CMFF离子交换填料

❶ 我要纯化一种从细菌提取出来的未知粗酶，盐析后上离子交换，等电点未知，我准备选用DEAE-sephroseFF 填料

盐析后直接离子交换可能不太合适，最好先脱下盐，再栗子交换。
DEAE是阴栗子交换，PH调到PI以上， 填料可以重复利用

❷ C#问题Console.WriteLine("ff{0}",cm["anmy"]);输出没显示~

即使cm["anmy"]返回空,也应该输出:ff啊
方便就帖多点源码(如这个方法的)吧.

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补充:
楼主后来帖的代码,使用到了Response?就是在ASP.NET里了,
如果在ASP.NET里使用Console.Write,是不会输出到控制台界面的,
bs开发这个与cs不一样.即使同样的Console.Write方法.

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asp.net和c#.net是一样的吗？
看你做的程序:ASP.NET和Winform或控制台程序不一样.
你在ASP.NET里用Console,不会输出的.

❸ 凝胶的生物

生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。
1.测定——分子量、PI
当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中，可简易地测出PI，并选择纯化用缓冲液的最佳PH。
2.选择——层析方法
若对目标蛋白的特性或样品成分不太了解，可尝试几种不同的纯化方法：
一 使用最通用的凝胶过滤方法，选择分离范围广阔的介质如Superose、Sephacryl HR依据分子量将样品分成不同组份。
二 用含专一配体或抗体的亲和层析介质结合目标蛋白。亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质，再用以结合目标蛋白。一步即可得到高纯度样品。
三 体积大的样品，往往使用离子交换层析加以浓缩及粗纯化。高盐洗脱的样品，可再用疏水层析纯化。疏水层析利用高盐吸附、低盐洗脱的原理，洗脱样品又可直接上离子交换等吸附性层析。两种方法常被交替使用于纯化流程中。
3.纯化——大量粗品
处理大量原液时，为避免堵塞柱子，一般使用sepharose big beads、sepharoseXL、sepharose fast flow等大颗粒离子交换介质。扩张柱床吸附技术利用多种STREAMLINE介质，直接从含破碎细胞或组织萃取物的发酵液中俘获蛋白。将离心、超滤、初纯化结合为一。提高回收率，缩短纯化周期。
4.纯化——硫酸氨样品
硫酸氨沉淀方法常被用来初步净化样品，经处理过的样本处于高盐状态下，很适合直接上疏水层析。若作离子交换，需先用Sephadex G-25脱盐。疏水层析是较新技术，随着介质种类不断增多，渐被融入各生产工艺中。利用Hitrap HIC Test Kit 和RESOURCE HIC Test Kit可在八种疏水介质中选择最适合介质及最佳的纯化条件。低盐洗脱的样品可稍加稀释或直接上其它吸附性层析。
5.纯化——糖类分子
固化外源凝订素如刀豆球蛋白、花生、大麦等凝集素，可结合碳水化合物的糖类残基，很适合用作分离糖化细胞膜组份、细胞、甚至亚细胞细胞器，纯化糖蛋白等。两种附上外源凝集素的Sepharose 6MB亲和层析介质，专为俘获整个细胞或大复合物，如膜囊等。
6.纯化——膜蛋白
膜蛋白分离常使用去污剂以保持其活性。离子性去污剂应选用与目标蛋白相反电荷者，避免在作离子交换时和目标蛋白竞争交换介质，藉此除去去污剂。非离子性去污剂可以疏水层析除去。
7.纯化——单抗、抗原
单抗多为IgG.来源主要是腹水和融合瘤培养上清液。在培养前除去IgG.重组蛋白A介质Mabselect和rProtein A Sepharose FF对IgG有更高的载量和专一性，基团脱落更少。脱落的rProtein A用离子交换Q Sepharose HP或凝胶过滤Superdex 200，很容易去除。
疏水层析Phenyl Sepharose HP亦很适合纯化IgG.宿主抗体和污染IgG可用凝胶过滤Superdex 200在精细纯化中去除。
纯化IgG抗原最有效的方法是用活化偶联介质如CNBr、NHs activated Sepharose FF偶联IgG，再进一步获取IgG抗原。
HiTrap IgM是用来纯化融合瘤细胞培养的单抗IgM，结合量达5mg IgM.HiTrap IgY是专门用来纯化IgY，结合量达100mg纯IgY.
8.纯化——重组蛋白
重组蛋白在设计、构建时应已融入纯化构想。样品多夹杂了破碎细胞或溶解产物，扩张柱床吸附技术STREAMLINE便很适合做粗分离。Amersham biosciences提供三个快速表达、一步纯化的融合系统。
一 GST融合载体使要表达的蛋白和谷胱甘肽S转移酶一起表达，然后利用Glutathione Sepharose 4B作亲和层析纯化，再利用凝血酶或因子Xa切开。
2. 蛋白A融合载体使要表达的蛋白和蛋白A的IgG结合部位融合在一起表达，以IgG Sepharose 6 FF纯化。
二 含组氨酸标记（Histidine-tagged）的融合蛋白可用Chelating Sepharose FF螯合Ni2+金属，在一般或变性条件（8M尿素）下透过组氨酸螯合融合蛋白。HisTrap试剂盒提供整套His-Tag蛋白的纯化方法。
9.纯化——包涵体蛋白
包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿素中。一般包涵体蛋白样品的纯度越高，复性效果越好。SOURCE 30 RPC反相层析介质很适合纯化复性前的粗品，并可以1MnaOH重生。此方法纯化后的包涵体蛋白，复性回收率明显提高。
10.包涵体蛋白固相复性
许多文献报导将包涵体蛋白在变性条件下固定（吸附）在层析介质上，一般用各种Sepharose FF离子交换层析介质。而且无需大量稀释样品，并将复性和初纯化合二为一，大大节省时间及提高回收率。
固相复性方法也被用于以HiTrap Chelating金属螯合层析直接复性及纯化包涵体形式表达的组氨酸融合蛋白；以HiTrap Heparin肝素亲和层析直接复性及纯化包涵体形式表达的含多个赖氨酸的融合蛋白。两种亲和层析预装柱均可反复多次重复使用，比一般试剂盒更方便、耐用。
11.纯化——中草药有效成分
中药的化学成分极其复杂。例：如用甲醇分离黄酮甙，三糖甙先被洗下来，二糖甙其次，单糖甙随后，最后是甙元。Sephadex LH-20可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂，广泛用于各种天然产物的分离，包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、萜类、甾类等。
生物碱在酸性缓冲液中带正电，成为盐，HiTrap SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱。相反，黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中，在HiTrap Q阴离子交换柱上分离效果良好。
一般多糖纯化大多使用分子筛如Sephadex，Sephacryl.若分子量在600KD以下，并需更高分辨率，可选择新一代的Superdex.一般植物可能含水溶性、酸溶性、碱溶性多种多糖。SOURCE5、15、30RPC反相层析也很适合各种中药有效成分的检测、分离和放大制备。由于中药的成分非常复杂，SOURCE反相层析可用范围为PH1-14 ，并可用1M NaOH，1M HCL清洗、再生。比传统硅胶反相层析更易于工艺优化及在位清洗，寿命也更长。
12.纯化——肽类
肽类的来源有天然萃取，合成肽和重组肽三种。肽容易被酶降解，但可从有机溶剂或促溶剂中复性，所以多以高选择性的反相层析如SOURCE 30RPC、SOURCE 15RPC、SOURCE 5RPC或离子交换Minibeads、Monobeads作纯化。Superdex Peptide HR是专为肽分子纯化设计的凝胶过滤预装柱，能配合反相层析做出更精美的肽图。肽分子制备可用离子交换配合凝胶过滤Superdex 30 PG。医学都市多功能
13.纯化——核酸、病毒
核酸的纯化用于去除影响测序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸大分子，和质粒DNA一样，可用分离大分子的Sephacry S-1000 SF、Superose或Sepharoce 4FF凝胶过滤介质去除杂蛋白，再配合离子交换如Mono Q、 SOURCE Q分离核酸。
14.纯化——寡核苷酸寡酸苷酸
多应用在反义（anti-sense）DNA、RNA测序、PCR和cDNA合成等研究。合成后含三苯甲基的寡核苷酸以阴离子交换的Mono Q或快速低反压的SOURCE Q在PH12下可除副产物，并避免凝集和保护基的脱落。载量大大高过反相层析，可用做大量制备。不含三苯甲基的失败序列可用反相柱ProRPC去除。
15.脱盐、小分子去除
使用凝胶过滤介质Sephadex G10，G15，G25，G50等去除小分子，效率高，处理量可达床体积30%.只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液，HiPrep Desalting（26ml）可在数分钟为多至10ml样品脱盐。
16.疫苗纯化
使用凝胶过滤介质Sepharose 4FF纯化疫苗，去除培养基中的杂蛋白，处理量可大于床体积10%.柱高一般40-70cm，整个过程约半至一小时。使用此法生产的疫苗品种有乙肝、狂犬、出血热、流感、肺结核、小儿麻痹疫苗等。分子量较小的疫苗可使用Sephacryl S-500HR，如甲肝疫苗等。
17.抗生素聚合物分析
中国药典从2000年版起要求抗生素头孢曲松钠需要找出聚合物占产品的白分比，规定使用Sephadex G10凝胶过滤法测定。
18.纯化-基因治疗用病毒载体
SORRCE 15Q
19.纯化-基因治疗用质粒
Q Sepharose XL，SOURCE 15Q，STREAMLINE Q，Sephacryl S500，Plasmidselect 在下游纯化中，可应用不同层析技术在纯化生物分子的同时，去除各种污染物。 1.去除——内毒素
内毒素又称热原。含脂肪A、糖类和蛋白，是带负电的复合大分子。
内毒素的脂肪A部份有很强的疏水性。但在高盐下会凝集，无法上疏水层析。利用疏水层析试验盒（17-1349-01）可选择结合目标蛋白的介质而去除内毒素。
内毒素与阴离子交换介质Q或DEAE Sepharose Fast Flow有较强结合。可在洗脱目标蛋白后用高盐缓冲液或NaOH去除。
利用CNBr或NHS Sepharose FF可偶联内毒素底物如LAL，PMB，自动成亲合层析介质结合内毒素。内毒素经常是多聚体，凝胶过滤层析可有效地将之去除。
2.去除——蛋白中的核酸
大量核酸增加样本黏度，令区带扩张，反压增加，降低分辨率和流速。药审和食检对核酸含量也有严格限制。
胞内表达蛋白的核酸问题尤其严重。核酸带阴电荷，在初步纯化时利用阳离子交换介质如STREAMLINESP，SP Sepharose Big Beads，SP或CM Sepharose FF，SP SepharoseXL结合目标蛋白，可除去大量核酸。
核酸在高盐下会和蛋白解离，疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白，在纯化蛋白的同时去除核酸。
利用核酸酶将核酸切成小片断，用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了。
3.去除——病毒和微生物
病毒和微生物可成为病原，应尽量减除。结合不同层析技术，使用注射用水，用NaOH定期进行仪器和凝胶的在位消毒和在位清洗，皆可避免污染物增加。
病毒大都有脂外壳。可用与目标蛋白电荷相反的S/D（solvent/detergent）处理，使病毒失活，如Triton和Tween.再用适当的离子交换介质如CM Sepharose FF结合目标蛋白，去除S/D.
其它污染物可以改变pH和离子强度使其从目标分子中解离或失活，凝胶过滤介质Superdex及多种吸附性介质，SOURCE都是很好的精细纯化介质，可去除多种微量污染物。 凝胶是指颗粒大小在1埃到10埃之间的混合物。高分子溶液和某些溶胶，在适当的条件下，整个体系会转变成一种弹性的半固体状态的稠厚物质，失去流动性。这种现象称为胶凝作用,所形成的产物叫做凝胶或冻胶.
“气凝胶”是指分散系为气态的，如：云，雾等，“固凝胶”有烟水晶等，“液凝胶”就是呈液态的胶体，如氢氧化铁胶体 。

