A. 为什么做细胞实验的PBS缓冲液不含钙离子和镁离子
为什么做细胞实验的PBS缓冲液不含钙离子和镁离子
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为PBS-T)
配制方法为:称取磷酸二氢钾(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20 ,加水。
PBS:Phosphate Buffered Saline
PBS 1L配方pH7.4:
磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,
磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g,
氯化钠(NaCl):8g,
氯化钾(KCl)0.2g,
加去离子水约800mL
充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。高温高压灭菌后室温保存。 PBS缓冲液(pH7.2~7.4):
NaCl 137mmol/L,KCl 2.7mmol/L,Na2HPO4 10mmol/L, KH2PO4 2mmol/L
PBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,具体试剂一般也有不同的比例配方,在针对性上就有了更好的效果。
1x PBS缓冲液就是使用0.1M的PBS配置,可直接使用,2x PBS就是2倍浓度,使用时稀释一倍使用。0.01M的PBS一般不用来配置缓冲液,用于其它用处。
B. 为什么细胞培养时用到的PBS经常不含有钙镁离子
摘要:因为钙离子和镁离子会影响胰酶的消化能力,导致胰酶消化能力下降,培养细胞时,消化的细胞数量有限,加上细胞的密度依赖性,所以细胞培养时最好使用不含有钙镁离子的PBS缓冲液。
C. 普通配置的pbs是有钙镁离子的吗
为什么做细胞实验的PBS缓冲液不含钙离子和镁离子
含0.05%吐温-20的pH7.4的磷酸盐缓冲液(简称为版PBS-T)
配制方法为:称取磷酸二氢钾权(KH2PO4),磷酸氢二钠(Na2HPO4·12H2O),氯化钠(NaCl),氯化钾(KCl),吐温-20
,加水。
PBS:Phosphate
Buffered
Saline
PBS
1LpH7.4:
磷酸二氢钾(KH2PO4):0.27g,
磷酸氢二钠(Na2HPO4):1.42g,
氯化钠(NaCl):8g,
氯化钾(KCl)0.2g,
加去离子水约800mL
充分搅拌溶解,然后加入浓盐酸调pH至7.4,最后定容到1L。高温高压灭菌后室温保存。
PBS缓冲液(pH7.2~7.4):
NaCl
137mmol/L,KCl
2.7mmol/L,Na2HPO4
10mmol/L,
KH2PO4
2mmol/L
PBS缓冲液一般作为溶剂,起溶解保护试剂的作用,具体试剂一般也有不同的比例,在针对性上就有了更好的效果。
1x
PBS缓冲液就是使用0.1M的PBS配置,可直接使用,2x
PBS就是2倍浓度,使用时稀释一倍使用。0.01M的PBS一般不用来配置缓冲液,用于其它用处。
D. 为什么做细胞实验的PBS缓冲液不含钙离子和镁离子
因为:pbs中加入了na2hpo4和0.24g
kh2po4,他们能与钙离子和镁离子,金属离子结合生成沉淀,
附:
0.01m
磷酸盐版缓冲液(pbs)配权制方法
称取8g
nacl、0.2g
kcl、1.44g
na2hpo4和0.24g
kh2po4,溶于800ml蒸馏水中,用hcl调节溶液的ph值至7.4,最后加蒸馏水定容至1l即可。在15lbf/in2(1034×105pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01m
指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非na
离子或k
离子的浓度,na
离子和k
离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100
u/ml青霉素和链霉素之后再调ph、定容、灭菌消毒。
E. 为什么做细胞实验的PBS缓冲液不含钙离子和镁离子
因为来:PBS中加入了Na2HPO4和0.24g KH2PO4,他们能源与钙离子和镁离子,金属离子结合生成沉淀,
附:
0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可.在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中.
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的.如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒.
F. 为什么做细胞实验的PBS缓冲液不含钙离子和镁离子
因为:PBS中加来入了Na2HPO4和0.24g KH2PO4,他源们能与钙离子和镁离子,金属离子结合生成沉淀,
附:
0.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法
称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中。
需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的。如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒。