的超滤管。认真阅读使用说明书，注意超滤膜对各种化学物质的耐受程度有所不同，表格中有。

2、新买来的超滤是干燥的，使用前加入MilliQ水，水量完全过膜，冰浴或冰箱里预冷几分钟。然后将水倒出，即可加入蛋白液，加入的多少，以不超过管顶的白线为准。操作要轻，加入蛋白液前，超滤管需要插在冰上预冷。

3、平衡。质量和重心二者都要达到平衡。注意转速和加速度不可太快，否则直接损坏超滤膜。

注意，一定要等离心机达到目的转速之后，方可离开
离心机，否则离心机出问题时，无法第一时间处理，后果不可预测！膜与转轴的方向根据说明书调整（角转离心机的情况是膜与轴垂直）。在实际使用中，一般转速开的比说明书里的要低，这样可以延长离心管的使用寿命。

㈤ 人血白蛋白在超滤过程中地注意事项

1.药液呈现混浊、来沉淀、源异物或瓶子有裂纹、瓶盖松动、过期失效等情况不可使用。
2.本品开启后，应一次输注完毕，不得分次或给第二人输用。
3.输注过程中如发现病人有不适反应，应立即停止输用。
4.有明显脱水者应同时补液。
5.运输及贮存过程中严禁冻结。

㈥ 蛋白质的溶解特性与沉淀原理

蛋白质通过盐析的办法沉淀的原理是降低蛋白质的溶解度，使蛋白质凝聚而从溶液中析出。
蛋白质的沉淀（protein
precipitation），沉淀是溶液中的溶质由液相变成固相析出的过程。蛋白质从溶液中析出的现象，称为蛋白质的沉淀。蛋白质沉淀常用的方法有盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、生物碱试剂与某些酸（如三氯醋酸）沉淀等。

㈦ 蛋白用超滤管浓缩容易沉淀怎么办

可能是抄这个蛋白的水溶性较差，也就是只能保持在一定浓度不能太高
另外就和这个蛋白的稳定性有关了，超滤时保持低温，体积缩小一点后就把滤液混匀避免局部浓度过高，选择更合适的缓冲液，添加一点甘油等小分子物质等都可以增加蛋白的稳定性。

㈧ 为什么球蛋白在透析过程中（除盐）易发生沉淀析出

盐浓度对蛋白质的活性还是比较关键的。
我觉得你的解决方法可以从下面几个回方面去考虑答。
第一加一些保护剂，如蔗糖，甘油，巯基乙醇等。
第二，如果你仅仅为了脱盐的话，减少脱盐时间。考虑用超滤或者G系列的凝胶脱盐，这样时间较快，减少蛋白质的变性。
第三，增加你的蛋白质浓度，一定程度也可以减少透析过程中蛋白质的沉淀，但是效果不是特别好的。你可以试试。

望采纳 O(∩_∩)O谢谢

㈨ 蛋白质的沉淀作用还有哪些哪些是变性哪些是没有变性在分离蛋白质时常使用哪些方法

你好，很高兴回答你的问题。猜测你问的是蛋白质沉淀和浓缩的方法。
一般蛋白变性沉淀方法有氯仿/甲醇沉淀，
TCA沉淀。非变性沉淀方法是在保持低温下，加入硫酸铵，PEG，或者有机溶剂（如丙酮，乙醇，甲醇），非变性沉淀中硫酸铵和PEG可能会是蛋白沉淀不完全，而有机溶剂在低温下也会使部分蛋白质变性，所以要根据实验目的慎重选择。
分离蛋白质常用的方法有蛋白沉淀，超滤，柱层析等等，主要还是根据不同样品体系来选择分离的方法。
纯手工打造，希望被采纳哦。

㈩ 透析蛋白时出现沉淀什么原因

出现絮状沉淀是很正常的现象，因为透析本身就是一个复性的过程，那么出现絮状的沉淀就是一些不能够复性成为天然结构的一些目的蛋白和一些杂蛋白，而这些都是我们所不需要的。所以说出现絮状沉淀是正常的也是我们希望看到的。
至于出现沉淀的原因不外乎条件变化太剧烈了，建议不要让透析的条件变化太剧烈了，主要是PH的浓度的变化和样品中一些其他东西如尿素的浓度变化。