❹ 离子交换层析与疏水层析有何区别

离子交换层析是利用蛋白质在不同PH带不同种电荷的方法，利用离子交换的方法分离蛋白的。离子交换内的介质一般是树脂，阳离子交换型的，使用前树脂先用碱处理成钠型，将氨基酸混合液（pH=2-3)上柱，pH=2-3时，氨基酸主要以阳离子形式存在，与树脂上的钠离子发生交换而被“挂”在树脂上，再用洗脱剂洗脱。不同的氨基酸（带的电荷不同）与树脂的亲和力不同，要将其分离洗脱下来，需要降低它们之间的亲和力，方法是逐步提高洗脱剂的pH和盐浓度，这样各种氨基酸将以不同的速度被洗脱下来，反之亦然。不同反荷离子与树脂亲和力是不同的，其强弱关系为阳性竞争离子：Ag+〉CS+〉K+〉NH4+〉Na+〉H+〉Li+阴性竞争离子：I->NO3->(PO4)3->CN-〉HSO3-〉Mg2+〉HCO3-〉HCOO-〉CH3COO-〉OH-〉F-如果某种离子溶液洗脱效果不好，可用另一种亲和力强的离子代替之，等电点＞7选择阳离子交换树脂，等电点＜7选择阴离子交换树脂。

