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凝胶过滤层析的优点

发布时间:2021-12-07 23:11:09

① 凝胶过滤层析中和凝胶电泳中的分子筛效应有什么不同

凝胶过滤层析也称分子筛层析、排阻层析。是利用具有网状结构的凝胶的分子筛作用,根据被分离物质的分子大小不同来进行分离。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当一混合溶液通过凝胶过滤层析柱时,溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。
而在聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)中,蛋白质的迁移率取决于它所带净电荷以及分子的大小和形状等因素。进入分离胶后,由于聚丙烯酰胺的分子筛作用,小分子的蛋白质可以容易的通过凝胶孔径,阻力小,迁移速度快;大分子蛋白质则受到较大的阻力而被滞后,这样蛋白质在电泳过程中就会根据其各自分子量的大小而被分离。整块胶板相当于一个分子筛。

② 在操作方面,凝胶过滤与离子交换层析有何异同处

在原理上都是相通的,区别在于流动相和层析剂之间的作用力的不同。
凝胶过滤又名分子筛层析,利用微孔凝胶,将不同分子量的成分分离。
离子交换是利用被分离物质的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用。

③ 凝胶过滤层析和离子交换层析分离蛋白质的原理有何不同

所有的层析在原理上都是相通的,区别在于流动相和层析剂之间的作用力的不同。
离子交换是利用蛋白质表面的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用。
凝胶过滤层析利用了凝胶的多孔性,根据溶剂分子的大小进行分离。

④ 凝胶层析分离物质,有什么优缺点

  1. 凝胶层析操作简便,所需设备简单。有时只要有一根层析柱便可进行工作。分离介质—凝胶完全不需要像离子交换剂那样复杂的再生过程便可重复使用。

  2. 2.分离效果较好,重复性高。最突出的是样品回收率高,接近100%。

  3. 3.分离条件缓和。凝胶骨架亲水,分离过程又不涉及化学键的变化,所以对分离物的活性没有不良影响。

  4. 4.应用广泛。适用于各种生化物质,如肽类、激素、蛋白质、多糖、核酸的分离纯化、脱盐、浓缩以及分析测定等。分离的分子量范围也很宽,如SephadexG类为102~105d;Sepharose类为105~108d。

  5. 5.分辨率不高,分离操作较慢。由于凝胶层析是以物质分子量的不同作为分离依据的,分子量的差异仅表现在流速的差异上,所以分离时流速必须严格把握。因而分离操作一般较慢。而且对于分子量相差不多的物质难以达到很好的分离。此外,凝胶层析要求样品粘度不宜太高。凝胶颗粒有时还有非特异吸附现象。

⑤ 凝胶过滤层析和离子交换层析分离蛋白质的原理有何不同

所有的层析在原理上都是相通的,区别在于流动相和层析剂之间的作用力的回不同.
离子交换是利用答蛋白质表面的电荷与层析剂上的离子基团的静电作用.
凝胶过滤层析利用了凝胶的多孔性,根据溶剂分子的大小进行分离.

⑥ 凝胶过滤层析的基本原理

凝胶过滤层析又称为排阻层析或分子筛方法。其基本原理是利用被分离物质分子大小不同及固定相(凝胶)具有分子筛的特点,将被分离物质各成分按分子大小分开,达到分离的目的。层析柱中的填料是某些惰性的多孔网状结构物质,多是交联的聚糖(如葡聚糖或琼脂糖)类物质,小分子物质能进入其内部,流下时路程较长,而大分子物质却被排除在外部,下来的路程短,当一混合溶液通过凝胶过滤层析柱时,溶液中的物质就按不同分子量筛分开了。

⑦ 凝胶过滤层析和电泳的异同

记得最开始上生物化学的时候,老师问我凝胶电泳和凝胶过滤有什么区别,当时我回回答一个用电,一个答不用电。。。。。凝胶过滤又称为分子筛,是用一根柱子里面有填料,填料是一些粒子,粒子里面有很多的孔,分子比较小的能进入到粒子的孔里面,二分子比较大的就会在粒子旁边流下来。所以用一些蛋白或者是多糖过分子筛,分子大的会先流下来,分子小的后流下来。。。凝胶电泳是运用电泳仪,让蛋白质或者是核酸在凝胶中移动,移动的速率和分子的大小成反比,分子大的跑得慢,分子小的跑得快。。。。简单地说,就是这样。。。。

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