离子交换色谱洗脱剂

A. 离子交换层析中，为什么用氯离子洗脱阴离子

离子交换层析中，为什么用氯离子洗脱阴离子
阴离子交换柱的填料是正电填专料,在低盐条件下可以属通过电荷相互作用吸附样品中的阴离子和负电荷物质（如DNA）.这些带负电的物质由于其带电量不同,分子大小不同,因而与正电填料之间的结合力也就不同.用梯度的氯离子（一般用氯化钠梯度,例如从100mM氯化钠线性梯度升高到1M氯化钠）洗脱挂柱样品时,氯离子会和结合上的物质竞争结合正电填料,伴随着氯离子浓度的不断升高,氯离子的竞争作用越来越强,与填料结合的物质会按照亲和力从弱到强依次洗脱下来,形成独立的洗脱峰,从而将这些物质分开.
阳离子交换柱与之正好相反,柱子填料为负电荷,用钠离子洗脱结合的正电物质.

B. 离子交换树脂的洗脱顺序和什么有关

和树脂的亲和力有关，主要是静电吸引，其次是疏水作用。

树脂的交联度，即树脂基体版聚合时所用二权乙烯苯的百分数，对树脂的性质有很大影响。通常，交联度高的树脂聚合得比较紧密，坚牢而耐用，密度较高，内部空隙较少，对离子的选择性较强。

而交联度低的树脂孔隙较大，脱色能力较强，反应速度较快，但在工作时的膨胀性较大，机械强度稍低，比较脆而易碎。

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大孔树脂内部的孔隙又多又大，表面积很大，活性中心多，离子扩散速度快，离子交换速度也快很多，约比凝胶型树脂快约十倍。使用时的作用快、效率高，所需处理时间缩短。

大孔树脂还有多种优点耐溶胀，不易碎裂，耐氧化，耐磨损，耐热及耐温度变化，以及对有机大分子物质较易吸附和交换，因而抗污染力强，并较容易再生。

交联度高的树脂对离子的选择性较强，大孔结构树脂的选择性小于凝胶型树脂。这种选择性在稀溶液中较大，在浓溶液中较小。

C. 吸附柱色谱分离中怎么选择洗脱剂

在进行吸附柱色谱分离时，应根据样品的性质、吸附剂的性能、流动相的极性三方面的影响因素加于选择。一般的选择规律是：样品极性较大，在极性吸附剂柱上进行分离，则应选用吸附性较弱（即活性较低）的吸附剂，用极性较大的溶剂进行洗脱。组分的极性较弱，就应选用吸附性较强（即活性较高）的吸附剂，用极性较小的溶剂进行洗脱。
化合物极性与其结构有关。按结构的特征，各种有机物的极性大小顺序为：

烷烃 <烯烃 <醚类 <硝基化合物 <酯类 <酮类 <醛类 <胺类 <醇类 <酚类 <酸类

常用溶剂的极性大小顺序为：

石油醚 < 环己烷 < 四氯化碳 < 苯 < 乙醚 < 乙酸乙酯 < 丙酮 < 乙醇 < 水

D. 过离子交换柱时，pH梯度洗脱缓冲液一般用什么缓冲液

如果不限定纯抄化方法，可以考虑亲和层析或离子交换，但根据你问题的意思，是选定离子交换。
此时就要考虑你蛋白的等电点了，如果等电点在你稳定pH之上，就用阳离子交换柱：
设计阳离子交换层析：将你的样品置换到你所指的稳定pH的running
buffer。同时装柱，平衡，然后上样，平衡，洗脱（因为你的pH不稳定，建议盐洗脱），收峰。得你的蛋白；
如果你的等电点在稳定pH之下，就用阴离子交换柱，其步骤如上，只是改变柱子类型。

E. 什么叫色谱柱，什么叫离子交换剂，什么叫固定相啊

色谱是利用待抄分离组分在两种萃取剂中的分配比差异来进行分离的。 实际操作中，会把一种萃取剂装填到一根玻璃管或者不锈钢管里，加上待分离组分以后，用另一种萃取剂去洗脱。 这根装有萃取剂的管子就是色谱柱，里面填充的萃取剂因为不会移动，就叫做固定相。聪明的你一定就明白另一种用来洗脱的萃取剂就叫做流动相了。

在离子色谱里不是这么简单的吸附-洗脱过程 ，而是用离子交换的过程来替代，因此用到的就是离子交换剂，其实也是固定相，但是利用的是离子交换速率的差异了。

F. 离子交换色谱和疏水性相互作用色谱的洗脱原理有何异同

离子交换色谱法是利用离子交换原理和液相色谱技术的结合来测定溶液中阳离子和阴离子的一种专分离属分析方法。凡在溶液中能够电离的物质通常都可以用离子交换色谱法进行分离。现在它不仅适用于无机离子混合物的分离，亦可用于有机物的分离，例如氨基酸、核酸、蛋白质等生物大分子，因此应用范围较广。

G. 离子交换色谱的低级问题

会交换一部分，但因为存在竞争的关系，而且也与浓度有关。所以色谱柱会有再生的过程。详细的建议你去“色谱世界”网站看看，这个网站在色谱方面非常专业，对你会有较大的帮助的。

H. 液相色谱法，吸附色谱中的吸附剂和洗脱剂

首先吸附剂是固定在固定相中的 洗脱剂为所用的流动相 作用是携带待测组分在色谱柱内向前移动并流出色谱柱

I. DEAE-52离子交换色谱柱精制多糖 在加洗脱剂前会不会有多糖出来

这个理论上来说是不会有多糖出来的，但是实际上会有很少的部分会流出，这取决于吸附剂的多少，和能力的强弱