dhanks液过滤除菌

Ⅰ 细胞培养用胰蛋白酶溶液如何配制与消毒

博凌科为生物科技-为你解答：胰蛋白酶溶液的配制与消毒：胰蛋白酶的作用是使细胞间的蛋白质水解从而使细胞离散。不同的组织或者细胞对胰 酶的作用反应不一样。胰酶分散细胞的活性还与其浓度、温度和作用时间有关，在pH为8.0、温度为37℃时，胰酶溶液的作用能力最强。使用胰酶时，应把握 好浓度、温度和时间，以免消化过度造成细胞损伤。因Ca2+、 Mg2+和血清、蛋白质克降低胰酶的活性，所以配制胰酶溶液时应选用不含Ca2+、Mg2+的BSS，如：D-Hanks 液。终止消化时，可用含有血清培养液或者胰酶抑制剂终止胰酶对细胞的作用。1. 称取胰蛋白酶：按胰蛋白酶液浓度为0.25％，用电子天平准确称取粉剂溶入小烧杯中的双蒸水（若用双蒸水需要调PH到7.2左右）或PBS（D- hanks）液中。搅拌混匀，置于4℃内过夜。2. 用注射滤器抽滤消毒：配好的胰酶溶液要在超净台内用注射滤器（0.22微米微孔滤膜）抽滤除菌。然后分装成小瓶于-20℃保存以备使用。

Ⅱ 什么是D－Hanks液有什么作用

D-hanks液是一种平衡盐溶液
主要用于洗涤细胞和组织的 也是合成培养基的基础液。如果含有钙镁离子的话 当用消化液消化细胞时 钙镁离子会破坏消化液的活力 影响消化作用

Ⅲ D-Hanks液如何配制啊能不能高压灭菌

这里有很详细的介绍：
动物细胞培养: Hanks、D-Hanks液和消化液(胰酶液)的配制
http://sky.scnu.e.cn/life/class/cellbiologylab/experim/lexp/lexp03.asp
可以进行高压灭菌。

Ⅳ 非最终灭菌产品除菌过滤后有没有必要检无菌

非最终灭菌产品的无菌生产
A级(B 级背景)：处于未完全密封状态下产品的操作和转运，如产品灌装（或灌封）、分装、压塞、轧盖等；灌装前无法除菌过滤的药液或产品的配制；直接接触药品的包装材料、器具灭菌后的装配以及处于未完全密封状态下的转运和存放
B级：处于未完全密封状态下的产品置于完全密封容器内的转运；直接接触药品的包装材料、器具灭菌后处于密闭容器内的转运和存放
C级：灌装前可除菌过滤的药液或产品的配制；产品的过滤
D级：直接接触药品的包装材料、器具的最终清洗、装配或包装、灭菌

Ⅳ 细胞换液为什么用D-HANKS液洗

细胞换液为什么用D-HANKS液洗
知不知道细胞很小的，你细胞衰老后会被水解掉留下部分营养物质于细胞外液中供新分化的利用，位置恰不恰当当然恰当，这是基因决定的，再说了细胞可在特定范围内流动，新细胞在此范围里就可以了.。总之，就是基因的作用，让你细胞该在哪就在哪
可能有多种原因： 目标蛋白对细胞有毒性，导致细胞死亡； 转染试剂以及DNA用量信息需要优化，否则对细胞具有伤害； 细胞贴壁转染之后没有正常换液。 建议： 考虑对目标蛋白进行截短构建、尝试其他细胞系统； 摸索转染试剂以及DNA用量信息，如果转染试剂毒性太大，可以考虑尝试义翘转染试剂sinofection； 对转染后的细胞进行换液处理，如果细胞状态感觉不够理想，可以考虑添加一些血清来帮助细胞恢复健康。 以上所有分析、建议的前提是，细胞培养、无菌操作等等都没有问题。

Ⅵ 过滤除菌的溶液在配制时用在超净工作台进行么

过滤除菌的溶液在配制时用在超净工作台进行么
细胞培养用液的配制与消毒；器材与试剂：；干粉型培养基、胰蛋白酶，青霉素、链霉素.纯净水系；一.PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS，如：；1.溶解定容：将药品（NaCl8.0g，KCl0；2.移入溶液瓶内待消毒：将PBS倒入溶液瓶（大的；3.把已消毒的PBS拿出来时将针头拔出，胶布封住；4.移至超净台中，用消过毒的无针眼胶塞换下有针眼；二.胰蛋白酶溶液的配