❺ 如何制作气凝胶

如何制作气凝胶
气凝胶又称冻胶。溶胶或溶液中的胶体粒子或高分子在一定条件下互相连接，形成空间网状结构，结构空隙中充满了作为分散介质的液体（在干凝胶中也可以是气体），这样一种特殊的分散体系称作凝胶。没有流动性。内部常含有大量液体。例如血凝胶、琼脂的含水量都可达99%以上。可分为弹性凝胶和脆性凝胶。弹性凝胶失去分散介质后，体积显著缩小，而当重新吸收分散介质时，体积又重新膨胀，例如明胶等。脆性凝胶失去或重新吸收分散介质时，形状和体积都不改变，例如硅胶等。由溶液或溶胶形成凝胶的过程称为胶凝作用（gelation）。
[编辑本段]生物学和凝胶
生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。
1.测定——分子量、PI
当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围广阔的Superose HR预装柱很适合测定未知蛋白的分子量。用少量离子交换介质在多个含不同PH缓冲液的试管中，可简易地测出PI，并选择纯化用缓冲液的最佳PH.
2.选择——层析方法
若对目标蛋白的特性或样品成分不太了解，可尝试几种不同的纯化方法：
一] 使用最通用的凝胶过滤方法，选择分离范围广阔的介质如Superose、Sephacryl HR依据分子量将 样品分成不同组份。
二] 用含专一配体或抗体的亲和层析介质结合目标蛋白。亦可用各种活化偶联介质偶联目标蛋白的底物、受体等自制亲和介质，再用以结合目标蛋白。一步即可得到高纯度样品。
三] 体积大的样品，往往使用离子交换层析加以浓缩及粗纯化。高盐洗脱的样品，可再用疏水层析纯化。疏水层析利用高盐吸附、低盐洗脱的原理，洗脱样品又可直接上离子交换等吸附性层析。两种方法常被交替使用于纯化流程中。
3.纯化——大量粗品
处理大量原液时，为避免堵塞柱子，一般使用sepharose big beads、sepharoseXL、sepharose fast flow等大颗粒离子交换介质。扩张柱床吸附技术利用多种STREAMLINE介质，直接从含破碎细胞或组织萃取物的发酵液中俘获蛋白。将离心、超滤、初纯化结合为一。提高回收率，缩短纯化周期。
4.纯化——硫酸氨样品硫酸氨沉淀方法常被用来初步净化样品，经处理过的样本处于高盐状态下，很适合直接上疏水层析。若作离子交换，需先用Sephadex G-25脱盐。疏水层析是较新技术，随着介质种类不断增多，渐被融入各生产工艺中。利用Hitrap HIC Test Kit 和RESOURCE HIC Test Kit可在八种疏水介质中选择最适合介质及最佳的纯化条件。低盐洗脱的样品可稍加稀释或直接上其它吸附性层析。
5.纯水——糖类分子
固化外源凝订素如刀豆球蛋白、花生、大麦等凝集素，可结合碳水化合物的糖类残基，很适合用作分离糖化细胞膜组份、细胞、甚至亚细胞细胞器，纯化糖蛋白等。两种附上外源凝集素的Sepharose 6MB亲和层析介质，专为俘获整个细胞或大复合物，如膜囊等。
6.纯化——膜蛋白
膜蛋白分离常使用去污剂以保持其活性。离子性去污剂应选用与目标蛋白相反电荷者，避免在作离子交换时和目标蛋白竞争交换介质，籍此除去去污剂。非离子性去污剂可以疏水层析除去。
7.纯化——单抗、抗原 *单抗多为IgG.来源主要是腹水和融合瘤培养上清液。腹水有大量白蛋白、转铁蛋白和宿主抗体等。Mabselect、Protein G和Protein A对IgG的Fc区有专一性亲和作用，能一步纯化各种不同源的IgG.血清互补剂如小牛血清可先用蛋白G预处理，在培养前除去IgG.重组蛋白A介质 Mabselect和rProtein A Sepharose FF对IgG有更高的载量和专一性，基团脱落更少。脱落的rProtein A用离子交换Q Sepharose HP或凝胶过滤Superdex 200，很容易去除。
*疏水层析Phenyl Sepharose HP亦很适合纯化IgG.宿主抗体和污染IgG可用凝胶过滤Superdex 200在精细纯化中去除。
*纯化IgG抗原最有效的方法是用活化偶联介质如CNBr、NHs activated Sepharose FF偶联IgG，再进一步获取IgG抗原。
*HiTrap IgM是用来纯化融合瘤细胞培养的单抗IgM，结合量达5mg IgM.HiTrap IgY是专门用来纯化IgY，结合量达100mg纯IgY.
8.纯化——重组蛋白 重组蛋白在设计、构建时应已融入纯化构想。样品多夹杂了破碎细胞或溶解产物，扩张柱床吸附技术STREAMLINE便很适合做粗分离。Amersham biosciences提供三个快速表达、一步纯化的融合系统。
一] GST融合载体使要表达的蛋白和谷胱甘肽S转移酶一起表达，然后利用Glutathione Sepharose 4B作亲和层析纯化，再利用凝血酶或因子Xa切开。
2. 蛋白A融合载体使要表达的蛋白和蛋白A的IgG结合部位融合在一起表达，以IgG Sepharose 6 FF纯化。
二] 含组氨酸标记（Histidine-tagged）的融合蛋白可用Chelating Sepharose FF螯合Ni2+金属，在一般或变性条件（8M尿素）下透过组氨酸螯合融合蛋白。HisTrap试剂盒提供整套His-Tag蛋白的纯化方法。
9.纯化——包涵体蛋白
包涵体蛋白往往需溶于6M盐酸胍或8M尿素中。高化学稳定性的Superose 12及Sepharose 6FF凝胶过滤介质很适合在变性条件下做纯化。变性纯化后的蛋白需要复性至蛋白的天然构象。Superdex 75、Q Sepharose FF和Phenyl Sepharose FF分别被发现有助包涵体蛋白的复性。一般包涵体蛋白样品的纯度越高，复性效果越好。SOURCE 30 RPC反相层析介质很适合纯化复性前的粗品，并可以1MnaOH重生。此方法纯化后的包涵体蛋白，复性回收率明显提高。
10.包涵体蛋白固相复性 *近年许多文献报导将包涵体蛋白在变性条件下固定（吸附）在层析介质上，一般用各种Sepharose FF离子交换层析介质。去除变性剂后，蛋白在介质上成功复性，再将复性好的蛋白洗脱下来。固相复性避免了一般复性过程中蛋白质聚体的形成，所以复性得率更高，而且无需大量稀释样品，并将复性和初纯化合二为一，大大节省时间及提高回收率。
*固相复性方法也被用于以HiTrap Chelating金属螯合层析直接复性及纯化包涵体形式表达的组氨酸融合蛋白；以HiTrap Heparin肝素亲和层析直接复性及纯化包涵体形式表达的含多个赖氨酸的融合蛋白。两种亲和层析预装柱均可反复多次重复使用，比一般试剂盒更方便、耐用。
11.纯化——中草药有效成分
中药的化学成分极其复杂。传统中药多是煎熬后服用，有效成份多较为亲水，包括生物碱、黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸、多糖、肽和蛋白质。灵活及综合性地利用多种层析方法。如离子交换、分子筛、反相层析，更容易分离到单一活性成分。Sephadex LH-20葡聚糖凝胶同时具备吸附性层析和分子筛功能，例：如用甲醇分离黄酮甙，三糖甙先被洗下来，二糖甙其次，单糖甙随后，最后是甙元。 Sephadex LH-20可使用水、醇、丙酮、氯仿等各种试剂，广泛用于各种天然产物的分离，包括生物碱、甙、黄酮、醌类、内脂、萜类、甾类等。
*生物碱在酸性缓冲液中带正电，成为盐，HiTrap SP阳离子交换层析柱可以分离许多结构非常近似的生物碱。相反，黄酮、蒽醌、皂甙、有机酸等可溶于偏碱的缓冲液中，在HiTrap Q阴离子交换柱上分离效果良好。
*一般多糖纯化大多使用分子筛如Sephadex，Sephacryl.若分子量在600KD以下，并需更高分辨率，可选择新一代的Superdex. 一般植物可能含水溶性、酸溶性、碱溶性多种多糖。综合利用分子筛及离子交换层析有助进一步获各组份纯品。另外，多糖药物需去除可引起过敏的蛋白质，传统 Sevag方法用丁醇脱蛋白需反复数十次。阴阳离子交换法可以一、两步快速去除多糖中残存的蛋白质。SOURCE5、15、30RPC反相层析也很适合各种中药有效成分的检测、分离和放大制备。由于中药的成分非常复杂，SOURCE反相层析可用范围为PH1-14 ，并可用1M NaOH，1M HCL清洗、再生。比传统硅胶反相层析更易于工艺优化及在位清洗，寿命也更长。
12.纯化——肽类
肽类的来源有天然萃取，合成肽和重组肽三种。肽容易被酶降解，但可从有机溶剂或促溶剂中复性，所以多以高选择性的反相层析如SOURCE 30RPC、SOURCE 15RPC、SOURCE 5RPC或离子交换Minibeads、Monobeads作纯化。Superdex Peptide HR是专为肽分子纯化设计的凝胶过滤预装柱，能配合反相层析做出更精美的肽图。肽分子制备可用离子交换配合凝胶过滤Superdex 30 PG。医学都市多功能
13.纯化——核酸、病毒
核酸的纯化用于去除影响测序或PCR污染物等研究。核酸可大致上分为质粒DNA、噬菌体DNA和PCR产物等。病毒也可视作核酸大分子，和质粒DNA一样，可用分离大分子的Sephacry S-1000 SF、Superose或Sepharoce 4FF凝胶过滤介质去除杂蛋白，再配合离子交换如Mono Q、 SOURCE Q分离核酸。
14.纯化——寡核苷酸寡酸苷酸多应用在反义（anti-sense）DNA、RNA测序、PCR和cDNA合成等研究。合成后含三苯甲基的寡核苷酸以阴离子交换的Mono Q或快速低反压的SOURCE Q在PH12下可除副产物，并避免凝集和保护基的脱落。载量大大高过反相层析，可用做大量制备。不含三苯甲基的失败序列可用反相柱ProRPC去除。
15.脱盐、小分子去除
使用凝胶过滤介质Sephadex G10，G15，G25，G50等去除小分子，效率高，处理量可达床体积30%.只需在进样后收集首1/3-1/2柱体积的洗脱液，就可以去除该填料分离范围上限以下的小分子，简单直接。由于只是去除小分子，柱高10cm以上即可。整个过程一般可于数分钟至半小时完成。Sephadex G25系列介质专为蛋白质脱盐而设计，预装柱HiTrap Desalting（5ml）可用针筒操作。HiPrep Desalting（26ml）可在数分钟为多至10ml样品脱盐。
16.疫苗纯化 使用凝胶过滤介质Sepharose 4FF纯化疫苗，去除培养基中的杂蛋白，处理量可大于床体积10%.柱高一般40-70cm，整个过程约半至一小时。目前使用此法生产的疫苗品种有乙肝、狂犬、出血热、流感、肺结核、小儿麻痹疫苗等。分子量较小的疫苗可使用Sephacryl S-500HR，如甲肝疫苗等。
17.抗生素聚合物分析
中国药典从2000年版起要求抗生素头孢曲松钠需要找出聚合物占产品的白分比，规定使用Sephadex G10凝胶过滤法测定。
18.纯化-基因治疗用病毒载体
SORRCE 15Q
19.纯化-基因治疗用质粒
Q Sepharose XL，SOURCE 15Q，STREAMLINE Q，Sephacryl S500，Plasmidselect 在下游纯化中，可应用不同层析技术在纯化生物分子的同时，去除各种污染物。
1.去除——内毒素
内毒素又称热原。含脂肪A、糖类和蛋白，是带负电的复合大分子。
内毒素的脂肪A部份有很强的疏水性。但在高盐下会凝集，无法上疏水层析。利用疏水层析试验盒（17-1349-01）可选择结合目标蛋白的介质而去除内毒素。
内毒素与阴离子交换介质Q或DEAE Sepharose Fast Flow有较强结合。可在洗脱目标蛋白后用高盐缓冲液或NaOH去除。
利用CNBr或NHS Sepharose FF可偶联内毒素底物如LAL，PMB，自动成亲合层析介质结合内毒素。内毒素经常是多聚体，凝胶过滤层析可有效地将之去除。
2.去除——蛋白中的核酸
大量核酸增加样本黏度，令区带扩张，反压增加，降低分辨率和流速。药审和食检对核酸含量也有严格限制。
胞内表达蛋白的核酸问题尤其严重。核酸带阴电荷，在初步纯化时利用阳离子交换介质如STREAMLINESP，SP Sepharose Big Beads，SP或CM Sepharose FF，SP SepharoseXL结合目标蛋白，可除去大量核酸。
核酸在高盐下会和蛋白解离，疏水层析介质很适合用来结合目标蛋白，在纯化蛋白的同时去除核酸。
利用核酸酶将核酸切成小片断，用凝胶过滤做精细纯化时便很容易去除了。
3.去除——病毒和微生物
病毒和微生物可成为病原，应尽量减除。结合不同层析技术，使用注射用水，用NaOH定期进行仪器和凝胶的在位消毒和在位清洗，皆可避免污染物增加。
病毒大都有脂外壳。可用与目标蛋白电荷相反的S/D（solvent/detergent）处理，使病毒失活，如Triton和Tween.再用适当的离子交换介质如CM Sepharose FF结合目标蛋白，去除S/D.
其它污染物可以改变pH和离子强度使其从目标分子中解离或失活，凝胶过滤介质Superdex及多种吸附性介质，SOURCE都是很好的精细纯化介质，可去除多种微量污染物。
凝胶是指颗粒大小在1埃到10埃之间的混合物。高分子溶液和某些溶胶，在适当的条件下，整个体系会转变成一种弹性的半固体状态的稠厚物质，失去流动性。这种现象称为胶凝作用,所形成的产物叫做凝胶或冻胶.
“气凝胶”是指分散系为气态的，如：云，雾等，“固凝胶”有烟水晶等，“液凝胶”就是呈液态的胶体，如氢氧化铁胶体 。
例：
食品级葡甘露胶（Gum Konjac-GM）
葡甘露胶（又称：魔芋胶）系一种新型多用途微粒状可食用胶。这里推出之葡甘露胶是以优质魔芋中提取的葡萄甘露聚糖为原料，经脱杂处理后采用先进技术加工而成，其中添加成分不含任何非食用化学配料或色素。与传统的琼脂、果胶、海藻胶等食品添加剂相比，葡甘露胶在膨胀率、粘度、增稠、稳定性及使用方便程度上皆显著优于上述胶类，此外尚具有特殊的优点：无需添加任何凝固剂，在无糖、低糖或高糖条件下，在酸性、中性或碱性条件下，常温即可凝冻，凝胶性能理想；保持或强化了葡萄甘露聚糖所具有的降糖、降脂、减肥等保健功能，大大拓宽了魔芋应用的范围；价格低廉、使用方便。
葡甘露胶能广泛用于食品、饮料、医药、日用化工、科研等领域，作为琼脂、果胶、海藻胶等的替代产品，价格低廉，且使用时无需改变原有的设备及工艺，能大幅度降低添加剂的使用成本，是一种理想的新型凝胶添加剂。为满足不同产品开发的需要，一、凝胶（果冻）型：能与各种天然果汁、物料及色素良好混合，作为广谱凝胶赋型剂，是制作果冻、水晶软糖等的极佳原料，也可作为培养基支持体，且不需再添加其它任何胶类或碱性成份；凝胶成型条件随意、脱杯完整，凝胶强度高、韧性大。用量：0.7～0.9%。用法：在适量温水中溶胀3～5分钟，煮沸冷至70度左右时加入糖及各种配料，冷却至室温即成。
二、培养基型：用作替代琼脂作为花卉及其它植物进行组织培养的支持体。组培苗根粗、苗壮，使用效果理想，成本大幅降低。用量：0.5～0.6％。用法：在温水中溶胀3～5 分钟，煮沸后冷却即可。三、果肉（茶）饮料型：作为稳定剂与悬浮剂，替代琼脂和羧甲基纤维素等，广泛用于粒粒橙、果茶、果汁、豆奶、银耳羹、八宝粥等异相悬浮剂等（或混合）饮料中，防止沉淀或分层。 用量：0.15～0.25％左右。用法：在适量温水中充分溶胀后加入物料中。四、冷冻制品型：用于冰棒、冰淇淋等各种冷冻制品，可增大膨胀，减少冰晶，提高抗热融性，使产品更加爽口。用量：0.15～0.25％左右。用法：在适量温水中充分溶胀后加入物料中。五、增稠型：用于果酱、米、面制品中，可增大膨胀率，提高韧性，改善赋型和口感。是进口洋槐豆胶的理想替代物。用量：0.2～0.3％左右。用法：在适量温水中充分溶胀后加入物料中。

