❶ 组培时一般母液配置需要用什么水
原则上是用蒸馏水或者无菌水,但是实际组培生产中,直接用自来水的,当然自来水里面的离子含量不能太高
❷ 培养基母液配制的方法如何
花卉组织培养中的培养基配制是一个关键步骤。培养基的配方应根据花卉种类及外植体和培养阶段的特定需求来调整。通常,培养基包含大量元素、微量元素、维生素、激素、糖和琼脂等成分,并在必要时添加有机物如活性炭、香蕉汁或椰子汁等。在实际操作中,首先应选择已有的培养基配方,这些配方是经过科学家研究并验证有效的。若现有配方不满足需求,可以基于MS培养基(Murashige和Skoog的缩写,一种经典培养基)进行调整。接下来,将以MS培养基为例,介绍其配制方法。
1. 配制母液:将培养基中的元素按原配方量的50倍、100倍或1000倍称量后,溶解于水中制成母液。母液制备后应贴上标签,并存放在0至4摄氏度的冰箱中,可保存半年至一年。在制备过程中,注意区分可能发生化学反应或生成沉淀的物质,并使用重蒸馏水进行配制。药物要求使用分析纯或更高纯度的化学物质,确保称量和定容的准确性。
2. 配制培养基:对于每1000毫升培养基,需称取6至10克琼脂作为凝固剂,并按照配方要求进行称量。将琼脂加入水中慢慢溶解。然后,根据母液顺序和规定量进行添加,并根据需要加入生长调节物质,如吲哚乙酸或萘乙酸等。每1000毫升培养基中加入蔗糖30克或根据要求调整,定容至所需体积。在加入热琼脂后,用盐酸或氢氧化钠调整pH值至5.4至6.0之间。趁热将培养基倒入培养容器中,占据容器体积的1/3至1/4,避免沾染容器壁。之后,立即密封并按照高压灭菌锅的操作规程进行灭菌。在121摄氏度、111千帕的压力下维持15至20分钟后,切断电源并待压力恢复正常后打开锅盖,取出培养基。最后,将培养基放在接种室内培养3天,确保无感染后方可用于组织培养。