1. 离子交换柱柱效半峰时间长的原因
可能是流动相流速设置不合理,或者是交换柱很久没淋洗过,导致流动相流动速度减慢。
2. 高效液相色谱出峰时间由什么决定的
高效液相色谱出峰时间由多种因素决定:
1、固定相(色谱柱填料,长短,粒径)。
2、流动相(包括有机相水相配比,pH值,有机相组成,水相中缓冲盐组成,缓冲盐浓度,是否加入表面活性剂,是否加入离子对试剂等)。
3、流速(改变全部出峰时间,不会改变出峰顺序和相对保留时间)。
高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。
(2)强离子交换柱出峰时间扩展阅读:
高效液相色谱法有“四高一广”的特点:
1、高压:流动相为液体,流经色谱柱时,受到的阻力较大,为了能迅速通过色谱柱,必须对载液加高压。
2、高速:分析速度快、载液流速快,较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在15~30分钟,有些样品甚至在5分钟内即可完成,一般小于1小时。
3、高效:分离效能高。可选择固定相和流动相以达到最佳分离效果,比工业精馏塔和气相色谱的分离效能高出许多倍。
4、高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在μL数量级。
5、应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析,特别是高沸点、大分子、强极性、热稳定性差化合物的分离分析,显示出优势。
6、柱子可反复使用:用一根柱子可分离不同化合物
7、样品量少、容易回收:样品经过色谱柱后不被破坏,可以收集单一组分或做制备。
3. 离子对浓度和出峰时间的关系
是流动相浓度,因为离子交换色谱的分离原理就是利用色谱柱对不同离子的吸附或交换能力不同而完成的,因此这种形式的色谱柱,对流动相的离子浓度和pH都非常敏感
4. 离子交换色谱法的原理、装置及应用是什么
一、原理:离子抄交换色谱(ion exchange chromatography,IEC)以离子交换树脂作为固定相,树脂上具有固定离子基团及可交换的离子基团。当流动相带着组分电离生成的离子通过固定相时,组分离子与树脂上可交换的离子基团进行可逆变换。根据组分离子对树脂亲合力不同而得到分离。
二、装置:
1、分离柱:装有离子交换树脂,如阳离子交换树脂、阴离子交换树脂或螯合离子交换树脂。
2、抑制柱和柱后衍生作用:常用的检测器不仅能检测样品离子,而且也对移动相中的离子有响应,所以必须消除移动相离子的干扰。
3、检测器:分为通用型和专用型。通用型检测器对存在于检测池中的所有离子都有响应。离子色谱中最常用的电导检测器就是通用型的一种。
三、应用:
离子色谱主要用于测定各种离子的含量,特别适于测定水溶液中低浓度的阴离子,例如饮用水水质分析,高纯水的离子分析,矿泉水、雨水、各种废水和电厂水的分析,纸浆和漂白液的分析,食品分析,生物体液(尿和血等)中的离子测定,以及钢铁工业、环境保护等方面的应用。
5. 色谱柱出峰时间提前
出峰提前主要可能是流动相中有机相(或强洗脱力相)比例变多了,或者是柱温提高了,再就是柱子不同,或是柱子的保留和以前有变化。
建议:用完柱子一定要进行冲洗维护,把分析方法固定,在两相或三相进行比例洗脱时一定要用仪器的比例阀进行操作,不要直接配制,这样都会有利于保留时间稳定
6. 离子色谱中各种常见阴离子的色谱出峰时间是多少
不同的色谱条件,出峰时间也不一样,建议你去“色谱世界”网站看看,有很多离子色谱图,都有保留时间及条件,你可以借鉴。
7. 液相色谱的出峰时间问题
出峰时间延长的影响因素太多,流动相,柱温,实际流速等都可能影响,只要管路是通畅的,流速不变,柱压升高应该一般不会影响保留时间,因为对溶质起保留作用的填料不会增多。分析测试网络网乐意为你解答实验中碰到的各种问题,祝你实验顺利。
压力不等于流速,其他条件不变,色谱柱种类比较关键。
8. 离子交换柱层析分离氨基酸实验中asp和lys出峰次序不同的原因是什么
氨基酸的分离鉴定——纸层析法
一,实验目的
掌握氨基酸纸层析的方法和原理,学会分析待
测样品的氨基酸成分.
二,实验原理
纸层析是以滤纸为惰性支持物的分配层析.滤纸纤维上的羟基具有亲水性,吸附一层水作为固定相,有机溶剂为流动相.当有机相流经固定相时,物质在两相间不断分配而得到分离.
溶质在滤纸上的移动速度用Rf值表示:
Rf=原点到层析斑点中心的距离/原点到溶剂前沿的距离
在一定的条件下某种物质的Rf值是常数.Rf值的大小与物质的结构,性质,溶剂系统,层析滤纸的质量和层析温度等因素有关.本实验利用纸层析法分离氨基酸.
三,实验器材
(1)大烧杯(5000mL):1只/组
(2)微量注射器(100 L):1只/ 组.
(3)喷雾器:公用.
(4)培养皿:1只/组.
(5)层析滤纸(长22cm,宽14cm的新华一号滤纸):1张/组.
(6)直尺,铅笔:自备.
(7)电吹风:1只/组.
(8)托盘,针,白线:1套/组.
(9)手套:1双/组.
(10)塑料薄膜:公用.
(11)小烧杯:50mL,1只/组.
四,实验试剂
(1)扩展剂:将4体积正丁醇和1体积冰醋酸放入分液漏斗中,与5体积水混合,充分振荡,静置后分层,弃去下层水层.
(2)氨基酸溶液:0.5%的已知氨基酸溶液3种(赖氨酸,苯丙氨酸,缬氨酸),0.5%的待测氨基酸液1种.
(3)显色剂:0.1%水合茚三酮正丁醇溶液.
实验试剂
五,实验操作
检查培养皿是否干燥,洁净;若否,将其洗净并置于干燥箱内120℃烘干.
(1)平衡:剪一大块塑料薄膜铺在桌面上,将层析缸或大烧杯到置于塑料薄膜上,再把盛有约20mL展层溶液的小烧杯置于倒置的层析缸或大烧杯中,用塑料薄膜密封起来,平衡20min.
(2)规划:带上手套,取宽约14cm,高约22cm的层析滤纸一张.在纸的下端距边缘2cm处轻轻用铅笔划一条平行于底边的直线A,在直线上做4个记号,记号之间间隔2cm,这就是原点的位置.另在距左边缘1cm处画一条平行于左边缘的直线B,在B线上以A,B两线的交点为原点标明刻度(以厘米为单位),参见左图.
(3)点样:用微量注射器分别取10mL左右的氨基酸样品(每取一个样之前都要用蒸馏水洗涤微量注射器,以免交叉污染),点在这四个位置上.挤一滴点一次,同一位置上需点2~3次,2~3mL/次,每点完一点,立刻用电吹风热风吹干后再点,以保证每点在纸上扩散的直径最大不超过3mm.每人须点4个样,其中3个是已知样,1个是待测样品.
(4)层析:用针,线将滤纸缝成筒状,纸的两侧
边缘不能接触且要保持平行,参见图3-3.向培养皿中加入扩展剂,使其液面高度达到1cm左右,将点好样的滤纸筒直立于培养皿中(点样的一端在下,扩展剂的液面在A线下约1cm),罩上大烧杯,仍用塑料薄膜密封.当扩展剂上升到A线时开始计时,每隔一定时间测定一下扩展剂上升的高度,填入表3-1中.当上升到15~18cm,取出滤纸,剪断连线,立即用铅笔描出溶剂前沿线,迅速用电吹风热风吹干.
(5)显色:用喷雾器在通风厨中向滤纸上均匀喷上0.1%茚三酮正丁醇溶液,然后立即用热风吹干,即可显出各层析斑点,参见左图.
(6)计算各种氨基酸的Rf值,并判断混合样品中都有哪些氨基酸,各人将自己的实验结果贴在实验报告上,见表3-2.
(7)以层析时间为横坐标,扩展剂上升高度为纵坐标画图,求出扩展剂上升到18cm时所需要的时间.
(8)将微量注射器内外用蒸馏水清洗干净,倒掉用过的展层液和平衡液,将培养皿洗净,整理好桌面上的仪器和试剂
9. 离子色谱中各种常见阴离子的色谱出峰时间是多少
一般的规律是,离子的价数越高,保留时间越长;离子半径越大,保留时间越长;离子极化度越大,保留时间越长。
所以一般出峰顺序是:氟<氯<亚硝酸<溴<硝酸<磷酸<硫酸
当然这出峰顺序规律也不是一定的,有的柱子会有些变化
出峰时间与淋洗液浓度,柱子温度,柱子特性等都有关系,所以出峰时间不固定,随条件变化而变
10. 离子交换树脂柱上柱速度
柱子下端流出液的速度是2倍柱体积每小时。层析柱的下端一般是由旋专塞的,开口大小控属制流速啊,拿个量筒记下时间,比如5分钟能流出多少体积,最后换算成每小时多少,比较下速度快慢,多退少补。柱子下端的旋塞不太容易控制流速的话,可以在下面接一个输液器,就是打点滴那种,很便宜,一看你就知道怎么用。可以手动上样,如果懒或者柱子高,可以加个泵,将样品通过泵打到柱子上端。够详细吧。