❻ 蛋白质纯化所用的柱子有几种，分别有什么作用

一、沉淀法

1、 盐析

实验原理：中和蛋白质表面电荷并破坏水化膜。

蛋白质易溶于水，因为其分子的-COOH -NH2和-OH都是亲水基团，这些基团与极性水分子相互作用形成水化层，包围于蛋白质分子周围形成1~100 nm大小的亲水胶体，从而削弱了蛋白质分子之间的作用力。当大量盐加到蛋白质溶液中，高浓度的盐离子（如硫酸铵的 SO42- 和NH4+）有很强的水化力，可夺取蛋白质分子的水化层，使之"失水"，于是蛋白质胶粒凝结并沉淀析出。

2、等电点沉淀法：

实验原理：利用蛋白质在等电点时溶解度最低而各种蛋白质又具有不同等电点的特点进行分离的方法。

在等电点时，蛋白质分子以两性离子形式存在，其分子净电荷为零(即正负电荷相等)，此时蛋白质分子颗粒在溶液中因没有相同电荷的相互排斥，分子相互之间的作用力减弱，其颗粒极易碰撞、凝聚而产生沉淀，所以蛋白质在等电点时，其溶解度最小，最易形成沉淀物。

注意点：不同的蛋白质，具有不同的等电点。同一种蛋白质在不同条件下，等电点不同。

3、有机溶剂沉淀法

实验原理：加入有机溶剂使水溶液的介电常数降低，因而增加了两个相反电荷基团之间的吸引力，促进了蛋白质分子的聚集和沉淀。

有机溶剂引起蛋白质沉淀的另一种解释认为与盐析相似，有机溶剂与蛋白质争夺水化水，致使蛋白质脱除水化膜，而易于聚集形成沉淀。

影响因素：(一)有机溶剂的选择 (二)温度的控制 (三)pH值 (四)离子强度

用此法析出的沉淀一般比盐析法易过滤或离心沉降，分离后的蛋白质沉淀应立即用水或者缓冲液溶解，以达到降低有机溶剂的浓度的目的。此法在血液制品的制备过程中较多使用。

二、层析

1、离子交换柱层析

实验原理：以离子交换剂为固定相，依据流动相中的组分离子与交换剂上的平衡离子进行可逆交换时的结合力大小的差别而进行分离的一种层析方法。是发展最早的层析技术之一，目前已成为蛋白质分离纯化最常用的手段，是基于蛋白质电荷不同的分离技术。

离子交换层析中，基质是由带有电荷的树脂或纤维素组成。带有正电荷的称之阴离子交换树脂；而带有负电荷的称之阳离子树脂。阴离子交换基质结合带有负电荷的蛋白质，所以这类蛋白质被留在柱子上，然后通过提高洗脱液中的盐浓度等措施，将吸附在柱子上的蛋白质洗脱下来。结合较弱的蛋白质首先被洗脱下来。反之阳离子交换基质结合带有正电荷的蛋白质，结合的蛋白可以通过逐步增加洗脱液中的盐浓度或是提高洗脱液的pH值洗脱下来。

2、疏水相互作用层析

实验原理：根据分子表面疏水性差别来分离蛋白质和多肽等生物大分子的一种较为常用的方法。

蛋白质和多肽等生物大分子的表面常常暴露着一些疏水性基团，我们把这些疏水性基团称为疏水补丁，疏水补丁可以与疏水性层析介质发生疏水性相互作用而结合。不同的分子由于疏水性不同，它们与疏水性层析介质之间的疏水性作用力强弱不同，疏水作用层析就是依据这一原理分离纯化蛋白质和多肽等生物大分子的。

3、亲和层析

实验原理：利用蛋白质能和某些专一分子可逆结合的特性，

当蛋白质溶液通过层析柱时，其中可与亲和载体配基相互作用的受体被吸附剂结合，不被吸附的无关成分则可随流出液通过柱体，从而将吸附蛋白与其他蛋白质分开。此法特异性强，收率高。

4、凝胶层析

实验原理：根据分子大小分离蛋白混合物的最有效的方法之一。混合物随流动相流经装有凝胶固定相的层析柱时，其中各物质因分子大小的的不同而被分离的技术。

三、离心

1、速率区带离心法

实验原理根据分离的粒子在离心力作用下，因其在梯度液中沉降速度的不同，离心后具有不同沉降速度的粒子处于不同的密度梯度层内，形成几条分开的样品区带，达到彼此分离的目的。

由于此法是一种不完全的沉降，沉降受物质本身大小的影响较大，一般是应用在物质大小相异而密度相同的情况。容量小，只能用于少量的制备。

2、差速离心法

实验原理：利用样品中各组分沉降系数的差异，对不同的微粒施以不同的离心力，经过多次离心，离心速度逐步加大，将不同的微粒依次沉降，从而实现离心分离。

四、膜分离

1、超滤法

是利用加压膜分离技术，在一定的压力下，使小分子溶质和溶剂穿过一定孔径的特制薄膜，大分子溶质滞留，从而使大分子物质得到部分的纯化。常和离子交换，凝胶过滤联合使用。

2、透析

是利用小分子经过半透膜扩散到水( 或缓冲液) 的原理，将无机盐等小分子与生物大分子分开的一种分离纯化技术，常和盐析，盐溶等方法联合使用。

❼ 阳离子层析柱sp ff 和 sp hp有什么区别

FF是fastflow，颗粒较hp大，流速快，分辨率较HP差。

HP是highperformance，颗粒小，流速慢，但分辨率高。

Q、S、SP柱都是强交换剂柱，其中：

• Q柱是强阴交换柱；

• S、SP都是强阳离子交换柱。

DEAE、ANX、CM都是弱交换剂柱。

❽ Ni Resin FF填料怎么装柱子

Ni柱填料一般有两种，NTA和IDA亲和柱，你这个大小的蛋白1ml填料理想状况可以吸附20mg以上，最多2ml填料不就够了 。这种柱子一般不用大体积，一般装柱都是1-2ml填料，我也用过5-10ml填料的，按比例使用同等条件洗脱效果比小体积的柱子要差很多。纯化是纯度和效率的矛盾，你需要什么样的纯度，需要多大量，我对你的实验并不熟悉，只能告诉你，理论上每ml填料可以结合你的蛋白大约20-30mg（质量好的填料），这种量还是比较可观的，做小鼠的动物实验都足够了。我自己制备1g纯蛋白都是用2ml填料纯化的国产填料主要是基质合成比较差，如果其基质是进口的，那和进口填料也差不多，就是质量不稳定而已我不知道你指什么两种，NTA只是一种化学物质－氮川三乙酸，所以我不认为这个填料有什么两种，最多偶联基质和方式不同而已，功能基团是一样的，不一样的功能团就不会叫这个名字，除非你指的是IDA，IDA已经慢慢地被淘汰了，详细的就不多说了

❾ blue sepharose ff 是什么填料

不要紧的
以前我们实验室就这种Sepharose FF型的阴阳离子填料（GE买的）有一根1ml的小柱子。干了半个多月，重新泡胀再位清洗后依然可以吸附蛋白。也未见明显的柱效下降。

主要干1个小时应该只是流动相流光，但是填料结合的水相还没有完全风干。所以重新加入流动相赶走气泡之后一般不会影响柱效的。

❿ 蝎毒的采集分离

蝎子在受到激怒的情况下，出于防御或攻击的本能，会从毒囊中排出毒液。蝎毒的采集就是依据这个道理。采集蝎毒的常用方法有剪尾法、机械刺激法和电刺激法三种。剪尾法：夹住蝎的后腹部第五节的两侧，剪下蝎子的尾节，破碎后浸入生理盐水（0.9%的氯化钠溶液）中，浸出有毒部分，再将尾节研磨，用离心机离心（5000转/分）5分钟，重复3次。集中有毒的液体，放入容器内，再制成干毒粉，置于-5℃下保存备用。这种方法，每条蝎子只能采毒一次，而采毒后的蝎子降低了药用功能和经济价值，对蝎子的伤害也大，通常不采用。人工刺激法：用镊子夹住蝎子的一个螯肢，提起悬于容器中片刻，多数蝎子的尾刺即会排出毒液，但也有少数蝎子不排毒液的，不排毒液的可用比如细木筷子等硬物轻碰蝎子的头胸部或前腹部，刺激蝎子的尾刺排毒。电激法：该法是用电子脉冲提毒仪器采集蝎毒的方法。此法采毒量大，工效高，一人操作，全年多次采毒而不致于损害蝎子，是使用较多也较科学的采毒方法。三种采毒方法相比，剪尾提毒法简便、快速、收毒率高，适于大批量采集蝎毒；缺点是活蝎只能供一次采毒，人工刺激法获取的毒液清澈透明，但采毒量较少，工效低，速度慢，对大规模提取蝎毒不适用。
毒素类型及氨基酸序列图册。
电激法获取的毒量较人工刺激法取得的毒量要多1倍。大约3000只成蝎可产湿毒6-7g，可冻成干毒1g，即每毫克湿毒可加工成0.14-0.16mg干毒。每只东亚钳蝎1次可产0.34mg左右的干毒。雄蝎的个体比雌蝎小，其产毒量也比雌蝎少。在电脉冲刺激下，1只雌蝎3次可产湿毒2.59mg，1只雄蝎3次产2.01mg湿毒（按隔7天后采1次毒计算）。但需严格注意卫生，确保采毒的纯度；个别蝎子在通一次电时不排毒，须再通一次电，但通电时间不得超过2秒钟，频率128赫兹，电压6-10伏。以免烧坏仪器和损伤蝎子。蝎子的排毒量随温度的变化高低而各有差异。温度低时排毒量相对较少，当温度低于20℃时，蝎子的排毒量相当少，当低于10℃时，蝎子则停止排毒。因此，常温养殖蝎子要采毒应尽量在6月份气温高于25℃以上时进行。孕蝎和种蝎不能用于采毒。怀孕早期的孕蝎可以采毒，但在临产前不能采毒。用于采毒的蝎子多为商品成蝎和老龄蝎。 蝎毒液成分主要为蛋白质和酶类，容易失去活性。常温下极易变质，必须加工成干毒粉才能保存较长时间。
蝎毒液除了马上用于分离纯化者外，应尽快进行干燥。蝎毒干燥的目的，就是尽量除去毒液中的水分，提高粗毒的稳定性，使之便于保存、分析、出售。常用的干燥方法有两种：一，若要保持蝎毒中酶的活力，应选用真空冷冻干燥；二，若仅为了保持毒性，采用真空干燥即可。
（1）真空干燥（即真空减压干燥）是在低压下，使蝎毒液中的水分快速蒸发的方法。真空干燥装置包括真空干器、冷凝管和真空泵。干燥器顶部活塞接通冷凝管，冷凝管的另一端依次连接吸滤瓶、干燥塔和真空泵。蒸汽在冷凝管中凝集后滴入吸收瓶中。干燥器中放有干燥剂（如五氧化二磷等）和蝎毒液样品。使用前，先在干燥器活塞四周涂上少许凡士林，然后检查整个装置是否漏气。使用时，先将蝎毒液和干燥剂分别装入平皿中，然后置于干燥器中，启动真空泵抽气至盖子推不动，依次关闭活塞和真空泵。蝎毒干燥后，应缓缓旋开活塞，以防止空气冲散蝎毒干粉。最后在净化条件下取出干粉，立即分装，密封保存。
（2）真空冷冻干燥先将蝎毒液在低温冰柜中预冻成固体（用不锈钢皿盛装毒液），然后在低温和高真空度上使之升华，即可得到纯白色蝎毒干粉。由于冷冻干燥是在低温和高真空度下进行的，所以毒液在冻干过程中不起泡、不沾壁、疏松、易取出、易溶于水，有利于保存。 蝎毒的分离纯化过程一般是先经过按照分子量大小分离的色谱柱，再经过离子交换柱，最后采用反向HPLC技术，获得单一的组分。程序为：先用CM-Sephadex C-50离子交换层析分离，再用Sephadex G-50过滤，也可采用CM-Sephadex C-50、Sp-Sephadex C-25离子交换柱层析和Sephadex G-50凝胶过滤三步分离程序。如采用CM-Sephadex C-50进行离子交换层析，将毒性较强的组分透析后再用重层析，再用Sephadex G-50凝胶过滤，纯化可得毒素。或采用RP-HPLC对东亚钳蝎的粗毒进行分离，并且用两种不同的HPLC系统反复分离，用0.1%三氯醋酸-水和0.1%三氯醋酸-70%乙醇-水进行梯度洗脱。或进行二级提取，即用CM-Sephadex C-50离子交换层析提取，再用凝胶过滤，经CM-Sephadex C-10除盐。
如采用Sepharose FF阳性离子交换凝胶柱，可望获得较高纯度的单一有效成分。而利用HPCE及HPLC可较好显示蝎毒中小分子多肽的组成及相对含量，其结果基本一致。当下对蝎毒分离纯化的研究就主要集中在通过选择不同柱长、流速和梯度的凝胶层析和高效液相色谱来获得具有高抗癌活性的单一成分的抗癌多肽，比如用三步色谱法在蝎毒中分离得到了抗癫痫肽并测定了其N端50个氨基酸序列，用离子交换色谱和凝胶排阻色谱从粗毒中分离出镇痛肽，用一步CM Sephadex C-50超长柱从粗毒中纯化了镇痛肽，用低压阳离子交换柱和低压排阻柱及离子交换柱从东亚钳蝎中分离和提取了抗肿瘤肽。比如东亚钳蝎镇痛抗肿瘤缬精甘肽（analgesic antitumoral peptide，AGAP），从东亚钳蝎蝎毒中分离纯化得到的单组分活性肽，为单一肽链的单纯碱性多肽,等电点大于10。含有碱性氨基酸，还富含疏水性氨基酸。活性肽的N末端部分氨基酸序列为：VRDGY IADDKNCAYF CGRNA YCDDE。
为获得高纯度的蛋白质，往往需要反复使用凝胶过滤层析和离子交换层析，但这种分离方法的不足之处在于样品损失率太高，且劳动量较大。利用基因工程技术制备蝎毒特异蛋白质的研究正在研制之中，但成本较高，数量有限。因此，蝎毒粗毒的分离仍是获得蝎毒特异性的蛋白质的主要来源。 蝎毒液在普通冰箱（1-4℃）中，只能作短期保存。只有冻干成结晶粉状，才能保存其生理活性。影响蝎毒干粉稳定性的主要因素是水分、空气和温度。当干粉含水量低于10%时，能抑制微生物活性；含水量低于3%时，可抑制化学活性。所以，应将蝎毒干粉分装在小瓶或小管中，并用熔封或石蜡封口，以隔绝空气，然后置于低温冰箱（一30℃）中保存。
从养殖场运送新鲜蝎毒液到收购、加工部门或检验部门，必须用广口瓶保温冰瓶（瓶中加碎冰块降温）携带。若运送蝎毒干粉至远处，也应采取降温措施，以防蝎毒蛋白质变性失活。 多数动物类中药的有效成分尚不明确或不完全明确，其提取纯化工艺研究较少，在中成药生产工艺中动物类中药基本是生药粉末直接配料，少数用水、醇提取，水醇法精制。由于动物类中药的有效成分多数是蛋白质类、多糖类等大分子物质或其水解产物，常规方法很难充分地提出、分离和纯化这些大分子物质。
传统上蝎毒以全蝎原粉入药效果更好，也是当下临床常采用的方法。但原粉剂量大、卫生学难合格，同时全蝎多是以产地加工后的产品入药。而全蝎的产地加工一般以清水煮或盐水煮居多，但这两种方法又存在很多不合理的地方，比如有效成分的损失、变性，质量难以控制，盐水煮又因为加盐量不同，使得临床剂量不准确等而使得进一步使用受到限制。 蝎毒素最主要的分类按其分子结构中是否含有二硫键，其中含有二硫键的一类，依其药理学特征，可分为Na+通道、K+通道、Cl-通道和Ca2+通道（主要存在于骨骼肌细胞浆膜上）毒素。这些离子通道是细胞膜表面的一类分子量较大的跨膜糖蛋白，在膜上形成特殊的亲水孔道，是细胞内外离子交换的途径，是神经、肌肉、腺体等许多组织细胞膜上的基本兴奋单元，能产生和传导电信号，具有重要的生理功能。
钠离子通道
根据作用方式和结合位点的不同，Na+通道毒素又可分为α型毒素和β型毒素。α-毒素以电压依赖方式作用于Na+通道上的位点3，延缓Na+通道的失活过程，使Na+通道电流衰减减慢，动作电位时间延长，α-毒素可根据其作用对像的不同分为4类：①典型的对哺乳动物高特异性的α-毒素，②作用于昆虫的昆虫型α-毒素，③中间型α-毒素，同时作用于哺乳动物和昆虫的α类似毒素，对哺乳动物和昆虫都有作用，但对哺乳动物毒性更强。
β毒素则结合在Na+通道的位点4上，影响Na+通道的激活过程，使电压依赖的Na+通道激活曲线移向较负的电位。根据β型蝎毒素对昆虫和哺乳动物钠通道的特异性及其作用于昆虫时表现的症状不同又可分为：抗哺乳动物β-毒素，抗昆虫兴奋性β-毒素，抗昆虫抑制性β-毒素和TsVII或γ型蝎毒素。抗哺乳动物β蝎毒素，表现为对哺乳动物的高毒性，并在膜片钳下表现出可调节哺乳动物脑中钠通道电流的作用；抗昆虫兴奋性毒素即使以毫克级别注射到哺乳动物体内（如小鼠脑内）也无毒性表现的；抗昆虫抑制性毒素，经注射性给药可诱发昆虫的迟缓性瘫痪，利用膜片钳技术，抗昆虫抑制性毒素使轴突胞膜动作电位向强去极化方向移动；第四类β-毒素是对于昆虫和哺乳动物的钠通道都有高活性作用，例如Lqhβ1毒素在注射给药于青蝇幼虫时有典型的抑制作用。