细胞培养用液的配制与消毒

器材与试剂：

干粉型培养基、胰蛋白酶，青霉素、链霉素. 纯净水系统、电子天平、PH计、磁力搅拌器。

一. PBS的制备与消毒(也可用于其它BSS，如：Hanks，D-Hanks液的配制)：

1.溶解定容：将药品（NaCl 8.0g，KCl 0.2g，Na2HPO4·H2O 1.56g，KH2PO4 0. 2g
）倒入盛有双蒸水的烧杯中，玻璃棒搅动，充分溶解，然后把溶液倒入容量瓶中准确定容至1000ml，摇匀即成新配制的PBS溶液。

2.移入溶液瓶内待消毒：将PBS倒入溶液瓶（大的吊针瓶）内，盖上胶帽，并插上针头放入高压锅内8磅消毒20分钟。注意高压消毒后要用灭菌蒸馏水补充蒸发掉的水份。
（或分装至5个250ml瓶中，每瓶200ml左右加针头高压消毒）

Ⅶ D-Hanks液和PBS有什么区别

一、含义不同：PBS为磷酸缓冲盐溶液，D-Hanks液为（不含有钙和镁离子）平衡盐溶液。

二、用途不同：PBS是常用的用于生物学研究的一个缓冲溶液，D-Hank's常用于配制胰酶溶液、细胞培养取材时组织块的漂洗、细胞的漂洗、配制其他试剂等。

三、配置方法不同：

PBS配置方法：先将磷酸盐溶解于500mL蒸馏水中，用1mol/L氢氧化钠溶液校正pH后，再用蒸馏水稀释至1000mL。

D-Hanks液配置方法：

1、将原液A和原液B与双蒸水（18份）混合后，分装于200ml小瓶中，10磅高压蒸气灭菌15分钟，临用前用无菌的5.6% NaHCO3调pH至7.2~7.6，最后除去钙和镁离子即D-Hanks液。

2、原液A：将NaCl（160g ）、MgSO4·7H2O（ 2g ）、KCl （8g）、Mg Cl2·6H2O （2g）、 CaCl2（2.8g）溶于1000ml双蒸水。

3、原液B：将Na2HPO4·12H2O（3.04g）、KH2PO4（1.2g）、葡萄糖（20.0g）溶于800ml双蒸水后加100ml0.4%酚红溶液再加蒸馏水到1000ml。

(7)dhanks液过滤除菌扩展阅读：

1、Hanks 液为生物医学实验中最常用的无机盐溶液和平衡盐溶液，简称H。主要用于配制培养液，稀释剂和细胞清洗液，而不能单独作为细胞组织培养液。

2、PBS的用途：主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值，以便让实验的化学反应在最佳条件下进行。部分用于食品或是饲料行业加工。

3、PBS可以为三种溶液的英文缩写，分别是磷酸盐缓冲溶液、磷酸盐缓冲盐水及 磷酸盐缓冲钠，其配制方法不同，pH值不同，发挥的生物学作用亦不完全相同。

Ⅷ 最终灭菌产品为什么要加一部除菌过滤

处于未完全密封状态下的产品置于完全密封容器内的转运、压塞非最终灭版菌产品的无菌生产权
A级(B 级背景)、器具灭菌后处于密闭容器内的转运和存放
C级、分装、轧盖等：直接接触品的包装材料：处于未完全密封状态下产品的操作和转运；产品的过滤
D级：灌装前可除菌过滤的液或产品的配制；灌装前无法除菌过滤的液或产品的配制；直接接触品的包装材料、器具的最终清洗；直接接触品的包装材料，如产品灌装（或灌封）、装配或包装、器具灭菌后的装配以及处于未完全密封状态下的转运和存放
B级

Ⅸ Hanks溶液与D-hanks液的区别,谁知道啊

D-hanks是不含钙镁离子的hanks，主要用于洗涤细胞和组织的 也是合成培养基的基础液。如果含有钙镁离子的话 当用消化液消化细胞时 钙镁离子会破坏消化液的活力 影响消化作用

Ⅹ D-Hanks配好后,115度灭菌30分钟后变黄了,还可以用吗 应该怎么灭菌啊

不可以.碳酸氢盐不可以加热灭菌,而且你的配方里不知道有没有别的成分.但颜色变了就不行.过滤除菌最好,高温灭菌一定不含容易分解的成分