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蒸馏水配电泳胶

发布时间:2022-04-04 00:18:59

『壹』 电动车硅胶电池可以加蒸馏水吗具体怎么加

电动车冬季电池,是胶体电解液。没有硅胶电池。
这种免维护电池,不可以加(蒸馏)水。
只有湿式电池,根据温度不同,调整电解液(硫酸 蒸馏水 按照一定比重配比 )才可以添加蒸馏水。

『贰』 琼脂糖电泳用什么水配缓冲液

C 解析: 用电泳缓冲液溶解琼脂糖,如TAE:Tris-乙酸、Tris-乙酸-CDTA。这样就能保证胶中的离子浓度与电泳液中的离子浓度相同,在电场中活动一致。

『叁』 在进行琼脂糖凝胶电泳前,用什麽溶液来溶解琼脂糖 A蒸馏水 B自来水 C缓冲液 D甘糖溶液

C

『肆』 配置琼脂糖胶时,可以用蒸馏水和高浓度的TAE液吗

1.用蒸馏水将制胶工具洗干净 准备好制胶平板 用琼脂将模具边缘封闭 架好梳回子
2.根据要分离的答样品(DNA)大小配制合适浓度的琼脂凝胶 准确的称取一定量的琼脂糖干粉 加入到合适体积的锥形瓶中 加入一定量的电泳缓冲液(30ml左右TAE) 放入到微波炉内加热融化 冷却片刻(不烫手即可)
3.融化后的琼脂溶液摇晃混匀 倒入电泳槽中 等其凝固
4.室温下凝固30-40min左右 小心的拔出梳子 取出凝固好的凝胶放入电泳槽内 准备上样
5.在电泳槽中倒入电泳缓冲液(TAE)没过胶面1mm左右 去除胶孔内的气泡
6.上样 5ulDNA样品加入1ul上样缓冲液(loading buffer)和1ul的染料 用抢混匀后加入到凝胶孔内
.上样结束 接通电源 红色正极 黑色负极 DNA样品有负极往正极运动 加样孔侧为负 40-50v电压 电压30敏左右即可(< 40min)
8.电压结束 关闭电源 凝胶成像仪上观察电压位置并比对marker判断大小

『伍』 聚丙烯酰胺凝胶电泳双蒸水的使用

去离子水一般在电泳之后 刚把凝胶分离的时候 先用去离子水冲洗三次 然后再放入固定液 然后再用去离子水清洗三次 然后放入染色液 然后用去离子水清洗三次 一般就用这三次

『陆』 跑SDS-PAGE的电泳缓冲液需要什么水来配制

1.配制电泳试剂用水蒸馏水就可以了就是单蒸水,如果条件允许的话,可以只用更好的当然纯水是最好了;
2.一般实验室都会有蒸馏水,双蒸水,其实双蒸水就能满足大多数实验室的要求,纯水才是所谓的去离子水

『柒』 你知道变性聚丙烯酰胺凝胶电泳的那个胶是怎么配置的需要哪些必备药品还有用水平电泳可以吗

我把我们实验室的实验讲义发给你,供你参考。
你做的应该是蛋白质的电泳吧,只能用垂直电泳。水平电泳用于分离DNA或RNA。

实验十一 SDS-PAGE检测表达蛋白

1.目的
学习SDS-PAGE的基本操作,学会用SDS-PAGE检测蛋白。
2.原理
蛋白质在加热变性以后与SDS结合,带上负电荷,在电场的作用下,向正极移动,结果按分子量大小排列在胶板上,含量多的蛋白带纹粗。
3.器材
旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,1.5ml 微量离心管,双面离心管架,台式冷冻离心机,制冰机,超声波破碎仪,电磁炉,电泳仪,垂直电泳槽及配套的玻璃和密封条、梳子等,摇菌试管,三角烧瓶,接种环,饭盒。
4.试剂
SDS(十二烷基磺酸钠),Acr(丙烯酰胺),Bis(N,N’-亚甲基双丙烯酰胺),Tris(三羟甲基氨基甲烷),甘氨酸,盐酸,Aps(过硫酸氨),TEMED(四甲基乙二胺),蛋白分子量标准(97.4,66.2,43,31,20.1,14.4 kDa),溴酚蓝,甘油,冰醋酸,乙醇,b-2-巯基乙醇,考马斯亮蓝R250,甲醇,乙醇。
5.实验准备
1.0mol/L Tris HCl,pH8.8(4°C保存);0.5mol/L Tris HCl,pH6.8(4°C保存);10%SDS(室温保存);30%Acr/Bis(30g Acr+0.8g Bis dd water 定容至100mL,4°C保存);10%Aps (-20°C保存);2´上样缓冲液(0.5mol/L Tris HCl,pH6.8 2mL,甘油2mL,20%SDS 2mL,0.1%溴酚蓝 0.5mL,b-2-巯基乙醇 1.0mL,dd water 2.5mL,室温存放);5´电泳缓冲液(Tris 7.5g ,甘氨酸36g,SDS 2.5g,加dd water至500mL,使用时稀释五倍);考马斯亮蓝染色液(考马斯亮蓝R250 0.25g + 45ml甲醇+10mL冰醋酸,用dd water定容至100mL);脱色液(95%乙醇:冰醋酸:水= 4.5:0.5:5,体积比);
6.操作步骤
(1) 将表达后的菌体与2´上样缓冲液按1:1混匀于微量离心管中。
(2) 用超声波破碎仪脉冲10次,每次10秒。中间间隔时放入冰中降温。注意一定要将超声波探头插入容液底部,在溶液表面或上部时容易起泡!
(3) 将上述微量离心管插入水漂中,放在电磁炉锅里的沸水中煮3~5min。然后立即插入冰中。(可在-20°C冰柜中保存)。
(4) 组装电泳玻璃并用细橡胶管密封底部和侧面然后用夹子夹住(观察教师的演示)。插入梳子后在玻璃上距离梳子齿底部1cm的地方做一个标记。
(5) 配制10%分离胶。按顺序和量取下列溶液混在一个50mL的小烧杯中(注意Tris为 pH8.8):

Acrylamide-bis 3.96 mL
1M Tris PH8.8 4.38 mL
d.d Water 3.432 mL
10% SDS 118.8 mL
TEMED 9.9 mL
10%APS 118.8 mL
(6) 加完APS后拿起烧杯轻轻转动几下底部将溶液混匀后,立刻缓缓倒入玻璃夹缝中,直到液面与所作的标记齐平。剩下的胶液留在小烧杯中,倾斜放置。然后在上部用1000ml微量移液器轻轻地沿玻璃壁来回移动加满dd water(尽可能不破坏下面的胶液)。然后静置30min。直到烧杯中剩余的溶液凝固。倒出蒸馏水,并倒置玻璃尽可能将水倒尽。
(7) 配支持胶。按顺序和量(注意体积单位!)取下列溶液混在一个50mL的小烧杯中(注意Tris为 pH6.8):

Acrylamide-bis 0.675 mL
0.5M Tris pH6.8 0.563 mL
dd water 3.165 mL
10% SDS 45 mL
TEMED 7.5 mL
10% APS 45 mL
(8) 加完APS后拿起烧杯轻轻转动几下底部将溶液混匀后,立刻倒入玻璃夹缝中,液面与玻璃上边缘齐平。然后再慢慢插入梳子,静置约20min。烧杯中剩下的溶液倾斜放置直到溶液凝固。(此状态可以用塑料薄膜包起来放入冰箱过夜)。
(9) 小心拔出梳子以后,用注射器针头(剪平尖部)吸取梳子齿形成的加样槽中的水,并修平加样槽底部的胶面。
(10) 选取几个形态好的加样槽,在一张纸上做好对应的标记,用微量移液器在侧面的一个加样槽中加入20mL 蛋白分子量,其它槽中加入10~20mL自己制作的样品。
(11) 加完样品后,再用微量移液器吸取电泳缓冲液小心把加样槽液面都补平。电泳槽上部倒满电泳缓冲液(约250ml,淹没过加样槽的液面!),电泳槽的下部倒入一半电泳缓冲液(约180ml)。
(12) 接好电极,将电流调至10mA,待溴酚蓝移到分离胶后,在将电流调至18mA,电泳约2~3h,期间随时观察电泳槽上部的液体是否有泄漏(泄漏导致液面下降,电流中断)!当溴酚蓝移到玻璃距底部0.5cm时切断电源。
(13) 在一个搪瓷盘里准备适量的考马斯亮蓝染色液。
(14) 倒掉电泳槽中的缓冲液,取下玻璃,小心用铲子从下部将带有缺口的玻璃板撬起(切不可损坏胶!)。用铲子切去上部的支持胶,并把分离胶从玻璃上剥离倒染液搪瓷盘里(切不可损坏胶!)。
(15) 染色2h后,在将染液倒回瓶子里以备重复使用。在饭盒里倒入脱色液,过夜。
(16) 观察脱色后胶里的蓝色带纹,与对照比较或寻找异常粗的带纹,并比较其分子量,判断是否是预期的基因产物。
(17) 清理桌面,写实验报告。

『捌』 做聚丙烯酰胺凝胶电泳制胶时能用蒸馏水代替去离子水吗

可以,没问题的。

『玖』 为什么不可以用蒸馏水配置琼脂糖凝胶

因为配置的琼脂胶主要要求是达到无菌。因此普通的蒸馏水就不合适了。要采用无菌水来进行配置。这样可以防止配置好的琼脂中不会产生杂菌。

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