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qiagen树脂再生

发布时间:2021-12-24 01:19:27

1. 凯杰公司生产的硅酮粉有哪些特点

硅酮塑料添加剂由超高分子量聚硅氧烷制成,外观为白色颗粒或粉末。主要用作塑料加工助剂,克服了传统的二甲基硅油加工上的麻烦和性能上的不足,硅酮添加剂使用安全、混合方便、性能稳定,在树脂中容易分散,凯杰的硅酮粉硅氧烷的含量高,性能稳定,且具有以下功能和特点:
● 提高塑料加工流动性和脱模性。降低扭矩,减小设备磨损,充模容易,降低制品不良率;
● 明显降低摩擦系数,提高滑爽性,改善表面光泽,增进表面丝质触感,提高耐刮擦性能;
● 提高阻燃性,降低烟密度,提高阻燃材料(高填充)冲击强度和表面光泽度;
● 具有良好的稳定性和非迁移性

2. qiagen 能提取多大的质粒

质粒提取操作步骤
——QIAGEN(德国凯杰)质粒提取试剂盒
一、细菌培养物的生长
1. 从琼脂平板上挑取一个单菌落,接种到2-5mL含有适当抗生素的LB液体培养基中生长。将液体培养基置于37℃,300rpm的摇床中振荡8小时。
2. 用LB培养基以1/500~1/1000的比例稀释含菌落的培养基。若为了获得高拷贝质粒,用100-200ul含菌落液体培养基接种到100ml LB培养基中;若为了获得低拷贝质粒,用250~500ul含菌落培养基接种到250ml LB培养基中。让其在37℃,300rpm的摇床中振荡12-16小时。
二、细菌的收获和裂解
1. 在6000×g,4℃条件下离心15min,收获细菌。
2. 加入10ml Buffer P1重悬细菌。
3. 添加10ml Buffer P2,剧烈晃动离心管4-6次使其彻底混匀,室温放置5min。
4. 加入10ml冰浴的Buffer P3到此溶菌产物中,晃动离心管4-6次使其混匀。
5. 将溶菌产物倒入针口密封的过滤器中,室温放置10min,不要插入活塞。
6. 打开针口的密封盖,轻轻挤压活塞将溶菌产物过滤到一新的50ml离心管中。
7. 添加2.5ml Buffer ER到过滤的溶菌液中,充分混匀10次后冰上孵育30min。
三、质粒DNA的纯化
1. 将QIAGEN-tip 500的柱子挂在另一离心管上,加入10ml Buffer QBT,让管中溶液慢慢滴下排空。
2. 将第7步冰上孵育的溶菌液加入QIAGEN-tip柱子中让其透过树脂慢慢滴下。
3. 用2×30ml Buffer QC洗QIAGEN-tip柱。
4. 再用15ml Buffer QN洗脱DNA,用离心管收集DNA洗脱液。
5. 加入10.5ml异丙醇到洗脱液中使DNA沉淀下来,混匀。15000×g,4℃离心30min,离心后小心倒出上清液。
6. 洗DNA用5ml无内毒素-70%乙醇(添加40ml 96%-100%乙醇到试剂盒的无内毒素水中),15000×g,4℃离心10min。小心倒出上清液不要碰到质粒。
7. 烘干离心管底部的质粒5-10min。用500ul无内毒素的Buffer TE重新溶解DNA。

3. qiagen endofree plasmid maxi kit试剂盒 价格多少

内毒素,即脂多糖或LPS,是革兰氏阴性菌(如大肠杆菌)细胞膜的组成部分。细菌外膜的外层脂质部分是完全由内毒素分子所构成的。单个大肠杆菌细胞约包含两百万个LPS分子,每个LPS分子由疏水的脂质A(lipid A)部分、复杂的糖类残基阵列部分及负电性的磷酸基团所组成。因此,每个内毒素分子都具有疏水域、亲水域和电荷域,这使它在与其他分子相互作用时具有其独特的自身性质。细菌在其活性生长期向其周围微环境中散布少量的内毒素,在死亡时则释放大量内毒素。
在质粒制备的细菌细胞裂解过程中,内毒素分子被从外膜释放到溶菌液中。

去除内毒素

获得专利的EndoFree Plasmid制备方法在标准IAGEN Plasmid纯化方案中整合了对内毒素的去除步骤。使用QIAfilter Cartridge过滤中性的细菌裂解液,并加入专门的不含内毒素缓冲液(缓冲液ER)在冰上进行共同孵育。不含内毒素缓冲液能够避免LPS分子与QIAGEN-tip中的树脂结合,从而使每微克质粒DNA中含有的内毒素少于0.1EU。

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