钾离子通道
第一类是以Charybdotoxin（CTX）为代表，分子中有三对二硫键，配对方式为C1-C4，C2-C5，C3-C6，但CTX对钾离子通道亚型的选择性不高，这反而使得它的用途相当广泛。，从1990年起，ChTx被开发为实验室商品。它可阻断含高电导Ca2+激活的K+通道（BKCa）、电压依赖性K+通道（如淋巴细胞和果蝇Shaker K+通道）、A型K+通道（卵母细胞）、小电导Ca2+激活的K+通道（Aplysia神经细胞），并且可作用于神经细胞、血液细胞和破骨细胞中的电压依赖型Kv1.3（Shaker钾离子通道的一种）钾离子通道。其特征是它们的N端为焦谷氨酸残基，有70%的氨基酸序列相似性，且在分子的第2与第14位上均分别坐落着保守的Phe和Trp残基。类似的毒素还包括CTX-Lq2、1beriotoxin（1bTX）、BmTX和PBTX等。
第二类是Noxiustoxin（NTX）为代表，最早由墨西哥Centruroides noxius蝎的毒素中分离出，包括从5种蝎毒中分离出来的8种多肽，也是最早报道的蝎钾离子通道阻断剂。主要作用于电压依赖性K+通道，延长动作电位持续时间，并且对Ca2+激活的K+通道（KCa）也有微弱的抑制作用。此类毒素有80%的氨基酸序列相似性，而与第一类蝎毒素仅有40%的相似性。NTx能够以剂量依赖的方式可逆地阻断鱿鱼轴突标本的延迟整流钾离子通道、大鼠骨骼肌标本中的BKCa和人T淋巴细胞中的电压依赖型钾离子通道。类似的毒素还有MgTX、CoTX1、CITX、TsKa和HTX等。
第三类是以Kaliotoxin（KTX）为代表，最早从北非蝎Androctonus martetanicus mauretanicus的粗毒中分离得到，包括从7种蝎毒中纯化到的9种多肽，由37-38个氨基酸残基组成。此类毒素有80%-90%的氨基酸序列相似性，而与第一、二类相比有40%-50%的相似性。可以阻断电压依赖性钾通道，包括高电导Ca2+激活的K+通道（BKCa）。类似的毒素还有Ag-itoxin 2（AgTX 2）、AeTX 3、KTX 2和KTX 3等。
第四类是以LTX1、P05、BmP05为代表的毒素，它们均由31个氨基酸残基组成，有84%的氨基酸序列相似性。它们对小鼠的毒性很强，脑室注射的半致死量低于2μg/kg鼠，可以与apamin竞争结合鼠脑突触膜上的apamin受体，能特异性地阻断不同细胞类型中的低电导、Ca2+激活、apamin敏感的钾离子通道（low-concta-nce，Ca2+-activated，apamin-sensitive K+channel，SKCa）。
第五类为TSK毒素，由巴西产蝎Tityus serru-latus毒素中分离的一种35肽，在C端含有独特的-Cys-Asp-Cys-三肽结构。特异性作用于apamin敏感的小电导Ca2+激活的K+通道（SKCa）。且RodriguesAR等学者发现TsTX-Ka可高亲和力、可逆性地阻断爪蟾卵母细胞上Kvl.3通道（Shaker K+通道的一种亚型）。
第六类是以MTX（Mauxotoxin）为代表，由北非蝎Scorpio maurus毒素中分离出，包括3种蝎毒中分离到的5个多肽，大小介于34～37个氨基酸残基之间，MTX分子中含有与其他毒素位置不同的4对二硫键，为：C1-C4，C2-C5，C3-C6和C7-C8。其他几种的配对方式为：C1-C5，C2-C6，C3-C7，C4-C8。可阻断电压依赖性K+通道，如果蝇的ShakerK+通道、Apamin或KTX敏感的K+通道。类似的毒素还有Pi1、HTX1、Pi4等。
第七类为以P01为代表，由28-29个残基组成，包括从3种蝎毒中分离到的4种多肽，是迄今发现最小分子的蝎毒素组，有76%的氨基酸序列相似性。主要作用于apamin敏感的小电导Ca2+激活K+通道（SKCa），但相对结合能力较弱。对小鼠都毒性很弱（脑室注射至mg水平仍无反应）。因此，尽管将这4个多肽由于结构类似而被归入钾离子通道毒素类，但是它们的主要的功能还有待发掘。类似的毒素还有BmP01和LPII等。
第八类是以BmP02为代表，包括从两种蝎毒中分离到的3个多肽：BmP02、BmP03和LP1，由中国产蝎Buthus martensi Karsch粗毒中分离的28肽，含有3对二硫键，氮基酸序列仅有1个残基差异。微弱作用于apamin敏感的小电导Ca2+激活的K+通道（SKCa），对小鼠没有致死毒性。进一步研究表明BmP02能够减弱兔心肌细胞的瞬时外向钾离子流，因此认为BmP02可以作为研究瞬时外向钾离子通道的工具。
第九类是以BTK-2为代表，由印度红蝎Buthus tamulus的粗毒分离所得的一种K+通道阻断剂，有32个氨基酸通过6个保守的cys交联组成，分子量为3452Da。BTK-2与其他K+通道阻断剂有40%-70%的序列相似性。
当然，这种分组并不是绝对的，各类毒素之间不论在结构上，特别是在生物活性方面都有交叉重叠现象，比如CTX除作用于BKCa外，还作用于淋巴细胞中的Kv，果蝇shaker的Kv，爪蟾卵母细胞表达的A型通道（KA）以及来源于Aplysia的SKCa等；NTX除了抑制Kv外，对钙激活钾通道（KCa）也有弱抑制作用；MTX除了抑制shaker钾通道以外，还抑制apamin和KTX与大鼠脑突触体膜的结合。
钙离子通道
这类毒素只分离到了两个：IpTxA和Maurocalcine，从蝎Pandinus imperator和Scorpio maurus palmatus的粗毒中分离得到，均由33个氨基酸残基组成，分子中有3对二硫键，同源性达82%，对小鼠的LD50为20μg/鼠，能够可逆地作用于肌肉型Ryanodine受体（RyRtype 1），使细胞处于持久的亚通透状态。
钙通道毒素富含碱性残基，可以与细胞膜上荷负电的脂肪酸分子相结合，破坏脂双层后进入膜内与胞内Ryanodine受体相作用。与RyRs结合的分子机制同双羟基嘧啶受体II-III环相同，通过与Rryanodine受体之间的作用，激活内质网中Ca2+的释放。
氯离子通道
氯通道毒素（chlorotoxin）是从Leiurus quinquestri蝎毒液中经过凝胶过滤，及HPLC分离纯化得到的一种多肽，它对神经胶质瘤特有的氯通道（gliomaspecific chloridechannel，GCC，在正常脑组织中则不含有）有特异亲和力。分子量为4070，有4个二硫键，由36个氨基酸残基组成。类似的毒素还包括BeI1、BeI5、AmmP2等。氯毒素可抑制原发性脑胶质瘤的侵袭、转移。 按作用对象可分为哺乳动物毒素（MTx，在粗蝎毒中含量高达10%-50%），脊椎动物毒素，昆虫毒素，即抗昆虫蝎毒素（ITx，在粗蝎毒中含量低于1%），甲壳动物神经毒素（CTx）。其划分的依据是根据把一定剂量的蝎毒多肽注射进不同的实验动物小鼠、麻蝇或家蝇、等足类甲壳动物，或将药在不同的离体动物或离体标本所表现的中毒反应，相应地进行分类。其中哺乳动物毒素根据药理和电生理效应又可分为 α 和 β 两型，α 型毒素通过抑制细胞膜上钠离子通道失活而使钠电流衰减，动作电位时程显著延长，而 β 型毒素主要影响钠通道的激活，使电压依赖性的钠激活曲线移向较负的膜电位，即去极化引起的兴奋效应。不过现有研究表明，对MTx和CTx的定义并不严格分明，MTx和CTx对3种动物均有不同程度的毒性，只不过对哺乳动物和甲壳动物的麻痹作用更敏感而已，而ITx的定义相对较为合理些。
1971年，Zlotkin等率先从非洲蝎Androctons australis纯化出抗昆虫蝎毒素Aa IT，并建立了抗昆虫蝎毒素的鉴定方法，该方法采用麻蝇Sarcophaga foalconta幼虫为鉴定材料，后来陆续也有采用家蝇、蟑螂、蝗虫等昆虫。依据作用效应可将其分为具有快速收缩型麻痹效应的CP型（excitory-constractive paralysis）和引起昆虫肌肉缓慢松弛直到完全麻痹的FP型（flaccid-depressant paralysis）。
如以受体位点及电生理作用为分类依据，ITx可进而分为4类：兴奋（exceitory）型、抑制（depressant）型、α›型和β型。当然，在抗昆虫蝎毒素中，对哺乳动物（或甲壳动物）和昆虫都有毒性的毒素也有存在，不过其中有些毒素对昆虫的毒性远大于对哺乳动物的毒性。